OCTN2基因多态性影响结直肠癌奥沙利铂化疗敏感性

目的：研究OCTN2基因多态性是否影响OCTN2的表达和功能,以及结直肠癌细胞系SW480对奥沙利铂敏感性。方法：构建OCTN2基因4种突变（F17L、E317K、S467C和P478L）转染细胞系。Real-time RT-PCR及Western blot检测OCTN2 mRNA和蛋白水平的表达。HPLC检测细胞内奥沙利铂含量。MTS法检测细胞活性。结果：所有突变型OCTN2 mRNA和蛋白表达水平与野生型表达无统计学差异。E317K和S467C细胞系对奥沙利铂摄取（Vmax和Km）与野生型相比无差异（P>0.05）,F17L的Vmax下降到66.4%,而Km值增加到120.3%,P478L的Vmax增加到132.6%,Km值降低到82.2%,与野生型相比有统计学差异（P<0.05）。所有过表达OCTN2细胞的IC50值显著降低。与SW480-OCTN2转染细胞系比较,没有转染的SW480细胞和F17L细胞系的IC50值分别升高175%和147%,而P478L细胞则下降到76.9%,有统计学差异（P<0.05）。E317K和S467C的IC50值无明显改变（P>0.05）。结论：OCTN2转运体基因F17L和P478L错义突变可以改变OCTN2对奥沙利铂的摄取,从而影响OCTN2稳定表达细胞系对奥沙利铂的敏感性。