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VEGF-C基因靶向RNA干扰重组表达载体的构建和表达 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:利用质粒pSilencer3.1-H_1构建针对人血管内皮生长因子-C(VEGF-c)基因的表达载体,测序鉴定并观察在胃癌细胞中的表达.方法:根据质粒pSilencer3.1-H_1要求设计两对小干扰RNA靶序列,退火形成互补的双链,通过与线性化的pSilencer3.0-H_1相应位点连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,酶切电泳及测序鉴定后转染胃癌细胞株SGC-7901,Western blot检测转染前后VEGF-C基因的蛋白表达.结果:经酶切和测序鉴定,针对VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功.转染胃癌细胞株SGC-7901后,Western blot检测显示VEGF-C基因蛋白表达明显降低,pSilencer3.1-VEGF-C1组抑制效果明显,其抑制率为81.2%,与阴性对照组相比差异具有显著性(P<0.05).结论:成功构建了针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体和稳定转染的胃癌细胞株SGC-7901. 相似文献
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目的探讨TSLC1基因启动子区甲基化状态与人原发性肺癌发生发展之间的关系方法采用甲基化特异性聚合酶链技术(MSP),对53例人原发性肺癌组织(肺癌组)、24例肺良性病变组织(良性病变组)、15例癌旁组织(癌旁组)及11例支气管鳞状化生组织进行TSLC1基因5’-CpG岛甲基化状态检测。结果肺癌组、癌旁组和肺良性病变组的TSLC1基因甲基化率分别为35.8%(19/53)、13.3%(2/15)、0.0%(0/24),三组相比差异有统计学意义(P<0.05);支气管鳞状化生组织的甲基化阳性率为18.2%(2/11)。TSLC1基因甲基化率肺癌吸烟者与非吸烟者差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TSLC1基因启动子区甲基化与肺癌的发生关系密切,可能出现在肺癌发生的早期阶段。 相似文献
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目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测59例乳腺癌组织、20例癌旁正常乳腺组织中CXCR4、MMP-9的表达及分布,RT-PCR技术检测乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中CXCR4mRNA表达。结果乳腺癌组织中CXCR4、MMP-9阳性表达率分别为66.1%、62.7%,高于癌旁正常乳腺组织的0、15.0%(P<0.05)。CXCR4和MMP-9表达均与肿瘤的淋巴结转移密切相关(P<0.05),且两者表达呈正相关(rs=0.410,P<0.01)。结论 CXCR4、MMP-9在乳腺癌组织中高表达,并与淋巴结转移相关;联合检测乳腺癌组织中CXCR4、MMP-9的表达有助于判断其预后。 相似文献
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目的了解PBL与LBL相结合与传统的LBL教学法在病理实验课中的应用效果。方法抽取2008级普招2个班作为研究对象,其中一班在病理实验课中采用PBL与LBL相结合的教学法,一班在病理实验课中采用LBL教学法,将两组实验课成绩进行比较和分析。结果实验组病理学实验考试成绩明显高于对照组(P〈0.05)。结论 PBL与LBL相结合教学法能提高同学们的学习兴趣,提高学习成绩。 相似文献
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目的:探讨富脯氨酸蛋白11(PRR11)在食管癌组织中的表达及其在体外对人食管癌TE-2 细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:选取2016 年10 月至2018 年10 月郑州大学第二附属医院胸外科经病理确诊为食管癌患者80 例,收集其手术切除的食管癌组织及相应的癌旁组织标本。用qPCR检测食管癌组织或细胞系中PRR11 mRNA的表达水平,Log-rank Test 法分析食管癌组织中PRR11 mRNA的表达与患者一般资料、组织学分级、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期的关系,Kaplan-Meier 曲线分析法分析PRR11 mRNA与食管癌患者预后的关系。以慢病毒shRNA表达载体感染食管癌TE-2 细胞,构建敲低PRR11 的细胞系及相应的对照细胞系作为本研究的shPRR11#1、shPRR11#2 及对照组,qPCR及WB实验分别验证细胞株中PRR11 mRNA及蛋白的表达水平,MTT实验检测感染后细胞的增殖能力,Transwell 实验检测其侵袭和迁移能力。结果:PRR11 mRNA在食管癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),PRR11 mRNA的过表达与食管癌的组织学分级、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期均显著相关(均P<0.05),PRR11 高表达与食管癌患者预后不良显著相关(P<0.05);shPRR11#1、shPRR11#2 组细胞中PRR11 mRNA及蛋白表达显著低于对照组细胞(P<0.05 或P<0.01)。shPRR11#1、shPRR11#2 组细胞的增殖能力低于对照组(P<0.05 或P<0.01),Transwell侵袭及迁移实验结果显示,shPRR11#1、shPRR11#2 组平均每个视野内细胞数均显著低于对照组(P<0.01)。结论:PRR11 高表达于食管癌组织中,与食管癌的发生、进展及患者预后密切相关;体外实验也证明了敲低PRR11 表达可以抑制食管癌的增殖、侵袭和迁移能力,是潜在的食管癌靶标。 相似文献
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目的:探讨血浆中脆性组氨酸三连体基因(fragile histidine triad,FHIT)、p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因(O6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)及信号转导通路基因(rasassociation domain family1A,RASSF1A)等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specifi c PCR,MSP)法,检测53例肺癌组织和对应的血浆标本以及24例肺良性病变组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A4种基因启动子区甲基化状态。结果:肺癌组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A基因启动子区甲基化检出率分别为39.6%(21/53)、49.1%(26/53)、35.8%(19/53)和18.9%(10/53);其对应的血浆标本中这4个基因的甲基化检出率分别为35.8%(19/53)、49.1%(26/53)、28.3%(15/53)和17.0%(9/53),两组标本甲基化检出率存在着较好的一致性(P>0.05)。24例肺良性病变组织标本和血浆标本中分别有同1例(0.04%)出现p16基因甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4项指标联合检测可显著提高肺癌检测的敏感度(73.6%)和特异度(95.8%)。p16基因在血浆中甲基化检出率与患者吸烟指数有明显相关性(P<0.05)。结论:血浆中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。 相似文献
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目的探讨常山酮抑制乳腺癌脑转移的作用。方法本实验分为溶剂组及常山酮组,以人乳腺癌细胞MDAMB-231及BALB裸鼠为研究对象,首先通过体外实验,使用MTT法、划痕试验及Western blot观察各组MDA-MB-231增殖、迁移及bax、bcl-2、cleaved-caspase3等凋亡相关蛋白的表达情况;然后制备乳腺癌脑转移模型,通过神经功能评分及脑部HE染色观察各组脑转移情况。结果常山酮显著抑制了MDA-MB-231的增殖和迁移能力,增加了bax及cleaved-caspase3蛋白的表达水平,并减少了MDA-MB-231向脑部的定植。结论常山酮可能通过抑制细胞增殖及迁移、促进凋亡等机制抑制乳腺癌细胞脑转移。 相似文献