孕激素通过HOXA9对人卵巢癌细胞增殖和迁移的机制研究

  目的  探讨HOXA9在孕激素抑制卵巢癌发展过程中的作用机制。   方法  （1）按照孕激素醋酸甲羟孕酮（MPA）药物浓度梯度（0.1、1、10、50、100 μmol/L）培养人卵巢癌细胞HO-8910,作用24 h、 48 h 、72 h后,光学显微镜观察细胞形态; CCK-8检测细胞存活率,确定IC₅₀; Annexin V-FITC双染法检测细胞凋亡率。（2）将细胞分为H0-8910细胞4组:（1）NC组;（2）孕激素组;（3）孕激素+si-HOXA9组;（4）孕激素+ov-HOXA9组。H0-8910细胞分别转染HOXA9敲降或过表达质粒后使用MPA处理或不转染质粒单独使用使用MPA处理72 h,qPCR 和Western blot 分别用于检测HOXA9 mRNA和蛋白表达水平以及上皮间质转化（EMT）相关蛋白 （Vimentin,N-cadherin,E-cadherin）的表达变化;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell 实验用于检测细胞侵袭能力。   结果  （1）孕激素刺激后,HO-8910细胞株生长状态变差,排列稀疏,细胞增殖,迁移以及侵袭能力受到抑制（P < 0.0001）,且细胞凋亡率上升（P < 0.0001）;（2）通过cck8结果计算得MPA处理H0-8910细胞72 h的IC50值为2.680 μmol/L;（3）相较于人卵巢上皮细胞CP-H055,HOXA9在人卵巢癌细胞株HO-8910,SKOV3,A2780和OVCAR3中mRNA均高表达（P < 0.01）,HOXA9蛋白在HO-8910中同样高表达（P < 0.001）;（4）孕激素可抑制HOXA9的表达（P < 0.0001）,敲降HOXA9 后,孕激素对HO-8910侵袭和迁移能力的抑制更为明显（P < 0.0001）,而过表达HOXA9后,孕激素对HO-8910侵袭和迁移能力的抑制稍有减弱（P < 0.0001）;（5）孕激素使E-cadherin蛋白表达上升（P < 0.01）,而Vimentin,N-cadherin蛋白表达下降（P < 0.001）;敲降HOXA9 后,孕激素对HO-891中EMT相关蛋白表达影响更为明显（P < 0.05）,而过表达HOXA9后,孕激素对HO-891中EMT相关蛋白表达影响减弱（P < 0.05）。  结论  孕激素通过抑制HOXA9基因的表达,抑制细胞增殖,迁移,侵袭以及EMT进程等恶性生物学表型,从而抑制卵巢癌发展进程。     

超声引导精准麻醉对促进四肢烧伤手术ERAS的有效性和安全性研究

目的 评估超声引导神经阻滞在四肢烧伤手术中的有效性和安全性.方法 选取2018年1月至2019年6月于我院接受四肢烧伤手术的患者,应用随机数字表法,将患者分为传统麻醉组(对照组)和超声引导神经阻滞组(实验组),每组30例.对照组:患者选用全凭静脉麻醉;实验组:根据患者手术部位选择超声引导神经阻滞麻醉.观察比较两组患者围...     

大鼠脊髓全横断后相关部位的BDNF表达

目的 探讨大鼠脊髓全横断损伤后相关部位（大脑皮质、横断脊髓上端、下端和比目鱼肌）脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达变化．方法 首先建立正常对照组和实验组模型，其中实验组又依照大鼠全横断脊髓损伤术后1、3、7、14d不同观察时间点分为4个亚组，分别抽提横断脊髓上端及其相连的大脑皮质、横断脊髓下端和比目鱼肌组织中总RNA，用RT-PCR技术检测BDNFmRNA的表达，以β-actin为参照确定各时相BDNFmRNA的相对水平．结果（1）大鼠脊髓全横断损伤后，BDNFmRNA在大脑皮质、脊髓横断上、下端和肌肉中均有表达，且在正常对照组中大脑皮质的BDNFmRNA表达少于脊髓横断上、下端（P〈0．05）；（2）手术后14d时肌肉组织中BDNFmRNA的表达较手术后1d和3d组均有明显增加（P〈0．05）。说明大鼠脊髓全横断损伤14d时，脊髓下端相连的骨骼肌组织中的BDNFmRNA表达上调．结论BDNF在骨骼肌表达增加，提示BDNF可能参与维持骨骼肌的功能，或者转运入脊髓下端对下位运动神经元发挥营养作用．     

烟碱型乙酰胆碱受体异质重构的研究进展

<正>烟碱型乙酰胆碱受体((nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)是胆碱能受体的一大类,主要分布于神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)的终板膜,参与骨骼肌收缩运动的调控,也是肌松剂作用的靶点。目前已知在运动神经元损伤、脓毒症、严重烧伤会发生nAChR异化重构的现象,这种现象导致肌松剂的敏感性发生改变,该变化的机制也逐渐受到重视。本文就上述情况nAChR异化重构近年研究进展     

OPCABG术中两种不同麻醉方法对IMA、H-FABP的影响

体外循环下不停跳冠状动脉旁路移植术(OPCABG)的优势在于心脏在生理跳动的情况下手术,能避免体外循环(CPB)带来的全身反应及心、肺、脑、肾及胃肠的功能不全[1]、还可避免低温停跳液中的高浓度钾离子及心脏停搏对心脏的负面影响,减轻手术打击对心肌的损伤,并能降低缺血再灌注损伤(I/RI),但I/RI是不可避免的,医务工作者在想尽办法来减轻I/RI,有研究认为,麻醉技术或麻醉药物能够作为减轻心肌创伤     

骨松质游离移植修复牙槽突裂术的护理

牙槽突裂的发生是在胚胎发育期由于球状突与上颌突融合障碍所致。多数学者认为牙槽突裂植骨手术应延迟到混合牙裂期(9～ll岁),在尖牙萌出以前较为妥当。骨源多数采用髂骨。因为,髂骨有丰富的松质骨的骨源,其取骨方法也较为简便。     

CD34+细胞联合许旺细胞移植脊髓全横断大鼠:移植细胞的存活分化及后肢运动和痛温觉反应

背景:CD34+细胞和许旺细胞在单独移植情况下均有促进脊髓修复的功能,且各自分泌和表达成纤维细胞生长因子受体及配体.目的:探讨CD34+细胞与许旺细胞联合移植对脊髓全横断损伤大鼠的后肢运动及感觉功能恢复的影响,并观察体内移植后细胞的存活、迁移、分化及表型变化.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-07/2008-09在昆明医学院神经科学研究所完成.材料:SPF级健康雌性SD大鼠60只,随机分为模型对照组、免疫对照组、CD34+细胞组、许旺细胞组、细胞联合组,12只/组.SPF级6～8周龄ICR小鼠2只,用于分离培养骨髓CD34+细胞.SPF级一两天龄ICR新生鼠30只,用于分离培养许旺细胞.方法:各组大鼠均建立脊髓全横断损伤模型.造模后2周,CD34+细胞组、许旺细胞组将体外培养并荧光标记好的对应细胞悬液经多点注射入横断瘢痕及瘢痕上下各一个脊髓节段,共6个注射位点,每点注射5 μL,每只大鼠共移植60万个细胞量;细胞联合组移植方法相同,但CD34+细胞、许旺细胞注射量各60万个.移植后除模型对照组外,余4组均使用免疫抑制剂环孢素腹腔给药.主要观察指标:通过BBB评分判定大鼠后肢运动功能的恢复情况,测定热痛阈值和机械痛阈值的变化,形态学及组织学鉴定移植细胞的存活、迁移、分化、表型变化.结果:移植后12周内CD34+细胞组BBB评分最高(P＜0.05),至移植后24周时细胞联合组BBB评分最高,恢复效果最佳,许旺细胞组次之,CD34+细胞组最差(P＜0.05).与CD34+细胞组比较,移植后12周细胞联合组热痛闽值明显降低(P＜0.05),随移植时间延长,各组机械痛闽值均明显降低(P＜0.05),但热痛阈值没有发现类似规律.CD34+细胞在有许旺细胞参加的情况下存活数量较多,在移植后12周尤为明显.移植后4周荧光细胞集中在针道附近,第12周荧光细胞迁移到瘢痕上下一两个节段,且较集中分布于脊髓灰质,白质中少见.与CD34+细胞组比较,移植后4,8,12周细胞联合组成熟神经元特异性标记物Neu-N阳性率、胶质纤维酸性蛋白阳性率均明显升高(P＜0.05),成熟少突胶质细胞标记物APC阳性率明显下降(P＜0.05);CD34+细胞组、细胞联合组早期少突胶质细胞标记物O4阳性率均明显下降(P＜0.05).移植后4,8,12周,许旺细胞胶质纤维酸性蛋白阳性表达率逐渐增高.结论:CD34+细胞联合许旺细胞移植对脊髓全横断大鼠后肢功能及感觉功能恢复效果优于单纯CD34+细胞移植,并得到了体内实验的证实.     

NeuN与GFAP在正常大鼠、小鼠、猫脊髓内的表达

目的探讨特异识别大鼠的NeuN、GFAP抗体对小鼠、猫脊髓神经元和星形胶质细胞的识别程度。方法选取正常大鼠、小鼠、猫的脊髓,运用免疫组化二步法分别行NeuN与GFAP染色,观察两种抗体在三种动物脊髓中的表达情况。结果NeuN特异识别大鼠、小鼠脊髓神经元,但不识别猫脊髓神经元。GFAP可特异识别大鼠、小鼠脊髓的星形胶质细胞,部分识别猫脊髓的星形胶质细胞。结论特异性识别大鼠的NeuN、GFAP抗体对小鼠、猫脊髓的识别程度存在一定差异。     

电针刺治疗对脊髓全横断损伤大鼠后肢运动功能的影响

目的：探讨电针刺激大鼠双侧后肢足三里和悬钟、伏兔和三阴交两组穴位对脊髓全横断损伤大鼠后肢运动功能的影响。方法：16只SD大鼠行T11脊髓节段全横断术后，随机分为A、B两组，A组单纯喂养，B组同时予以电针刺治疗；分别于建立模型后第1-8周末，用BBB运动功能评分法评价并比较两组大鼠后肢运动功能恢复程度。结果：A、B两组大鼠术后第1-8周BBB运动功能评分逐渐增高，B组在第1周末和第3-7周末的BBB评分均明显高于A组（P〈0．05）。结论：外周电针治疗能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。