不同剂量外源性白介素17A干预对变应性鼻炎小鼠气道炎症的影响

目的 探讨不同剂量的外源性白细胞介素17A(IL-17A)干预对变应性鼻炎小鼠气道炎症的影响。 方法 将48只小鼠采用随机数字表法分为A、B、C、D、E、F组,每组8只。分别于第0、7、14天将溶于50 μL生理盐水的20 μg卵清蛋白(OVA)加2 mg铝佐剂腹腔注射处理D、E及F组小鼠,间隔7 d,于第22天开始鼻腔激发,每天每侧鼻孔各滴入OVA 10 μL,连续7 d。D、E及F组小鼠于每次OVA鼻腔激发前1 h分别给予生理盐水、IL-17A蛋白100 ng、IL-17A蛋白500 ng滴鼻,A、B及C组小鼠于相同时点予等量生理盐水腹腔注射并滴鼻,B、C组小鼠于每次生理盐水鼻腔激发前1 h分别给予IL-17A蛋白100 ng、IL-17A蛋白500 ng滴鼻。所有小鼠于最后一次激发后评估鼻部症状学变化,Diff-Quik染色观察鼻腔灌洗液(NLF)中嗜酸性粒细胞浸润情况,ELISA法检测血清及NLF中IL-6、IL-10水平,鼻黏膜组织行甲苯胺蓝染色观察肥大细胞数。 结果 4周末D组所有小鼠症状学评分均>5分,造模成功。A、B、C、D、E及F组症状学评分分别为1.5(1.0~2.8)、2.0(1.0~3.0)、2.5(2.0~3.0)、7.0(6.3~8.0)、3.0(2.3~3.8)及8.0(7.0~8.8)分。E组小鼠挠鼻及喷嚏次数少于D组(H=21.375, P=0.033; H=20.250, P=0.049)。D组小鼠血清及NLF中IL-6水平高于A组(H=25.750, P=0.004; H=20.688, P=0.047),IL-10水平低于A组(H=22.875, P=0.016; H=20.625, P=0.048)。E组小鼠血清及NLF中IL-6水平与A组相比差异无统计学意义(H=19.875, P=0.068; H=8.125, P>0.999)。E组小鼠血清中IL-10水平高于D组(H=27.062, P=0.002)。F组小鼠血清及NLF中IL-6水平高于A组(H=22.250, P=0.008; H=28.688, P=0.001)。F组小鼠血清及NLF中IL-10水平与D组相比差异无统计学意义(H=13.062, P=0.930; H=0.500, P>0.999)。C组小鼠NLF中嗜酸性粒细胞数高于A组(H=20.688, P=0.047)。E组小鼠NLF中嗜酸性粒细胞数低于D组(H=21.188, P=0.037)。F组小鼠NLF中嗜酸性粒细胞数与D组相比差异无统计学意义(H=2.875, P>0.999)。D组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数与A组相比增多(H=27.188, P=0.002)。E组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数少于D组(H=20.938, P=0.042)。F组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数与D相比差异无统计学意义(H=1.188, P>0.999)。 结论 500 ng的外源性IL-17A能促使小鼠鼻腔嗜酸性粒细胞募集,100 ng的外源性IL-17A对变应性鼻炎小鼠模型气道炎症有保护作用。     

白介素17单克隆抗体对变应性鼻炎小鼠气道炎症的作用

目的 探讨白介素17单克隆抗体（IL-17mAb）的不同给予剂量及方式在变应性鼻炎小鼠气道炎症中的作用。方法 将48只小鼠采用随机数字表法分为A、 B、 C、 D、 E、 F组,每组8只。分别于第0、 7、 14 d将20 μg卵清蛋白（OVA）加2 mg铝佐剂腹腔注射处理A、C、D、E及F组小鼠,间隔7 d,第22天开始进行鼻腔激发,每天每侧鼻孔各给予OVA 10 μl（共500 μg）滴鼻,连续7 d。A、C、D、E组小鼠于每次OVA鼻腔激发前1 h分别给予生理盐水、100 ng IL-17mAb、500 ng IL-17mAb、5 μg IL-17mAb滴鼻,F组小鼠于每次OVA鼻腔激发前4 h给予5 μg IL-17mAb腹腔注射,B组小鼠于相同时间点给予等量生理盐水腹腔注射及滴鼻。所有小鼠于最后1次激发后评估鼻部症状学变化,Diff-Quik染色观察鼻腔灌洗液（NLF）中嗜酸性粒细胞浸润情况,ELISA方法检测血清及NLF中IL-6、IL-10水平,鼻黏膜组织行甲苯胺蓝染色观察肥大细胞。结果 ４周末A组所有小鼠症状学评分均＞5分,提示造模成功。F组小鼠的挠鼻及喷嚏次数均少于A组（P＜0.05）;F组小鼠NLF中嗜酸性粒细胞数、血清IL-6水平低于A组,血清及NLF中IL-10水平均高于A组（P＜0.05）;E组小鼠血清中IL-10水平高于A组（P＜0.05）;A组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数多于B组,统计学意义显著（P＜0.01）;F组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数少于A组,但差异无统计学意义（P＞0.05）;F组小鼠鼻黏膜组织中肥大细胞数与B组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 高剂量的（5 μg）IL-17mAb腹腔注射处于激发阶段的变应性鼻炎小鼠促使小鼠变应性鼻炎症状明显减轻,鼻腔灌洗液嗜酸性粒细胞减少。促使变应性鼻炎小鼠血清中IL-6表达降低,血清中及鼻腔灌洗液中IL-10表达升高,因此推测这些细胞因子的变化可能抑制Th17/促进Treg的分化,进而对变态反应产生抑制作用。     

高密度脂蛋白改善胶原诱导性关节炎模型小鼠的症状

目的探讨高密度脂蛋白(HDL)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的作用。方法将小鼠随机分为对照组、CIA组、CIA+HDL组。应用Ⅱ型胶原蛋白诱导建立关节炎小鼠模型,尾静脉注射高密度脂蛋白(10 mg/kg),每3 d注射1次,共注射5次。期间记录小鼠体质量变化和关节炎临床评分。第75天处死小鼠,使用ELISA试剂盒测定小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅱ型胶原特异性抗体IgG2α的水平,将小鼠踝关节组织切片用HE染色,分析各组小鼠类风湿性关节炎的严重程度以评价高密度脂蛋白对于类风湿性关节炎的作用。结果与CIA组相比,静脉注射10 mg/kg的HDL可以显著改善小鼠类风湿性关节炎的症状。实验结果显示HDL可以减轻关节炎临床症状,降低血清中促炎因子TNF-α以及特异性抗体IgG2α表达水平(P0.05)。病理组织学检测显示HDL可以使小鼠踝关节关节面变光滑,明显改善滑膜增生、炎性细胞浸润与骨侵蚀等病理变化。结论 HDL对类风湿性关节炎小鼠的症状有显著的改善作用。     

IL-17在鼻息肉形成中的作用机制

目的 检测白介素-17（IL-17）及其受体（IL-17R）在鼻息肉和正常鼻黏膜中的表达及IL-17在鼻息肉患者血清中的表达,观察IL-17 在鼻息肉发病过程中可能的作用机制和意义。方法 鼻息肉组织及血清标本来自青岛大学附属医院耳鼻咽喉科2016年11月~2017年11月行鼻息肉切除术的42例患者,选取10例同期行上颌窦囊肿手术切除的正常中鼻道黏膜组织作为正常鼻粘膜对照,10例健康成年人血清作为正常对照。HE 染色用于常规组织病理学检查,免疫组织化学染色观察IL-17及其受体表达水平及部位,双重免疫组织化学染色观察表达IL-17的细胞,ELISA法检测血清中IL-17蛋白表达水平。结果 ①42例鼻息肉组织中IL-17和IL-17R阳性细胞数较正常鼻黏膜组织中多,差异有统计学意义（P＜0.05）;巨噬细胞表面标志（CD68）在鼻息肉组织中的表达比正常鼻黏膜组织高,差异有统计学意义（P＜0.05）。②IL-17及CD68双重免疫组化染色显示IL-17主要表达于鼻息肉巨噬细胞上,IL-17R主要表达于上皮层基底细胞、腺管基底细胞及血管内皮细胞。③42例鼻息肉患者血清中IL-17蛋白水平和健康成年人比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-17对鼻息肉的形成作用可能是通过影响巨噬细胞的功能及相关细胞因子实现的,IL-17与IL-17受体的相互作用可能参与鼻息肉的病理改变,如上皮细胞基底膜增厚及腺体增生等。