牛乳过敏原及加工技术对其致敏性的影响

对婴幼儿来说,牛乳营养丰富,是母乳最好的替代品,但牛乳中的蛋白质可能会引起过敏。牛乳中的主要过敏原是酪蛋白、β-乳球蛋白和α-乳白蛋白。本文从牛乳过敏原的结构和抗原表位、热处理、发酵和酶处理等不同的加工技术对牛乳蛋白致敏性的影响和过敏原标记检测方法三个方面进行了综述,为开发低致敏牛乳制品提供借鉴。      

疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶在毕赤酵母中的高效表达和性质鉴定

通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体p PIC9K中。结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液的上清脂肪酶表达量达到0.1 mg/m L,对应的p NPP水解酶活达到312.72U/m L。与对应的原始编码基因重组菌酶活(179.42 U/m L)相比,密码子优化后酶活提高74.29%,表明密码子优化策略成功提高了TLL在巴斯德毕赤酵母中的重组表达。比较毕赤酵母来源的重组TLL与商业化的米曲霉酶学性质发现它们具有相似的最适p H和温度耐受范围。另外,它们在有机溶剂耐受性、表面活性剂和金属离子效应以及位置选择性方面均较为相似,表明毕赤酵母来源的重组TLL同样具有商业化应用的潜力。     

米黑根毛霉脂肪酶基因的酵母重组表达和Kex2位点改造

米黑根毛霉脂肪酶(RML)具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。     

生理活性物质酪蛋白磷酸肽的功能及应用

生理活性物质酪蛋白磷酸肽的功能及应用冯凤琴，许时婴，王璋（无锡轻工大学食品科学与工程系，无锡，２１４０３６）自然界赋予很多食物以保健和治疗功能。由于我们在分子水平上对食物成分进行分析和测试的能力不断提高，因此，对食物成分的分子结构与功能的关系以及它们...     

酪蛋白酸肽（CPPs）的分子量及持钙功能的分析

实验对不同来源的酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ）的氮与磷的摩尔比值（Ｎ：Ｐ）、分子大小及结合钙的最大量进行了分析和测定，初步探讨了ＣＰＰｓ和Ｎ：Ｐ，分子大小和结合钙的能力之间的关系。Ｎ：Ｐ较小则ＣＰＰｓ制品的纯度较高或磷酸基密度较大，也即ＣＰＰｓ制品中分子量较小部分占的比例较大，结合钙的能力也较强，Ｎ：Ｐ能较客观和综合地反映ＣＰＰｓ的肽链长度和磷酸基密度，因而可以作为ＣＰＰｓ的特性指标     

气相色谱法测定月桂酸单甘酯含量的方法研究

为建立气相色谱测定月桂酸单甘脂的方法,采用六甲基二硅胺烷(HMDS)和三甲基氯硅烷(TMCS)作为衍生化试剂,用吡啶作溶剂和催化剂将月桂酸单甘酯合成粗品中的各种组分硅烷化,用OV-17玻璃填充柱进行分离分析,并以十四酸作为内标物,用内标法进行定量。试验结果:月桂酸单甘脂的线性范围是1.11～11.11mg/mL,检出限是0.063mg/mL。此外,将气相色谱法同高碘酸氧化法进行了比较,结果表明:气相色谱法比高碘酸氧化法高效、精确。     

生物活性肽——酪蛋白磷酸肽(CPP)的功能及应用

阐述了酪蛋白磷酸肽 (CPP)的结构、功能及特性 ,特别是 CPP与其它补钙剂或 VD 相比的作用特点 ,CPP的应用特点。还对 CPP的生产工艺、不同规格的 CPP产品及其在不同类型的食品和保健品中的应用做了介绍。说明了 CPP可作为一种新型的营养吸收促进因子 ,应用于食品、饮料和保健品中以提高产品的附加值 ,实现产品的升级换代。      

Sn-2位富含棕榈酸甘油三酯的酶法制备研究

以棕榈硬脂为原料,以非专一性脂肪酶Novozym 435作催化剂,将棕榈酸作为酰基供体与棕榈硬脂进行酸解反应,制备Sn-2位富含棕榈酸的甘油三酯,为下一步制备母乳脂肪替代油脂提供原料。首先,通过单因素实验确定了各因素的范围,再应用Box-Behnken中心组合实验设计建立二次多项数学模型,进行响应面分析。结果表明,当棕榈酸与棕榈硬脂质量比1.09∶1,反应时间9.9h,反应温度54.7℃,加酶量21.9%时,反应所得甘油三酯中Sn-2位棕榈酸可达到60.59%,可满足下一步制备母乳脂肪替代油脂的要求。      

Silver-ion HPLC测定1,3-二油酸-2-棕榈酸三酰甘油的含量

准确测定1,3-二油酸-2-棕榈酸三酰甘油(OPO)的含量,建立了一种以高效液相色谱结合银离子交换柱(Silver-ion HPLC)的测定方法。以ChromSpher 5 Lipid(25 cm×4.6 mm,5μm)银离子交换柱通过HPLC正相系统分离三酰甘油,配合蒸发光散射检测器(ELSD),以毒性较小的二氯甲烷和丙酮为流动相。流速0.6 mL/min,柱温30℃。漂移管温度30℃,空气压力0.35 MPa。在此条件下,1,3-二油酸-2-棕榈酸三酰甘油和1,2-二油酸-3-棕榈酸三酰甘油两种同分异构体基本达到分离,样品出峰完整,峰形良好。OPO色谱峰面积的自然对数与浓度的自然对数呈良好的线性关系(R2=0.998 8)。用该方法测定了母乳脂肪、实验室合成结构油脂样品、商品结构油脂、棕榈油和山茶油中OPO的含量。结果表明该方法的灵敏度高、重现性良好。     

响应曲面法优化母乳化结构油脂制备工艺

文中对母乳化结构油脂的制备工艺进行优化。选用Sn-2位富含棕榈酸的猪油为原料,以Sn-1,3专一性脂肪酶Lipozyme RM IM作催化剂,与游离脂肪酸进行酶促酯交换反应制备母乳化结构油脂。通过单因素试验和响应面法优化工艺参数,建立了合成产物中Sn-2棕榈酸分布与反应温度、底物比酰基供体与猪油摩尔比、反应时间、加酶量之间的二次回归模型,即Y=-2 304.15+63.75 A+129.27 B+158.19C+45.85D-0.28AB-1.21AC-0.12AD-6.02BC-0.36BD+3.62CD-0.50A2-24.64 B2-52.00C2-2.05D2。优化后的工艺条件为:反应温度60.42°C;底物酰基供体与猪油的摩尔比为2.08∶1;反应时间1.05 h,酶/底物10.15%,制得的结构油脂中棕榈酸含量为20.35%,其中71.68%位于Sn-2位,与母乳脂肪的结构基本一致。表明采用RSM优化得到的酶促酯交换工艺条件参数适合以猪油为原料,制备母乳化结构油脂,建立的模型可以进行准确可靠的预测。