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人巨细胞病毒UL136基因在临床低传代分离株中多态性分析 总被引:3,自引:1,他引:3
目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)UL136基因在临床低传代分离株中的多态性,探讨其多态性与HCMV先天性感染不同致病性之间的关系。方法 对48株经荧光定量PCR方法检测HCMV DNA为阳性的临床低传代分离株进行HCMV ULl36全序列PCR扩增,对于扩增阳性的12株PCR产物进行ULl36基因全序列测定及结果分析。结果 48株临床低传代分离株ULl36 PCR扩增,12株阳性,阳性率25%,以HCMV Toledo株作为参考株,进行序列比较分析表明,12株临床分离株ULl36开放阅读框架(open reading frame,ORF)长度均与Toledo株相同,为723bp,编码241个氨基酸的蛋白。DNA序列变异均为碱基替换,不同临床分离株ULl36基因与Toledo株进行同源性比较,结果在核苷酸水平为97.7%~99.3%,氨基酸水平为96.6%~99.1%。ULl36编码蛋白的氨基酸变异率为0.83%~3.3%。二级结构预测分为两种构象。大多数HCMV ULl36蛋白翻译后修饰位点在所有分离株中均高度保守,仅几个位点在一些分离株中存在缺失或新增。Toledo株及12株临床分离株核苷酸及氨基酸序列系统进化树分析表明:45J最接近Toledo株。结论 12株临床低传代分离株HCMV ULl36基因DNA及其编码产物的氨基酸序列比较保守,但仍存在一定多态性。未发现不同临床分离株ULl36基因多态性与HCMV先天性感染的表现关系。 相似文献
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目的 研究人巨细胞病毒HCMV UL14 0基因在临床低传代分离株中的多态性及其与致病性的关系。方法 对 4 0株HCMV临床低传代分离株进行UL14 0基因全序列的PCR扩增 ,对 12株进行了测序及结果分析。结果 4 0株HCMV UL14 0基因PCR扩增均阳性。测序的 12株HCMV UL14 0开放阅读框架 (ORF)均在Toledo株UL14 0 ORF的第 174位核苷酸处 ,插入一个胞嘧啶核苷酸C ,造成移码突变。与Toledo株相比 ,临床分离株新增了ScAMP磷酸化SPS和酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化CKP两种重要功能位点 ,且其所位于的氨基酸位点可能是UL14 0蛋白的蛋白质作用位点。结论 临床分离株UL14 0基因的ORF较Toledo株多出 2 31个核苷酸 ,故两者的核苷酸及其编码产物氨基酸序列明显不同。临床分离株存在SPS及CKP两种新的重要功能位点 ,可能在HCMV UL14 0编码蛋白的生物学功能方面起重要作用。 相似文献
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巨细胞病毒即刻早期基因mRNA检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
目的建立快速简便的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期(IE)基因mRNA。方法设计合成跨越HCMVIE基因内含子区的一对引物,分别用RTPCR和PCR技术扩增HCMVmRNA和DNA,用Southern杂交鉴定阳性产物。结果HCMVIE基因mRNA表达在感染后6小时即可出现,并持续到感染后至少96小时,RTPCR检测的最低敏感性为100fg总RNA,其他病毒和细胞RNA不能被扩增。结论RTPCR技术检测HCMVmRNA敏感、特异,有望应用于临床作为HCMV活动性感染的早期诊断方法 相似文献
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我院妇科门诊2001年1月至2001年8月用妇科净(复方碘络酮)1%~2%水溶液外阴、阴道冲洗后置妇科净栓1枚(200mg)于阴道深部,治疗非特异性(细菌性)外阴、阴道炎,取得了较好的临床效果,现报告如下。 相似文献
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目的 研究US28基因在儿童人巨细胞病毒临床分离株中的多态性,探讨多态性与致病性间的关系。方法 对临床分离株进行PCR扩增和HMA—SSCP分析,选取有代表性的毒株进行克隆和测序,对测序结果进行序列分析。结果 测序结果可见US28核酸变异比较普遍,变异集中在序列的两端,大部分变异是同义突变,US28的重要功能基团高度保守;氨基酸变异使临床株的US28编码蛋白的二级结构呈现出3种新构象;未发现US28基因多态性与临床致病性的联系;GenBank序列与临床分离株序列的氨基酸高突变位点不尽相同。结论 US28基因变异在临床分离株中普遍存在,临床株序列与GenBank序列在氨基酸的高突变位点上存在差异;实验室标准株VHL/E株比AD169株和TOWNE株更接近临床株。 相似文献
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1 资料与方法选ASAⅠ~Ⅱ级硬膜外阻滞效果满意的腹部及骨科手术病人 10 0例 ,其中男 5 8例 ,女 42例 ,年龄 42 0± 18 2岁 ,术后保留硬膜外导管。病人随机分成两组 ,Ⅰ组 (5 0例 ) :曲马多6 0 0mg +布比卡因 75mg +氟哌利多 10mg ,经 0 9%生理盐水稀释至 10 0ml,注入镇痛泵 ;Ⅱ组 (5 0例 ) :芬太尼 0 3mg +布比卡因 75mg+氟哌利多 10mg ,经 0 9%生理盐水稀释至 10 0ml,注入镇痛泵。镇痛泵采用 (Graseby - 930 0便携式PCA泵 ,负荷剂量 5ml,持续量为 0 5ml/hr,每次按压剂量 1ml,镇痛时间为10mi… 相似文献