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1.
目的建立一种快速、简便的恒温核酸扩增(NASBA)方法。方法用由AMVRTase、RNaseH、T7RNA聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统,对4例丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒(HCV)E区RNA序列进行扩增,并通过Nothernblot杂交及限制性内切酶对扩增产物进行鉴定。结果经90分钟或180分钟反应后均可扩增出预期大小的产物,放射自显影在预期位置出现阳性杂交信号。扩增产物经聚合酶链反应(PCR)及内切酶SmaⅠ消化后产生预期大小的144bp和359bp的片段,第1次PCR产物经转录实验后与NASBA直接扩增的产物具有较好的同源性。结论NASBA法是一种快速简便的核酸扩增方法,此法扩增出的产物具有良好的特异性。 相似文献
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目的:通过基因免疫诱导BALB/c小鼠产生抗Ⅲ型中国株HCV来源E2糖蛋白的体液免疫应答。方法:质粒p3W14在NIH3T3细胞中能够表达E2糖蛋白,纯化该质粒并用于BALB/c小鼠直接肌注,于加强注射后不同时相采血,以重组的E2糖蛋白检测特异性抗E2抗体。结果:接种p3W14质粒的小鼠中可检出抗E2抗体(5/6),抗体滴度1∶15~1∶120。结论:采用含E2/NS1基因的质粒DNA免疫,成功地诱导小鼠产生抗Ⅲ型株来源的E2抗体。 相似文献
3.
乙型肝炎病毒(HBV)DNA聚合酶(DNAP)活力测定,对于观察HBV的复制和鉴别乙型肝炎的感染与否是有一定指导意义的,本试验自1978年建立以来,由于不少单位没有超速离心机,致使这一灵敏、特异的检验技术,一直没有被广泛地应用于临床,为此,研究改进,建立经济、简易的DNAP活力检测方法,非常必要。 我们自1979年开始研究应用免疫沉淀法,使血清中Dane颗粒被形成特异性抗原抗体复合物沉淀下来,再经Pronase E和NP-40处理测定DNAP活力,并用正交试验选择了DNAP的最佳反应条件,通过对正常人和HBsAg携带者血清中DNAP活力的检测数据比较,证明该方法灵敏度高,特异性强,经济简易,便于推广应用。 相似文献
4.
肝炎诊断试剂的临床验证研究为我国肝炎诊断试剂标准化、系列化研究不可缺少的环节,几年中,本文收集诊断明确的1564份血清,对3类12种24个试剂进行了有同种同类国外参比品的临床验证。文中报告了该项研究工作的方法及总体结果,并对其临床意义及课题中的作用进行了讨论。 相似文献
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高灵敏度抗-HBs固相放免试剂盒(以下简称“抗HBs RIA盒”)的系统研究为本所接受国家“七五”攻关课题之一,经五年研制结果表明,HBsAg质量可通过定量测定HBsAg活性蛋白含量提供高质稳定的原料,根据卫生部检定所国家标准品检定抗HBs RIA的科研试剂盒在敏感性、特异性及定量抗体检测的线性关系上均得到较好结果。中试后可稳定投产,临床验证与美国Abbott试剂盒比较,在质量上接近该种试剂的国际水平,该项国产试剂已达到国家级鉴定要求。 相似文献
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目的 研究白细胞介素2(IL-2)基因对丙型肝炎病毒(HCV)E2基因免疫小鼠后效果的调节作用。方法 构建Ⅱ型HCV E2基因的真核表达载体p3E2,免疫组化法检测其在哺乳动物细胞中的表达情况。用p3E2单独或连同IL-2真核表达质粒一起对BALB/s小鼠进行尾部皮下注射,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测E2抗体的产生情况。结果 E2蛋白在哺乳动物细胞中得到瞬时表达。应用p3E2单独或连同IL 相似文献
7.
BecauseinfectionofhepatitisCvirus(HCV)tendstocausechronichepatitisandlivercirhosisandthetherapeuticresponseratetointerferonwa... 相似文献
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近年来发现丙型肝炎病毒(HCV)不仅可以感染肝细胞,也可以侵入肝外多种组织和器官,尤其其嗜淋巴细胞性正在引起越来越多的关注。已有研究证明,丙型肝炎病人外周血单个核细胞(PBMC)中既有HCVRNA正链存在,也有负链存在,表明HCV可在PBMC中复制。PBMC?.. 相似文献
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原位反转录PCR检测慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞中HCV 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcel,PBMC)中丙型肝炎病毒的定位分布及复制。方法直接原位反转录-PCR(标记引物)对20例慢性丙型肝炎患者的PBMC内丙型肝炎病毒(HCV)的分布、定位及存在形式进行研究。结果16例患者外周血单个核细胞的胞浆内发现HCVRNA阳性信号,并有一例患者的胞浆内发现HCVRNA负链信号。结论HCV可感染PBMC并在其中复制。原位RT-PCR为进一步研究HCV进入人体内的分布、潜伏、复制状况以及丙型肝炎治疗、药物研究奠定了基础。 相似文献
10.
HCV感染的细胞免疫 总被引:3,自引:0,他引:3
目前,对HCV感染的致病机制尚不清楚,免疫机制被认为起重要作用。本文就HCV感染引起的细胞免疫方面作一综述。 相似文献