联苯双酯对肾移植受者环孢素A 全血浓度的影响及肝毒性的防护作用

目的 研究肾移植受者应用联苯双酯(bifendate,BFD) 对环孢素A(cyclosporin A, C_sA) 全血浓度的影响及肝毒性的防护作用。 方法 28 例患者(合用组) 合用C_sA 与BFD, 30 例患者(对照组) 单服C_sA, 以C_sA 全血浓度及肝功能作为临床评价指标。 结果 BFD 能有效降低肾移植受者异常升高的ALT和AST, 合用BFD 后C_sA 全血浓度与合用前比较降幅达17.7 %, 与对照组比较亦有显著性降低(P <0.01), 停用BFD 后C_sA 全血浓度明显升高, 增幅达36.3 %。 结论 BFD 能防护肾移植受者C_sA 肝毒性并能明显降低C_sA 血浓度。     

五味子甲素对大鼠咪达唑仑及其代谢物1′-羟基咪达唑仑药动学影响

目的: 探讨五味子甲素(SchA)是否影响CYP3A底物-咪达唑仑在大鼠体内的代谢。方法: 不同剂量的五味子甲素或酮康唑75 mg/kg连续灌胃 3 d,采用单次十二指肠给药及腹股沟动脉插管,以CYP3A抑制剂(酮康唑)作为阳性对照,研究咪达唑仑在大鼠体内的代谢。高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中咪达唑仑及其代谢物的浓度。结果: 口服不同药物后咪达唑仑的主要药动学参数为:AUC_(0-t) (mg·L^-1·h)分别为:(1.08±0.29) (阴性对照)、(1.58±0.58) (SchA 8 mg/kg)、(2.02±1.29)(SchA 16 mg/kg)、(2.22±1.25) (SchA 32 mg/kg)、(3.34±2.25)(酮康唑 75 mg/kg);C_max (mg/L)分别为:(1.6±0.6) (阴性对照)、(1.8±0.8) (SchA 8 mg/kg)、(2.2±1.2 )(SchA 16 mg/kg)、(2.2±0.7) (SchA 32 mg/kg)、(2.9±1.1) (酮康唑 75 mg/kg)。1′-羟基咪达唑仑的主要药动学参数如下: AUC_(0-t) (mg·L^-1·h)分别为:(0.61±0.17)(阴性对照)、(0.40±0.15) (SchA 8 mg/kg)、(0.39±0.20)(SchA 16 mg/kg)、(0.40±0.14) (SchA 32 mg/kg)、(0.35±0.09 )(酮康唑 75mg/kg);C_max (mg/L)分别为:(0.54±0.13) (阴性对照)、(0.42±0.15)(SchA 8 mg/kg)、(0.39±0.16)(SchA 16 mg/kg)、(0.36±0.16)(SchA 32 mg/kg)、(0.35±0.12) (酮康唑 75 mg/kg)。结论: 结果表明,五味子甲素可以显著抑制咪达唑仑的代谢。     

盐酸小檗碱及其与环孢素A合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响

目的 阐明盐酸小檗碱(berberine chloride, Ber)及其与环孢素A (cyclosporin, CsA) 合用对大鼠肝脏和小肠CYP3A1的影响。 方法 实验分7组:溶媒对照组、150mg·kg^-1酮康唑组、100 mg·kg-1 Ber组、200mg·kg-1Ber组、45 mg·kg^-1CsA组、100mg·kg^-1 Ber +45mg·kg^-1CsA 组、200 mg·kg^-1 Ber +45 mg·kg^-1 CsA 组, 采用RT-PCR 和Western blot 等方法测定大鼠肝脏和小肠CYP3A1 的表达水平。 结果 RT-PCR 结果显示:灌胃给药12 d 后, 除了100 mg·kg^-1Ber 组外, 其余各用药组对大鼠肝脏CYP3A1 基因表达均有明显的抑制作用。Western blot 结果显示:给药6 d 后,200 mg·kg^-1Ber +45 mg·kg^-1CsA 组对大鼠肝脏CYP3A1 的表达有明显抑制作用;给药12 d 后,100 mg·kg^-1Ber +45 mg·kg^-1CsA, 200 mg·kg^-1Ber +45 mg·kg^-1CsA 组对大鼠肝脏和小肠CYP3A1 的表达均有明显抑制作用。 结论 通过增强CsA 对肝脏和小肠CYP3A1 基因表达的抑制作用, 从而减少CsA在肝脏和小肠的代谢及消除, 可能是Ber 增加CsA血浓度的重要机制。     

肾移植受者硫嘌呤甲基转移酶基因多态性与硫唑嘌呤不良反应关系的研究

目的:探讨硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine Smethyltransferase,TPMT ) 表型和基因多态性与硫唑嘌呤(AZA) 所致不良反应的关系。方法:应用高效液相色谱法(HPLC) 测定150 例肾移植患者红细胞TPMT 活性, 采用等位基因特异性的PCR 和限制性片断长度多态性的方法检测TPMT *2、*3A、*3B 和*3C 四种基因型, 分析TPMT 活性和基因多态性与AZA 所致不良反应的关系。结果:30 例(20%) 患者由于发生了不良反应而停用AZA 或减少了AZA 的用量, 其中12 例患者发生了血液毒性, 另外18 例发生了肝脏毒性。将未发生不良反应的患者作为对照组, 其红细胞TPMT 活性范围为16.63～68.25 U, 平均为(38.43±11.59) U 。发生了血液毒性的患者红细胞TPMT 活性平均为(24.16±9.84) U, 明显低于未发生不良反应的患者(P=0.0003) 。另外18 例发生了肝脏毒性的患者TPMT 活性离散度较大, 与对照组比较差异无统计学意义(P=0.145) 。本研究未发现TPMT 活性缺乏者。共发现7 例(4.7%)TPMT *3C 杂合子患者, 这7 例患者均为TPMT 中等活性13.04～19.21 U, 平均为(16.75±2.09) U, 明显低于其他野生型患者(P<0.0001) 。在这7 例患者中有4 例发生了不良反应, 2 例发生了血液毒性, 另外2 例发生了肝脏毒性。结论:TPMT *3C 杂合子个体TPMT 活性下降,AZA 所致的血液毒性与TPMT 活性水平有关, 在治疗之初对患者进行TPMT 活性检测和基因分型, 可减轻或避免该药产生的严重血液毒性。     

肾移植患者HGPRT活性及多态性与硫唑嘌呤所致不良反应的相关性研究

目的: 本研究旨在探索次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)活性及基因多态性与硫唑嘌呤(AZA)所致不良反应的相关性,为临床合理使用AZA提供理论依据。方法: 用本实验室建立的HPLC法测定入选样本的HGPRT活性,直接测序法测定HGPRT IVS6-12C>A的基因型,结合受试者不良反应发生情况,分析HGPRT活性及多态性与AZA所致不良反应的相关性。结果: 86例肾移植受者HGPRT活性范围为(44.59~262.16)U,平均为(100.17±33.50)U,健康受试者HGPRT活性范围为(28.43~153.65) U,平均为(99.30±17.21)U,均呈正态分布。两组HGPRT活性均值差异无统计学意义(P>0.05)。304例肾移植患者中发现2例HGPRT IVS6-12C>A突变体,突变频率为 2.30%。而健康受试者中未发现突变,分析发现HGPRT活性与基因型之间无明显相关性(P>0.05)。流行性感冒样症状组患者的平均HGPRT活性明显高于肾移植对照组[(147.47±101.24) U vs (100.46±29.31) U,P<0.05)],而血液毒性组、肝脏毒性组、胃肠道反应组与肾移植对照组比较,活性差异无统计学意义。AZA所致不良反应与HGPRT基因多态性之间没有明显相关性(P>0.05)。结论: 在服用AZA之前,测定患者HGPRT活性,筛选出HGPRT高活性者,减少AZA的初始剂量,有利于减少AZA所致流行性感冒样症状不良反应的发生率。     

胃癌体外化疗药物敏感性及临床疗效研究

目的: 研究胃癌体外化疗药物敏感性与临床疗效的关系, 为临床肿瘤化疗个体化提供依据。方法: 用改进的MTT 法测定 98 例胃癌组织的化疗药物敏感性, 并依药敏结果选择化疗方案, 观察临床近期疗效和远期生存率。 结果: 98 例胃癌组织对 8 种化疗药物的敏感顺序为顺铂、丝裂霉素、阿霉素、鬼臼乙甙、5-氟脲嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、氨甲喋呤, 与临床实践证明的对胃癌有效的单药基本一致。 体外敏感性与临床近期疗效的总符合率为 81.8%(18/22), 药敏试验组的 3 年生存率及 Ⅱ、Ⅲ期胃癌患者的5 年生存率分别为 62.5%、52.8 %, 明显高于按经验给药组(P<0.05)。 结论: 按体外药敏试验结果指导化疗可提高胃癌患者尤其是中晚期患者的远期存活率。     

肾移植受者口服环孢素A 药代动力学的性别差异

目的: 研究性别差异对肾移植受者口服环孢素A(CsA) 的药代动力学影响。方法: 选择肾移植术后2 wk 肝肾功能稳定的患者41 名, 男21 名, 女20名。口服环孢素剂量6 mg·kg^-1·d^-1, 用FPIA 方法检测各时间点CsA 全血浓度并用3p87 药动学程序拟合CsA 药动学参数。结果: 男性和女性口服CsA的主要药动学参数分别为:t_max (h):2.9±1.0 和2.2±0.9, C_max (mg·L^-1):1.0±0.4 和0.9±0.5, C_min(mg·L^-1):0.20±0.09 和0.17±0.11, T1 2(a) (h):0.8±0.6 和0.7±0.5, T1 2(e) (h):3.0±1.2 和2.8±0.8,AUC0-12 (mg·L^-1·h^-1):5.5±1.4 和4.5±1.7,CL F(L·h^-1):40±25 和47±35, V F(C) (L):159±108 和172±92 。结论: 肾移植患者口服CsA 的AUC0-12和t_max 具有性别差异。     

ABCC2基因多态性与肾移植受者环孢素所致肝功能异常的相关性研究

目的: 研究肾移植术后患者多药耐药相关蛋白(MRP2/ABCC2)基因多态性对环孢素(CsA)肝功能异常的影响。方法: 入选的339例肾移植受者均采用CsA治疗,检测患者rs717620(A/G)和rs2273697(G/A)多态性的基因型。此外,采用荧光偏振免疫法检测患者的CsA血药浓度,根据肾移植患者发生肝脏损伤的情况分为3组。结果: rs717620和rs2273697突变等位基因发生频率分别为 38.89%和 10.72%。ABCC2基因rs717620位点的G突变等位基因与CsA肝功能异常的发生密切相关,与对照组比较,CsA肝功异常组的GG基因型发生频率明显升高(P<0.05),AA基因型发生频率明显降低(P<0.05)。ABCC2基因rs2273697多态性与CsA肝功异常的发生无明显相关。基因型分析结果显示,这两个多态性对CsA谷浓度均无明显相关性,但rs2273697多态性对ALT和AST检测值有明显影响。对于ABCC2基因rs717620而言,GG基因型纯合子携带者的发病风险比AA型纯合子携带者高6倍(OR=6.960, 95%CI:1.636～29.610, P<0.01)。单倍体分析结果显示,与AA-AA基因型个体相比,GG-GG和GG-GA基因型个体移植术后发生CsA肝功异常的风险分别增加 5.909 倍和 13.333 倍。结论: ABCC2基因rs717620位点多态性与CsA肝功异常有明显相关性。ABCC2基因单倍体各基因型中,GG-GG和GG-GA单倍体基因型是肾移植术后发生CsA肝功异常的危险基因因素。