基于线粒体损伤机制的药物性急性肾损伤研究进展

药物性肾损伤约占急性肾损伤发病率的20%,易发展为肾衰竭。目前临床除了肾脏替代疗法,尚无有效的治疗措施。越来越多的证据表明线粒体结构和功能损伤在药物性急性肾损伤的发生发展中发挥了重要作用。本文就药物性急性肾损伤领域中线粒体损伤的相关机制、潜在的生物标志物以及可能的干预靶点的研究进展作一综述,以期为临床上药物性急性肾损伤的早期诊断和治疗提供新的思路。     

d-Penicillamine2,5-enkephalin作为底物考察三明治大鼠原代肝细胞的转运体功能研究

目的: 通过液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定d-Penicillamine2,5-enkephalin (DPDPE)在肝细胞和Hank's缓冲液中的浓度,研究DPDPE作为底物用于“三明治”培养大鼠原代肝细胞(SCRH)的转运体功能。方法: 将SCRH与溶于Hank's缓冲液的DPDPE共温孵,采用LC/MS/MS法测定细胞内蓄积的和外排到缓冲液中的DPDPE浓度,用于评价模型药物α-萘异硫氰酸酯(ANIT)对参与DPDPE摄取的Oatp和负责DPDPE外排的Mrp2的转运功能的影响。结果: 建立的样品处理和测定方法能够满足体外转运实验需要的灵敏度和线性范围,在Hank's缓冲液中线性范围为0.5~50 ng/mL(r²=0.9995),在细胞基质中线性范围为 0.1~5 ng/well(r²=0.9997),样品处理操作简便。日内日间精密度(RSD)均小于15%;提取回收率大于65%。ANIT可抑制DPDPE在SCRH胆管侧的外排及基底侧的摄取,对基底侧外排无显著影响。结论: 该分析方法选择性好,灵敏度高,操作简便,并成功地用于将DPDPE作为探针底物研究SCRH模型上转运体的功能。     

人肝肿瘤细胞中霉酚酸II相代谢特征研究

目的: 研究和比较体内外肝肿瘤细胞和正常肝细胞II相代谢特征。方法: 采用体外培养人肝肿瘤细胞株与正常人肝细胞株、临床来源肝肿瘤组织与肿瘤旁组织,检测UGT1A9的基因与蛋白水平表达,以霉酚酸为模型药物、HPLC法定量测定霉酚酸及其葡萄糖醛酸结合物,考察霉酚酸在上述细胞和组织微粒体中的代谢强弱,分析肝肿瘤细胞与正常肝细胞中II相代谢酶UGT1A9的功能与差异。结果: 体外培养人肝肿瘤细胞HepG₂和临床来源人肝细胞瘤组织中UGT1A9表达分别高于正常人肝细胞L-O2和人肝肿瘤癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。然而人肝肿瘤细胞HepG₂和人肝肿瘤组织对霉酚酸的代谢能力远低于人正常肝细胞L-O2和人肝肿瘤癌旁组织(P<0.05)。结论: 人肝肿瘤细胞与临床来源人肝细胞瘤组织中UGT1A9的表达与功能存在不相关性,提示肿瘤细胞中虽然UGT1A9表达较高,但其功能存在某些缺失,可能与肿瘤细胞内营养相对缺乏有关。     

血脑屏障上ABC转运体与中枢神经系统疾病相关性的研究进展

ABC转运体作为血脑屏障上一类重要的外排转运体,介导了内源性物质、药物及环境毒素的外排过程。疾病状态下,ABC转运体的功能及表达会发生改变,有些疾病会导致转运体过表达或者活性增强,引发耐药现象;还有一些疾病会引起转运体损伤,导致毒素蓄积脑内,加剧疾病的发展。将各种脑部疾病与ABC转运体之间的关系研究清楚,将有助于阐明致病机制,并可为改善脑部耐药及治疗中枢神经疾病提供思路和策略。本文就这一问题,综述了血脑屏障ABC转运体在多种疾病状态下功能与表达的变化,及这些改变对疾病产生的影响,并初步探讨了相关机制,提出了一些改善耐药和治疗疾病的策略。     

前药的药代动力学研究进展

前药是自身无活性,在体内经生物转化后释放出有药效活性的代谢物或原药的化合物。前药设计已成为改善药物的一些不良性质如水溶性低、生物利用度差、半衰期太短及缺乏理想的靶向性等的一种重要手段。然而如何从药物代谢动力学角度评价前药尚缺乏统一的标准。本文对近年来前药的药代动力学研究状况进行了概括总结,并提出如何从吸收、分布、代谢和排泄角度对前药的药代动力学性质进行全面评价。     

第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂在非小细胞肺癌临床治疗中的应用及研究进展

表皮生长因子受体（EGFR）是非小细胞肺癌（NSCLC）靶向治疗最重要的靶点之一。目前,靶向EGFR突变的酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）已发展至第三代,广泛用于治疗伴有EGFR敏感突变和伴有EGFR T790M耐药突变的NSCLC患者。然而,第三代EGFR TKIs用药过程中不可避免地会出现继发耐药,限制了该类药物的长期使用和临床治疗预后。本文首先围绕已上市或处于临床研究的第三代EGFR TKIs,重点综述了它们的作用特点和临床疗效。其次,从EGFR依赖性耐药和EGFR非依赖性耐药两个方面,归纳了第三代EGFR TKIs发生继发耐药的潜在机制。最后,针对EGFR依赖性耐药、EGFR非依赖性耐药和机制不明确的耐药,分别总结了可能有效的后续用药策略,以期为以EGFR为靶点的药物开发和临床应用提供借鉴和参考。     

代谢组学技术在疾病诊断中的应用

代谢组学是一门在新陈代谢的动态进程中, 系统研究代谢产物的变化规律, 揭示机体生命活动代谢本质的科学。本文对代谢组学的概念、特点、研究方向及研究方法作了简要介绍, 综述了当前代谢组学技术在临床疾病诊断中的应用, 并对代谢组学的发展作了展望。     

液相色谱-电喷雾电离质谱法检测地高辛人血浆药物浓度方法学的建立与考证

目的 建立适用于地高辛临床血药浓度监测的液相色谱-电喷雾电离质谱方法(LC-ESIMS)。方法 地高辛人血浆样本采用乙酸乙酯液液萃取后以LC-ESI-MS 方法进行分析。采用KromasilC₁₈柱(150 mm ×2.00 mm, 3.5 μm)分析柱;在乙腈和氯化铵的混合流动相的流动相系统中,进行梯度洗脱, 选择性负离子检测, 地高辛m z为815.40, 内标RgC₂ m/z 为819.00。结果 地高辛在0.05 ~ 10.0 ng/mL 浓度范围内线性关系良好(r=0.9989), 血浆内杂质不影响药物的检测, 方法回收率大于75 %, 批内、批间变异均小于15 %,冻融稳定性良好。结论 本研究所建立的LC-ESIMS测定方法操作简便、快速、灵敏, 准确, 重现性好, 所需血浆量少, 可用于地高辛临床血药浓度监测及临床药动学研究。     

Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取及代谢研究

目的:研究Caco-2 细胞对人参皂苷Rg3 的摄取、代谢及其动力学变化。方法:采用液相色谱质谱联用(HPLC-MS) 检测方法测定细胞中Rg3 及其代谢产物Rh2 药物浓度, 考察时间、pH 值、温度、药物浓度及抑制剂对Rg3 摄取速率及代谢物产量的影响。结果:Rg3在Caco-2细胞上的摄取是时间及浓度依赖性的, 其被动转运系数K_d 为0.07 nmol·h^-1 ·mg^-1prot;最大摄取速率V_max 为3.32 nmol·h^-1·mg^-1 prot;Km是16.31 μmol·L^-1 。加入代谢抑制剂叠氮化钠及2, 4-二硝基酚时摄取速率明显降低(与对照组相比P <0.01) 。结论:Caco-2 细胞模型适用于人参皂苷的吸收机制研究;Rg3 在肠道中的代谢为其生物利用度低的原因之一。     

抗肿瘤纳米制剂药代动力学评价的研究进展

抗肿瘤药物水溶性差、药代动力学行为不理想等特征在临床应用中严重影响疗效。抗肿瘤纳米制剂的开发可以实现药物増溶的目的 ,能够改善抗肿瘤药物的药代动力学行为,具有良好的应用前景。本文综述了抗肿瘤纳米制剂的研究现状,分别从整体和细胞水平介绍其药代动力学行为特征,探讨抗肿瘤纳米制剂发挥优势可能的作用机制。