雌孕激素合用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用

目的　观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用。方法　 4个半月龄大鼠双侧卵巢去除术后预防用药 90d。用骨组织形态计量学方法 ,测定大鼠胫骨近端松质骨静态参数和动态参数 ,观察骨和尿中有机质和无机质的含量 ,血清生化指标和器官指数。结果　炔诺酮6 0 μg·kg-1·d-1和炔雌醇 3 5 μg·kg-1·d-1联合应用可抑制去卵巢大鼠的破骨细胞活性 ,完全对抗其骨转化率增高和骨量丢失的骨质疏松症状 ,同时可使去卵巢大鼠的骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少。结论　炔诺酮和炔雌醇联合应用可预防去卵巢大鼠骨质疏松     

小檗碱对糖皮质激素大鼠血脂异常的调节作用

目的 探讨小檗碱对糖皮质激素大鼠血脂异常的调节作用.方法 50只3月龄雄性SD大鼠,随机分成5组,每组10只,分别给予泼尼松与不同剂量小檗碱12周,观察大鼠体质量、血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、钙、磷、丙二醛及超氧化物歧化酶的变化.结果 给予泼尼松后大鼠体质量增加减慢,小檗碱可减轻泼尼松所致大鼠体质量增长幅度下降.给予泼尼松12周后,大鼠血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇和丙二醛显著升高,高密度脂蛋白胆固醇降低;小檗碱可降低糖皮质激素大鼠血液中血糖、甘油三酯、总胆固醇和丙二醛含量,升高高密度脂蛋白胆固醇,对钙、磷及超氧化物歧化酶无显著影响.结论 小檗碱可改善糖皮质激素所致大鼠血脂代谢异常.     

红苓肝宝抗小鼠肝纤维化作用研究

目的：观察研究以药食两用中药红花、茯苓、大枣组成的复方红苓肝宝,对ＣＣl4造成小鼠慢性肝损伤肝纤维化形成的预防作用。方法：４０％ＣＣl4花生油溶液按０皮下注射,连续５周,造成小鼠慢性肝损伤致肝纤维化病理模型,同时另设苓肝宝和大黄Ｚhe虫丸防治组进行观察,检测肝重指数,转氨酶（ＡＳＴ和ＡＬＴ）,血清蛋白,肝羟脯氨酸,肝组织病理学改变和胶原纤维的相对量。结果：单纯用ＣＣl4作模型组的小鼠,５周后与对照组相比,肝重指数明显增加,血清ＡＬＴ、ＡＳＴ的活性显著增强,肝组织羟脯氨酸的含量增高,病理组织学检查可见肝细胞出现大量变性,坏死,胶原纤维增生程度显著增加,出现了典型的慢性肝损伤后肝硬化的早期表明;应用红苓肝宝后,可使中毒小鼠转氨酶下降,白蛋白合成回升,球蛋白含量下降,Ａ／Ｇ比值恢复,还可使肝脏中的羟脯氨酸含量显著下降,病理证明可使中毒小鼠肝脏细胞的变性坏死明显减轻,汇管区和肝小叶内纤维组织增生明显减少。结论：红苓肝宝有降酶和护肝作用,可作为防止慢性肝炎所致的肝纤维化的保健食品应用。     

不同剂量的环磷酰胺对大鼠骨药理作用探讨

目的　观察不同剂量的环磷酰胺对大鼠骨代谢的影响 ,并探讨用环磷酰胺建立大鼠骨质疏松的动物模型。方法　用三种不同剂量的环磷酰胺分别按每天 1 5mg·kg-1,4 5mg·kg-1,13 5mg·kg-1,灌胃给予♂大白鼠 ,连续 15d ,另设生理盐水正常对照组。各组实验结束后用原子吸收分光光度法和羟脯氨酸法测定该模型大鼠肱骨的骨钙及骨羟脯氨酸含量。同时观察对照组和用药组的体重、白细胞数量以及胸腺、肝、脾、肾、肾上腺和睾丸重量 ,并进行比较。结果　 3种不同剂量的环磷酰胺组大鼠与正常对照组比较 ,大鼠的体重、血白细胞数量、重要的免疫器官等的变化与环磷酰胺的剂量有量效关系 ,随着环磷酰胺的剂量增加而药理作用增强 ,免疫抑制作用增大 ,毒性也增加。对骨代谢的影响观察 ,高、中、低 3种剂量的环磷酰胺均可使大鼠骨钙总量减少和骨钙 /骨干重比值明显降低 ,低剂量的环磷酰胺可使骨羟脯氨酸含量增高 ,中剂量的环磷酰胺可使骨羟脯氨酸含量降低 ,而高剂量环磷酰胺对骨羟脯氨酸没有明显影响。结论　环磷酰胺有促进骨钙释放 ,抑制骨钙沉积的作用 ,中剂量的环磷酰胺 (4 5mg·kg-1)可致大鼠胸腺萎缩 ,可造成大鼠骨矿物质和骨基质等比例的减少的骨质疏松模型。     

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨骼的影响

目的:观察淫羊藿总黄酮(EF)对去卵巢大鼠骨骼的影响。方法:4.5月龄雌性SD大鼠40只,随机分为假手术组、去卵巢组、己烯雌酚(DES)组和淫羊藿总黄酮组。己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组大鼠行双侧卵巢去除术后,分别灌喂DES22.5μg·kg-1·d-1、EF300mg·kg-1·d-1,持续90d。用骨组织形态计量学等方法测量胫骨上段和第5腰椎松质骨及胫骨中段皮质骨的动态参数和静态参数,同时测量股骨钙、磷及羟脯氨酸含量,测量子宫湿重及子宫内膜厚度。结果:淫羊藿总黄酮可使去卵巢大鼠股骨钙、磷含量增加,胫骨上段的骨量有增加的趋势,但无统计学意义,腰椎和胫骨中段皮质骨的变化均不明显,子宫湿重及子宫内膜厚度也无明显变化。结论:淫羊藿总黄酮能有效预防去卵巢大鼠的股骨丢失,但不能有效预防胫骨上段和腰椎松质骨的丢失,对子宫没有刺激作用。     

大鼠骨髓间充质干细胞分化成脂肪细胞的定向诱导**☆

背景：研究表明骨质疏松症可能是间充质干细胞分化失衡后过多地向脂肪细胞分化所致。因此,探讨骨髓间充质干细胞成脂分化的影响因素对骨质疏松症防治具有重要意义。 目的:分析骨髓间充质干细胞在体外定向分化为脂肪细胞的适宜诱导条件。 设计、时间及地点：以细胞为对象,重复观察测量实验,于2007-10/2008-07在广东医学院药理教研室完成。 材料：1月龄SD雄性大鼠由广东医学院实验动物中心提供。 方法:无菌条件下分离大鼠股骨,密度梯度离心法与贴壁培养法相结合分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养。第3代骨髓间充质干细胞完全汇合后,利用内含0.1 mmoL/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、0.1 mmoL/L吲哚美辛、1 μmoL/L地塞米松、不同浓度胰岛素及胎牛血清的DMEM定向诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。 主要观察指标：①倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态特征。②油红O染色检测骨髓间充质干细胞成脂肪分化情况。 结果: ①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞。②体积分数为0.05和0.1胎牛血清均能获得较好的成脂分化效果,胎牛血清体积分数增至0.2反而抑制骨髓间充质干细胞成脂分化（P < 0.01）。③10 mg/L胰岛素可获得较好的成脂分化效果,胰岛素质量浓度提高到20,40 mg/L并不能增加骨髓间充质干细胞的成脂分化效果（P > 0.05）。④低糖（含葡萄糖1 g/L）和高糖（含葡萄糖4.5 g/L）DMEM对骨髓间充质干细胞的成脂分化无影响（P > 0.05）。 结论：骨髓间充质干细胞经内含0.1 mmoL/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、10 mg/L胰岛素、0.1 mmoL/L吲哚美辛、1 μmoL/L地塞米松、体积分数为0.1胎牛血清的DMEM分化诱导液定向诱导可获得较好的成脂分化效果。     

药物调控骨髓基质细胞成骨分化与骨质疏松症治疗的方向

目的:骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化的潜能与骨质疏松密切相关,据此,探讨药物通过调控骨髓基质细胞分化方向从而治疗骨质疏松症的前景。资料来源:应用计算机检索Medline1985-01/2005-01期间的与药物调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献,检索词“marrowstromalcells,osteoblast”,或“mesenchymalstemcells,osteoblast”,并限定文献语种为“English”。同时检索中国期刊网全文数据库、万方数据库1990-01/2005-01期间的药物调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献,检索词“骨髓基质细胞,成骨细胞”,并限定文献语种为中文。并手工检索近期的相关中文期刊和相关书籍。资料选择:对资料进行筛选,选择观察药物(包括中药复方)对细胞分化方向进行调控的文章。排除观察其他因子对细胞分化方向进行调控的文章。资料提炼:共收集到调控骨髓基质细胞向成骨方向分化作用相关的文献293篇,21篇符合标准,排除272篇。资料综合:能调控骨髓基质细胞向成骨方向分化的药物包括地塞米松、雌激素、他汀类降血脂药、二甲胺四环素和中药生脉成骨方等。对各种药物调控的特点进行分析,并对通过调控骨髓基质细胞分化方向进行骨质疏松症的治疗的前景进行初步的展望和分析存在的困难。结论:药物如果能促进骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化,又对骨有较高的器官选择性的话,将可能有治疗骨质疏松症的作用,但也还存在很多尚未解决的问题。     

灰色数列预测模型在成骨细胞体外培养中的应用

目的：灰色模型是运用一定的数学方法使信息不完全明确的系统经数据处理后能得到较明确结果的一种数学预测模型，体外细胞培养的影响因素较多，属于信息不完全明确的灰色系统，故运用灰色GM（1，1）模型对成骨细胞增殖、分化的变化规律进行预测，验证模型在体外细胞培养中的可应用性。方法：实验于2005—11／2006—03在广东医学院药理教研室完成。①实验过程：应用酶序列消化分离培养法培养新生大鼠颅骨成骨细胞；用MTT法测定体外培养成骨细胞在不含血清培养液A值，以了解成骨细胞的增殖情况；对硝基苯磷酸盐法观察体积分数为0．01的胎牛血清培养液对体外培养成骨细胞分泌碱性磷酸酶活性的影响，代表成骨细胞的分化情况。②灰色GM（1，1）模型建立：运用灰色系统理论，通过SAS8．1软件对体外培养成骨细胞MTT值和碱性磷酸酶OT值进行分析和预测。结果：运用灰色系统理论的后验差检验方法对模型进行检验，MTT这一指标的平均相对误差为4．4％，碱性磷酸酶这一指标的平均相对误差为7．04％，后验差比值为0．048和0．315，综合评定该模型为“好”。结论：灰色GM（1，1）模型对体外培养成骨细胞MTT值和碱性磷酸酶的OT值变化的预测精度高，结果可靠。体外培养成骨细胞MTT值和碱性磷酸酶的OT值的变化可用灰色GM（1，1）模型进行预测。     

D-半乳糖致雄性大鼠的骨丢失

背景：骨质疏松虽主要受成骨细胞和破骨细胞功能的影响,但D-半乳糖也可导致雄性大鼠骨质丢失。 目的：观察D-半乳糖对大鼠骨组织的影响,并观察其对体外大鼠成骨细胞的影响。 方法：将雄性SD大鼠分成对照组和D-半乳糖组,对照组每天皮下注射生理盐水,D-半乳糖组皮下注5%的D-半乳糖 (100 mg/kg),连续给药3个月后,取左侧胫骨上端和第四腰椎,塑料包埋切片后,用图像分析仪测量骨动、静态参数。体外培养Wistar大鼠成骨细胞,加入不同浓度的D-半乳糖和阳性药物前列腺素,MTT法测定各组成骨细胞增殖情况,PNPP法测定各组成骨细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：D-半乳糖组胫骨上端和第四腰椎与对照组相比,骨小梁面积、骨小梁厚度及骨小梁数目降低,骨小梁分离度升高,说明大鼠骨量明显降低,单荧光周长,骨钙化沉积率和骨形成率也降低,说明骨转换率降低。D-半乳糖对体外培养的大鼠成骨细胞数量没有明显影响,但能提高碱性磷酸酶的活性。实验结果说明D-半乳糖可导致低转换型骨丢失,骨丢失不是因为成骨细胞受D-半乳糖抑制直接引起,而是通过其他的间接机制引起。     

雌孕激素合用对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护效果

背景：有报道雌激素和孕激素联合应用对防治绝经后骨质疏松症有协同作用，且副作用较小。目的：观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨量的影响。设计：随机对照验证性实验观察。单位：广东医学院药理教研室。对象：清洁级4个半月龄未交配的雌性SD大鼠24只，体质量(230&;#177;15)g。方法：实验于2002-05／11在广东医学院药理教研究空完成。大鼠随机分成3组：假手术组，去卵巢组，复方炔诺酮组，每组8只，前2组采用体积分数为0．056的乙醇溶液5ml／(kg&;#183;d)灌胃，复方炔诺酮组采用炔诺酮60μg／(kg&;#183;d)和炔雌醇3．5μg／(kg&;#183;d)灌胃(实验用药剂量参照人的用药20～35μg雌激素+孕激素)。所有动物给药时间为90d。给药结束后取胫骨标本，采用全自动图像分析系统对胫骨近端次级骨小梁形成区进行破骨细胞和有关动静态参数的测量；另取肱骨标本用电感偶合等离子体直读光谱仪测定钙含量和测定羟脯氨酸含量。同时测定尿中的钙和羟脯氨酸的含量。主要观察指标：①各组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度、破骨细胞周长的静态参数变化。荧光周长百分数、矿化沉积率、骨形成率动态参数变化。②血清碱性磷酸酶、骨和尿中钙含量和羟脯氨酸含量变化。结果：24只大鼠均进入结果分析。①去卵巢大鼠与假手术组大鼠相比，骨小梁面积百分数下降，骨小梁数目降低和骨小梁分离度增加，伴随明显的破骨细胞周长增加(P&;lt;0．01)；骨形成指标明显增加：荧光周长百分数和矿化沉积率增加(P&;lt;0．05)，骨形成率(BFR／BV)明显增加(P&;lt;0．01)。②复方炔诺酮组与去卵巢组比较，骨量和骨小梁数目增加，骨小梁面积增加82％和骨小梁数目增加83％(P&;lt;0．05)，骨小梁分离度降低51％(P&;lt;0.05)；破骨细胞周长降低52．5％(P&;lt;0．01)；同时骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少(P&;lt;0．05)。结论：炔诺酮和炔雌醇联合应用可防治去卵巢大鼠骨质疏松，增加骨量和骨有机质含量，且不明显抑制骨形成。实验提供的药物剂量参照人的用量，20～35μg雌激素结合一种孕激素，其效果良好时即可提供一种最好的骨保护作用。