47例原发性肛管直肠恶性黑色素瘤临床诊断与治疗

目的探讨原发性肛管直肠恶性黑色素瘤(ARMM)的生物学特性和合理的治疗方法。方法对我院1966-1998年确诊的ARMM患者的临床病理资料及治疗结果进行回顾性分析。结果本组47例患者,其中男22例、女25例,年龄(52±13)岁。全组行Miles手术23例,复发率26.1%;局部切除12例,复发率75%;非手术治疗12例。随访5年且资料完整的39例中,有淋巴结转移者(25例)平均生存期为8.5个月;而无淋巴结转移者(14例)平均生存期为36.5个月。Miles术治疗者中位生存期为21.5个月,局部切除治疗者中位生存期为18.5个月,非手术治疗者中位生存期为5.5个月。结论区域淋巴结转移是影响预后的主要因素,治疗上应重视手术根治及腹股沟淋巴结清扫。     

MUC1/Y基因体外冲击树突状细胞诱导抗瘤免疫反应

目的制备含MUC1/Y cDNA质粒转染的树突状细胞(DC),体外诱导杀伤细胞,研究其治疗消化道肿瘤的效果.方法构建MUC1/Y cDNA真核表达载体pIRES2-EGFP-MUC1/Y、pcDNA3.1-MUC1/Y.以pcDNA3.1-MUC/Y电转染8例HLA-A2(+)消化道肿瘤患者单个核细胞衍生的DC后,与自体T细胞混合培养,诱导CTL(T-pcDAN3.1-MUC1/Y).以SW620细胞[HLA-A2(+)、MUC1/Y(+)]为特异性靶细胞,Raji细胞[HLA-A2(-)、MUC1/Y(-)]和Lovo细胞[HLA-A2(-)、MUC1/Y(+)]为非特异性靶细胞,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定杀伤活性,ELISA法检测基因修饰后DC刺激自体T细胞产生IFN-γ的能力,并以ANNEXIN V-FITC试剂盒检测特异性CTL诱导靶细胞凋亡情况.结果pIRES2-EGFP-MUC1/Y转染效率为8%左右.T-pcDAN3.1-MUC1/Y诱导的杀伤作用显著高于T-pcDNA3.1[pcDNA3.1(+)修饰DC诱导的CTL]和T-IL-2(IL-2刺激外周血单个核细胞产生的CTL),P＜0.05.而且T-pcDNA3.1-MUC1/Y对靶细胞的杀伤和诱导凋亡的能力显著高于对照组.基因修饰后的DC能刺激自体T细胞分泌高水平IFN-γ,与未转染的DC相比具有显著差异(P＜0.05).结论成功构建MUC1/Y全长cDNA真核表达载体.pIRES2-EGFP-MUC1/Y可用于真核细胞转染,通过观察转染效率,易于筛选阳性克隆;经pcDNA3.1-MUC1/Y修饰的DC可有效诱导特异性抗肿瘤免疫应答.     

人肝细胞癌VEGF及受体的表达与临床病理的关系

目的:分析VEGF及其受体flt-1/flk-1蛋白表达与肝细胞癌临床病理的关系.方法:应用ABC免疫组化染色法,检测60例肝细胞癌中VEGF、flk-1、flt-1蛋白表达情况,并分析它们与肝细胞癌临床病理的关系.结果:60例肝细胞癌组织中VEGF、flk-1、flt-1蛋白的阳性表达率分别为81.3%、88.3%、80.0%,均明显高于正常肝组织(P＜0.05);并且VEGF蛋白表达与肿瘤的病理分级、有无包膜、瘤栓、直径大小均有相关性.结论:VEGF蛋白表达水平越高,细胞恶性程度及侵袭、转移能力越强,并且VEGF与flt-1/flk-1在肿瘤形成过程中具有协同作用.     

正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库的构建及差异基因的初步筛选

目的构建人正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.方法采用抑制削减杂交技术,以正常肝组织及有肝癌背景的肝硬化组织作为对比材料.分离出mRNA,经反转录后,通过两轮杂交、两次PCR和T/A克隆构建了两种组织间差异表达基因的cDNA削减文库.结果挑取70个克隆进行酶切和PCR鉴定,显示65个克隆有250～2000 bp插入片段.结论用SSH和T/A克隆技术成功构建了正常肝组织与肝硬化组织差异表达基因的削减cDNA文库.该文库的建立为进一步筛选、鉴定出肝癌发生过程中的相关调控基因奠定了基础,也有助于阐明肝硬化在肝癌发生过程中所起的作用.     

自体造血干细胞移植后的免疫重建研究进展

大剂量放化疗联合造血干细胞移植是治疗恶性血液肿瘤及部分实体瘤的新疗法之一。在世界范围内,每年大约有1万例自体造血干细胞移植用来治疗恶性肿瘤。近年来的各项随机实验证实,大剂量化疗联合自体造血干细胞输注可明显延长血液系统恶性疾病包括复发的非霍奇金淋巴瘤犤1犦,急性髓性白血病犤2犦和多发性骨髓瘤犤3犦患者的无病生存期(DFS)。在实体瘤的治疗上也已取得了较好的效果犤4犦。然而,移植后仍有部分病人出现复发和转移,移植后免疫功能的长期抑制是造成移植后恶性肿瘤复发的重要原因之一,移植后免疫功能的状态及免疫治疗对清除体内残…     

卵巢上皮性癌BRCA1和p53基因表达的临床意义及相互关系研究

目的：探讨BRCA1、p53基因蛋白在卵巢上皮性癌中的表达情况及相互关系。方法：应用S-P免疫组织化学法检测50例卵巢上皮性癌组织中BRCA1和p53蛋白的表达。采用Kaplan—Meier法分析两种蛋白表达情况与患者预后的关系。结果：1)BRCA1蛋白在卵巢癌组织中的阳性表达率仅为30％，明显低于正常卵巢组织(100％)和良性肿瘤组织(90％)(P＜0．01)；BRCA1在低分化癌、有淋巴结转移的卵巢癌组织中表达减少甚至缺失。2)p53蛋白在卵巢癌组织中的表达率为64％，而在正常卵巢及良性肿瘤组织中无表达；其表达仅与病理学分级有关。3)两种基因蛋白表达比较呈显著负相关(P＜0．01)。4)患者生存随访表明，有BRCA1表达的患者平均生存期长于无表达者；而p53对生存时间无影响。结论：BRCA1基因在转录后水平的下调对卵巢上皮性癌的发生发展有重要的作用．同时BRCA1基因与p53基因协同促进肿瘤的演进恶化。     

双向分化肿瘤血管生成拟态分子机制初步观察(英文)

目的研究肿瘤细胞分泌Ⅳ型胶原和 PAS 阳性物质在血管生成拟态(VM)中的作用以及 VM 对肿瘤细胞表达 VEGF 的影响。方法收集双向分化恶性肿瘤石蜡包埋样本158例,制作成组织芯片,进行 CD31和 VEGF 重复染色及Ⅳ型胶原染色。通过网格计数法,比较 CD31与 PAS 阳性图案围成的管道面积差别及分布特点,以及有 VM 的点阵和无 VM 的点阵 VEGF 表达的差别。结果 VM 的基底膜样结构表现为 PAS 及Ⅳ型胶原阳性;无 VM 的双向分化肿瘤 VEGF 表达高于有 VM 者,其中在恶性黑色素瘤及腺泡型横纹肌肉瘤中,二者 VEGF 的表达差异有显著性(P<0.05)。结论 PAS 阳性物质和Ⅳ型胶原参与构建了 VM 的管壁,VEGF 表达的差别表明 VM 的存在可以提供肿瘤细胞氧气和营养物质。     

全胃切除术后不同消化道重建方式对比格犬小肠动力影响的机制研究

目的研究全胃切除术后不同消化道重建术式对犬小肠动力的影响。方法将13只比格犬分为对照组（3只,仅行假手术）,全胃切除后采用功能性间置空肠进行消化道重建（FJI组,7只）和全胃切除后采用Roux-en-Y吻合进行消化道重建（RY组,3只）。手术后48h处死比格犬。处死前1h灌人活性炭,检测小肠转运率。取吻合口上下5cm的小肠,分别应用苏木精一伊红染色、免疫组织化学染色和干涉显微镜观察和检测小肠炎性反应,小肠组织卡哈尔细胞（ICC）分布及上皮凋亡情况。结果对照组和FJI组的小肠转运率分别为0．14±0．03和0．32±0．11,显著低于RY组（0．52±0．21,P〈0．05）。FJI组较RY组的小肠分布更多的ICC;FJI组的小肠浆膜炎性反应（包括出血、纤维渗出、溃疡）、中性粒细胞和巨噬细胞浸润以及小肠上皮细胞凋亡情况均不如RY组明显。结论减少手术创伤、保持小肠连续性的功能性间置空肠吻合消化道重建方式,具有更好的食物储存功能,有利于术后小肠动力的恢复。     

对局部晚期结直肠癌患者行联合脏器切除术的临床价值

目的探讨对局部晚期结直肠癌患者行联合受累脏器整块切除的临床价值。方法回顾分析182例局部晚期结直肠癌患者的临床资料。将97例行联合脏器切除治疗患者的疗效与同期85例未行联合脏器切除治疗者进行对比分析。结果97例患者切除的相关脏器为165个,经病理组织学证实51例(52.6%)的50个相关脏器(30.3%)有癌浸润,另外46例(47.4%)的115个(69.7%)相关脏器为炎性浸润,受累脏器以小肠最为常见,占28.9%(28/97)。经联合脏器切除后,97例患者1、3、5年生存率分别为83.5%、67.1%和49.4%;而同期85例仅行肿瘤局部切除或姑息切除治疗者1、3、5年生存率分别为81.1%,58.8%和10.5%。结论对于局部晚期的结直肠癌患者,积极施行周围联合脏器切除术,是提高5年生存率的一项重要措施。     

蛋白酶体抑制剂在TRAIL诱导恶性淋巴瘤细胞凋亡中的协同作用

目的:探讨合理应用蛋白酶体抑制剂PS-341协同TRAIL有效增加耐药恶性淋巴瘤细胞凋亡的内在机制,为耐药肿瘤的治疗提供新思路。方法:采用流式细胞仪、Western Blot、荧光显色技术观察PS-341与TRAIL协同作用后恶性淋巴瘤细胞CRL的凋亡情况、促凋亡蛋白Bax的表达水平以及Caspase-3的活性变化。结果:TRAIL作用细胞24h凋亡率仅为21.3%,并且出现Bax蛋白表达水平的下降,6h的表达量仅为正常量的5/9;联合使用浓度为10nmol/L PS-341后显著增加细胞的凋亡,24h凋亡指数为50.4%;6h Bax蛋白表达量为正常量的1.2倍,Caspase-3酶活性增加至122.56±1.434μmol/L·h~(-1)·mg~(-1)蛋白。结论:合理使用蛋白酶体抑制剂可通过有效抑制凋亡蛋白Bax降解,逆转恶性淋巴瘤细胞对TRAIL的药物抵抗,为合理用药提供理论依据。