重组人干扰素β1b治疗复发缓解型多发性硬化症的安全性及临床疗效

目的观察重组人干扰素β1b(rhIFNβ1b)治疗复发缓解型多发性硬化症(RRMS)的安全性及临床疗效。方法选择20名健康志愿者,分为1.5、3、6和9MIU4个剂量组,每天按剂量皮下注射1次rhIFNβ1b,连续注射8d,观察药物的安全性、耐受性和药代动力学。选择101例RRMS患者,随机分为观察组(52例)和对照组(49例),每周3次分别注射6MIU的rhIFNβ1b和25mg人血白蛋白,用药1年后,2组均注射6MIU的rhIFNβ1b,每周3次,用药1年。定期随访并进行各项指标及核磁共振成像(MRI)检查,观察药物的临床疗效,同时进一步观察安全性。结果安全性观察显示,rhIFNβ1b在9MIU剂量范围内耐受性良好。观察组和对照组分别注射rhIFNβ1b后,可显著减少RRMS患者头部与脊髓中病灶数量或缩小病灶体积,并显著降低复发率,且随着用药时间的延长,效果更加明显。结论rhIFNβ1b安全性和耐受性良好,临床影象学评价疗效显著。     

ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证

为验证ELISA法检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白方法的可靠性,由2个部门对12个样品进行4人连续3天的验证。结果表明:4人连续3天的12次检测结果均满足牛血清白蛋白ELISA法(BSP-ELISA法)标准曲线成立的条件,建立合格标准曲线的成功率为100%;对5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL浓度的牛血清白蛋白(BSP)标准品,不同实验人员间测定结果的变异系数在2.87%~6.33%之间,精密度较好;回收率在92.9%~103.1%之间,说明不同人的测定结果准确度高。分别采用该方法与已上市的牛血清白蛋白试剂盒对7种疫苗中100个样品的残余BSP含量进行检测,二者的检测结果合格符合率为100%,用该方法对已上市的检测BSA试剂盒中的4个标准品进行检测,回收率在90.0%~117.1%,检测灵敏度为2.5ng/mL,表明BSP-ELISA法可以敏感、准确地定量检测BSA,可用于目前我公司疫苗制品中残余牛血清白蛋白的质量控制。     

基于模糊综合评判方法评价聊城市水资源承载力

应用模糊综合评判方法对聊城市水资源承载能力进行了分析评价。结果表明：聊城市综合评分值对v1的隶属度为0.7354,综合评分值仅为0.178,表明聊城市水资源开发利用已有相当的规模,进一步开发利用的潜力很小。今后应该合理利用水资源,节约用水,加强对水资源的治理及保护。     

酶联法检测流感疫苗中卵清蛋白含量试剂盒的质量验证

目的验证酶联法检测流感疫苗中卵清蛋白含量的试剂盒的质量。方法选取卵清蛋白标准品及20批全病毒流感灭活疫苗,对北京天坛生物制品股份有限公司生产的卵清蛋白ELISA试剂盒(简称天坛试剂盒)进行验证,确定该试剂盒的最佳检测区间、精密度、准确度及稳定性,并与德国Seruzym试剂盒进行比较,确定二者之间是否有相关性。结果天坛试剂盒的最佳检测区间为2.5~20ng/ml,试验间精密度分别为0.37%~9.79%、1.25%~5.57%和0.70%~5.51%,均小于10%;试验内精密度为1.28%;配制5、10和20ng/ml3个浓度的标准品,由同一实验人员分别进行9次准确度验证,回收率分别为105.67%、108.61%和98.67%;37℃放置3d与4℃保存的试剂盒检测结果之间差异无显著意义(t=2.075,P=0.0518);与进口试剂盒检测结果之间存在正相关关系(r=0.989,t=24.56,P<0.0001)和直线回归关系(b=0.629,F=602.97,P<0.0001),直线回归方程为y=0.629x-13.77。结论天坛试剂盒具有较好的精密度、准确度及稳定性;检测结果与进口试剂盒存在正相关和直线回归关系,可以用于卵清蛋白的常规检测。     

牛血清中牛腹泻病毒牛肾细胞直接病变检测方法的建立

目的建立牛血清中牛腹泻病毒(BVDV)的牛肾细胞直接病变检测法。方法将样品接种至牛肾(CK)细胞上,通过观察细胞病变,判定样品是否污染BVDV。结合病毒增殖曲线及不同培养时间的检出率,确定最佳判定时间,并对检测方法进行验证及应用。结果该方法的最佳判定时间为10d;测定限度为100～240CCID50/ml;样品冻融次数及不同批次的牛血清样品对试验结果影响较大;应用该方法检测134批牛血清样品,BVDV污染率约为7.5%。结论已建立牛血清中牛腹泻病毒牛肾细胞直接病变检测法。     

麻疹减毒活疫苗S191生产用毒株的遗传稳定性

目的分析麻疹减毒活疫苗S191生产用毒株病毒结构基因的遗传稳定性。方法将北京天坛生物制品股份有限公司(天坛生物)用于麻疹疫苗生产的S191株25代病毒(S191-BJ25)传至29代(S191-BJ29),上海生物制品研究所保存的S191株24代病毒(S191-SH24)传至33代(S191-SH33)。从S191株传代病毒中提取RNA,对病毒结构基因片段N、M、F、H进行扩增及测序。将测序结果与GenBank中1994年收录的S191株麻疹病毒的相应序列进行比较分析。结果S191-BJ25传代病毒N、M、F、H4个基因的总突变率为0.02%,S191-SH24传代病毒为0.15%;与1994年的S191疫苗株相比,S191-BJ25传代病毒N、M、F、H4个基因的总突变率为0.3%,S191-SH24传代病毒为0.4%。结论目前天坛生物使用的麻疹疫苗S191株生产用三级种子库具有可靠的遗传稳定性,从主代种子到疫苗的传代过程中,N、M、F、H结构基因表现出稳定的分子遗传特征。目前使用的S191毒株的4个结构基因较1994年以前的疫苗株发生了变化,但目前没有证据表明这些变化对免疫原性产生不利影响。     

检测血清中血红蛋白含量的邻-甲联苯胺法的建立

目的建立牛血清中微量血红蛋白含量的检测方法。方法血红蛋白中亚铁血红素可使邻-甲联苯胺氧化显蓝色,加酸后呈黄色,吸收峰在435nm,检测不同浓度标准血红蛋白与邻-甲联苯胺反应后的吸光度,确定此法的线性范围。再取线性范围内的高、中、低和最低4个血红蛋白浓度的样品各6份,测定回收率,确定定量限。结果邻-甲联苯胺法的线性范围为7.5~30.0mg/dl,相关系数r>0.99,定量限为10.0mg/dl。当血红蛋白浓度为10mg/dl时,回收率为98%~109%,变异系数为2.4%~3.5%。检测牛血清71批,68批血红蛋白含量为0.002%~0.02%,3批血红蛋白含量为0.03%。结论邻-甲联苯胺法简单、准确,可用于牛血清中血红蛋白含量检测。     

滴定痘苗病毒的噬斑血吸附法的优化

目的对滴定痘苗病毒的噬斑血吸附法进行优化,克服该方法稳定性差、结果数据偏差大的问题。方法通过预试验确定痘苗病毒的最佳稀释倍数、病毒吸附温度及鸡血球加入方法等参数。采用优化的噬斑血吸附法,对天坛株痘苗病毒的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗进行滴定,计算变异系数(CV),确定试验内、试验间和不同实验人员间的精密度。利用Qstat软件分析本次与以往滴定结果之间的关系。结果病毒的最佳稀释度为10-6,最佳吸附温度为25～30℃,加入鸡血球的最佳方法为病毒吸附72h后,弃去部分培养液,再加入鸡血球。4种样品测定结果的试验内、试验间和不同实验人员间的变异系数均小于5%,病毒滴度分别为(7.12±0.18)LgPFU/ml、(7.79±0.21)LgPFU/ml、(7.88±0.17)LgPFU/ml和(7.64±0.14)LgPFU/ml,均高于以往滴定结果。本次与以往滴定结果之间存在线性相关性。结论优化了滴定痘苗病毒滴度的噬斑血吸附法,确定了天坛株痘苗病毒的原始种子批、主种子批、工作种子批和参考苗的滴度,为天花疫苗多项检定试验提供了可靠依据。     

我国黄热疫苗株病毒结构基因片段遗传特征的分析

目的分析中国使用的黄热疫苗株病毒结构基因片段的遗传特征。方法从我国使用的黄热疫苗病毒中提取RNA,对病毒结构基因片段进行扩增及测序,将测序结果与GenBank中黄热病毒Asibi株及黄热病毒疫苗株17D-204和17DD相应的核苷酸序列进行比较。结果中国黄热疫苗株在基因分子水平上具有17D疫苗株的基本减毒特征,与17DD株不同,与17D-204株更为相近。结论中国黄热疫苗株源自17D-204株,是安全有效的减毒株,且具有自身特有的遗传特征。