穿透角膜移植术后房水前列腺素E2及蛋白质量浓度的动态变化

目的　通过对穿透角膜移植术后房水前列腺素E2 (PGE2 )和蛋白质量浓度的测定 ,探讨PGE2 对炎症反应和免疫反应的作用。方法　 42只健康新西兰白兔 ,按穿透角膜移植术的类型和处理方法不同 ,随机分为 6组 ,分别于术后第 10、2 0、3 0、40d抽取各组动物的房水 ,用放射免疫法检测PGE2 质量浓度 ,用紫外分光光度计法测定蛋白质量浓度。结果　自体移植组术后 10d房水PGE2 质量浓度高于对照组 ;同种异体移植组术后 10、2 0d房水PGE2 质量浓度高于对照组 ,1只兔眼于术后 2 0d出现排斥反应 ;异种移植组术后 10、2 0、3 0d房水PGE2 质量浓度均高于对照组 ,有 6只兔眼于观察期内出现明显排斥反应 ;异种移植双氯芬酸钠和地塞米松 (DFNa Dex)治疗组术后 10d房水PGE2 质量浓度低于异种移植Dex治疗组(P <0 0 5 )。房水蛋白质量浓度的变化情况与PGE2 相一致。结论　PGE2 与穿透角膜移植术后的炎症反应和免疫排斥反应密切相关。Dex可抑制异种穿透角膜移植术后的排斥反应。DFNa对Dex有协同作用 ,可减少Dex的用量。     

rhTGF-β1及转染TGF-β1基因对兔角膜内皮细胞增殖的影响

目的： 探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β₁(rhTGF-β₁)及TGF-β₁基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞增殖的影响。方法: 用MTT法检测不同浓度rhTGF-β₁作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法，将TGF-β₁基因转移入培养的兔角膜内皮细胞，HE染色法观察细胞组织形态学变化；ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β₁表达量；流式细胞仪检测细胞生长周期变化；DNA电泳法检测转染细胞凋亡情况。结果: MTT检测示5-20 μg/L rhTGF-β1抑制角膜内皮细胞增殖；0.5-1 μg/L组对增殖无影响；0.05~0.1 μg/L组促进细胞增殖。TGF-β₁基因转染细胞形态无明显异常，细胞培养上清中TGF-β₁的浓度约为(98±3)ng/L。流式细胞仪检测示，基因转染组S期和G₂/M期细胞比例减少、PI值降低，但加入EGF后细胞生长基本正常。DNA电泳检测示基因转染组未见凋亡带。结论: rhTGF-β₁对角膜内皮细胞增殖的影响具有剂量依赖性；TGF-β₁基因转染影响角膜内皮细胞增殖、但不诱发凋亡，其抑制作用可被外源性EGF拮抗。     

角膜内皮细胞稳定表达转化生长因子-β1对小鼠脾脏淋巴细胞细胞因子表达的调控

目的探讨转化生长因子-β1(tromsforming growth factor-β1,TGF-β1)基因转染角膜内皮细胞后表达产物对小鼠脾脏淋巴细胞细胞因子表达的调控作用。方法利用脂质体介导法将TGF-β1基因转染入培养的兔角膜内皮细胞中,并用药物筛选抗性细胞克隆。用免疫组化法检测外源基因的稳定表达。ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β1表达量,用RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6mRNA的表达。结果免疫组化染色显示基因转染后筛选出的克隆细胞TGF-β1蛋白表达均为阳性,胞浆呈棕色着色。转染细胞培养上清中TGF-β1的表达量为(597±7)pg/ml,高于对照组。基因转染组淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-αmRNA的表达量明显低于正常对照组(P<0.05);IL-4、IL-6mRNA的表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。结论TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后高表达TGF-β1,致使淋巴细胞发生免疫偏离,作为组织工程角膜种子细胞移植后具有抑制角膜移植免疫排斥反应的潜在可能性。     

自动角膜板层刀切割一个供体角膜用于两位患者

目的评估应用自动角膜板层刀切割一个供体角膜用于深板层角膜移植和角膜内皮移植的临床疗效及安全性。方法回顾性系列病例研究。应用自动角膜板层刀预先将新鲜供体角膜进行切割,将带部分基质的角膜内皮植片用于角膜内皮移植术,剩余前板层用于深板层角膜移植术。回顾性分析2010年3—8月期间在温州医学院附属眼视光医院行角膜内皮移植术的17例患者及分别来自同一供体角膜的行深板层角膜移植的17例患者。术后随访19～24个月,分别观察角膜内皮贴附情况及前板层角膜植片愈合情况。随访资料包括医学验光、前节光学相干断层扫描及角膜内皮细胞计数。手术前后视力比较采用配对t检验。结果17例角膜内皮移植患者术后角膜内皮植片均贴附良好,术后视力较术前均有提高。除1例碱烧伤患者因晶状体混浊,无法验光外,其余术后平均散光为（1．69±0．60）D。17例角膜内皮移植患者平均角膜内皮细胞计数为（2128±244）个／mm^2,平均角膜内皮植片厚度为（152±46）μm。17例前板层角膜移植患者角膜植片均透明,术后最佳矫正视力较术前提高,平均散光为（2．50±0．90）D;平均前板层角膜植片厚度为（343±39）μm。结论利用角膜板层刀将一个供体角膜用于两位患者的方法在临床实际应用中切实可行。经长期随访,角膜植片未出现明显并发症。该方法可以更充分地利用供体角膜,缓解中国供体角膜匮乏现状,意义重大。     

低渗水肿钝性分离法在深板层角膜移植中的应用（附视频）

目的评价应用低渗水肿钝性分离法的深板层角膜移植术治疗部分角膜疾病的临床疗效。方法回顾性分析2007年11月-2010年5月期『日J在温州医学院附属眼视光医院接受深板层角膜移植术患者109例（109眼）临床资料。所有患者在移植术中均采用无菌注射用水和钝性器械辅助分离的方法,移植供体为甘油冷冻保存的角膜移植片。术后随访6个月～1年,观察角膜移植片愈合情况、末次随访最佳矫正视力,分析术中植床穿孔率、术后双前房现象、移植片排斥反应率、原发病复发、高眼压及青光眼等并发症情况。结果所有患者术后最佳矫正视力均较术前有所提高,达到或超过0．4者89眼,0．1～0．3者16眼,低于0．1者4眼。有4眼发生后弹力层微小穿孑L（3．67％）,术后双前房现象在1～2周内消退。角膜上皮延迟愈合2眼,原发病复发4眼（单纯疱疹病毒性角膜炎2眼、细菌性角膜炎1眼、真菌性角膜炎1眼）,一过性高眼压1眼,经治疗均得到良好控制。无内皮型排斥反应、继发性青光眼和自内障发生。结论低渗水肿钝性分离法在深板层角膜移植中对治疗凶角膜基质混浊而致盲的角膜疾病疗效确切,手术难度降低,并发症减少,故而更易推广。     

视力储备与阅读需求能力的研究

Wittaker等于2 0世纪90年代提出了视力储备(acuityreserve ,RA)的概念,定义为需要阅读字体的大小与视敏度阈值的几何差异。其表达式为RA =Sp/St,Sp( printsize)为受试者需要阅读字体的大小,St(thresholdsize)为以字体大小表示的视敏度阈值。RA与字体大小成正比,与阅读距离成反比。RA能将阅读物的物理属性和视觉因素有机地结合起来,对阅读行为有良好的相关关系和预测性。本研究探讨RA与阅读速度的关系,以提出一种有效分析阅读需求能力的方法。1　资料与方法1.1　对象　3 7例在校大学生,均无眼部系统性疾病,裸眼或矫正视力≥1 0 ,屈光不…     

角膜内皮细胞高表达TGF-β1的免疫学作用

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、CD25 、CD69 、CD71 亚群分化的影响。结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达。瞬时转染48h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组。在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25 、CD69 、CD71 阳性细胞比率下降。结论基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡。     

医学生临床技能培训模式改革的探索与实践——以白内障手术虚拟与现实融合带教模式为例

医学生临床技能教学模式的探索改革是目前医学教育改革的重要内容之一,近年虚拟教学的推广,也为临床技能教学增添了新的方式。那么,如何与现实教学方式融合更好地提高医学生实践能力具有积极的意义。有效的医学生临床技能培训模式的构建必须遵循高效性;以学生为主体,注重临床思维能力培养;并充分保障实践对象安全等原则。     

结膜乳头磨削术治疗重度春季角结膜炎的临床研究

目的:观察并评估结膜乳头磨削术治疗重度春季角结膜炎巨大结膜乳头的安全性和有效性。方法:前瞻性、对照性临床病例研究。比较结膜乳头磨削术(8例12眼)与结膜乳头切除术(9例12眼)两种方法治疗巨大结膜乳头,手术前后的眼痒、流泪、畏光、异物感等症状和结膜乳头、角膜上皮等体征的变化情况。结果:两组病例术后1,2,4wk不适症状、体征明显改善,与术前相比统计学差异有显著性意义(P<0.01)。但术后1,2,4wk巨大结膜乳头体征、术后2wk角膜损伤修复情况等评分,磨削治疗组治疗效果优于手术切除组(P<0.05)。结论:结膜乳头磨削术能使粗糙的结膜创面快速变平,减轻不适症状,促进角结膜上皮修复,是治疗重度春季角结膜炎巨大结膜乳头的简单、安全、有效的治疗方式。