不对称PCR制备单链探针检测登革Ⅱ型病毒复制型RNA和复制中间体RNA

登革病毒是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒 ,病毒的复制过程发生在感染细胞胞浆 ,复制型 (RF)RNA是病毒半保留复制的循环模板 ,复制中间体 (RI)RNA的合成则是病毒复制所必需的。经RT PCR获得的DNA模板进行不对称PCR扩增 ,当限制性引物终浓度为 2 5 0nmol L ,两引物比例为 1 0 0∶1时 ,即得到不对称PCR的预计单链和双链DNA产物。此单链产物用于标记探针进行核酸杂交。结果表明不对称PCR制备单链探针进行核酸杂交可用于检测病毒复制型RNA和复制中间体RNA的合成     

我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia感染的研究

目的：研究我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia的感染情况。方法：采用依据Wolbachia的wsp基因序列建立的PCR分组检测方法，对我国蚊科中库蚊属、伊蚊属和按蚊属中一些蚊虫种类进行了检测。结果：库蚊属中尖音库蚊复组4个亚种的实验室种群和伊蚊属中的白纹伊蚊的4个地理株种群均有感染，感染的Wolbachia株属B组中的pip组；同时在白纹伊蚊种群中还发现了有A组和B组Wolbachia的双重感染；而同时检测的三带喙库蚊，刺扰伊蚊，埃及伊蚊的2个地理株，中华按蚊和斯氏按蚊没有发现Wolbachia的感染。结论：本研究应用该方法，成功地对我国蚊虫体内感染的Wolbachia株进行了检测与分组。     

脱水休眠小卷蛾斯氏线虫的生化特性研究

该文报道了脱水休眠小卷蛾斯氏线虫SteinernemacarpocapsaeBJ的生化特性研究。结果表明当水分失去约24%时,线虫就能进入休眠。相对于未处理线虫,脱水休眠线虫酯酶活性降低,总糖和糖原含量分别减少6.37%和6.77%,海藻糖含量升高1.79%,但粗脂肪和肪脂酸含量保持不变。     

Wolbachia的wsp基因片段在我国尖音库蚊复合组蚊虫中的PCR扩增

应用 Wolbachia的 wsp基因特异引物 ,通过 PCR方法对我国尖音库蚊复合组的 4个亚种的实验室种群以及 6个地理株种群进行了检测。结果都能扩增出 60 0 bp的特异性 DNA片段。表明 Wolbachia在我国尖音库蚊复合组蚊虫中的侵染较为普遍 ,提示其可能与复合组中蚊虫杂交的胞质不融合现象有关     

白纹伊蚊经滞育卵传递登革Ⅱ型病毒的实验研究

目的　证明登革Ⅱ型病毒能否在白纹伊蚊滞育卵内存活并传至子代。方法　采用逆转录 -聚合酶链反应检测病毒 ,C6 36细胞培养分离病毒。结果　能在白纹伊蚊滞育卵内检测到病毒 ,且滞育卵解除滞育后 ,子 1代幼虫和成蚊中均检测到病毒 ,总的批阳性率为 9.6 % ,子代最低感染率为 1∶2 94.3 ;第一个生殖营养周环子代未分离到病毒 ;第二、三生殖营养周环子代间最低感染率差异无显著性 ( χ2 =0 .0 1,P >0 .0 5 )。结论　试验证明登革Ⅱ型病毒能在白纹伊蚊滞育卵内存活并传至子代。     

Wolbachia在我国蚊虫体内感染组织定位的透射电镜观察和PCR检测

通过透射电镜的超微形态观察和分组织的PCR检测发现 ,在我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊体内感染的Wolbachia株不仅局限于生殖组织内。在淡色库蚊 (Cx .pipienspallens)和骚扰库蚊 (Cx .pipiensmolestus)雌蚊卵巢、中肠和胸部肌肉组织中都有B大组Pip组Wolbachia株的感染 ,而头部没有检测到感染。在白纹伊蚊雌蚊卵巢、中肠组织中存在A大组和B大组Pip组的Wolbachia株双重感染 ,胸部肌肉组织中仅发现B大组Pip组Wolbachia株的单独感染 ,头部没有检测到感染     

我国尖音库蚊复合组蚊虫核糖体DNA第2内转录间隔区序列测定与分析

通过对我国尖音库蚊复合组蚊虫及三带喙库蚊核糖体DNA第二内转录间隔区 (rDNA ITS2 )的序列测定 ,表明rDNA ITS2序列在我国尖音库蚊复合组种内亚种间和亚种内的变异存在有重叠现象。分子系统关系分析没有发现与形态学亚种阶元分类地位的一致性 ,但在种间差异明显。