不同条件下骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性研究

目的:探讨并优化大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养的方法,筛选出最佳培养时间,并鉴定其生物学特性,为BMSCs的应用奠定基础。方法:在不同季节,采用贴壁筛选法分离纯化BMSCs,并通过传代培养对其进行扩增。倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长特征,并按时间段绘制细胞生长曲线。流式细胞术检测BMSCs抗原分子CD90及造血干细胞抗原分子CD45的表达;用β-巯基乙醇诱导BMSCs分化。结果:生长曲线分析,冬季培养的BMSCsF3代潜伏期为4d,对数期为5～9d,第10天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象;春、夏、秋三季培养的BMSCsF3代潜伏期为2d,对数增殖期为3～6d,第7天后进入平台期,细胞出现接触抑制现象。流式细胞术检测F0代细胞中,CD90+CD45-细胞为3.5%,F3代细胞中CD90+CD45-细胞达到97%;F3代BMSCs镜下呈梭形、多角形成纤维细胞样形态,大小均一,漩涡状生长。β-巯基乙醇诱导BMSCs5h后表现出明显的神经元样细胞形态。结论:不同培养季节对BMSCs生长曲线影响明显,春夏秋三季细胞生长较快,而冬季细胞生长缓慢,体现了"春生、夏长、秋收、冬藏"的生物规律;贴壁筛选法是理想的体外分离扩增BMSCs的培养体系,所培养的BMSCs纯度高、生物学性状稳定。     

中药对HBsAg抑制作用的观察

我们利用RPHI test对数种复方及单味药进行了实验,结果显示:这些药物对HBsAg表现出不同程度的抑制作用。     

机器人立体定向辅助系统在癫痫外科深部电极植入中的应用价值

目的研究神经外科机器人立体定向辅助系统（robotized stereotactic assistant,ROSA）在癫痫外科中的应用价值。方法自2013年3月至6月,对11例顽固性癫痫患者,经过电一临床症状学、影像学、头皮脑电图等无创手段严谨的术前评估,设计颅内电极埋置方案。在ROSA引导下,定向植入脑深部电极。埋置电极后进行颅内脑电图长程监测,最终手术治疗。结果11例患者平均年龄26．3岁（13～48岁）,平均病史11．9年（1～23年）。共植入72根深部电极,1例患者进行单侧植入,10例系双侧植入。其中包括额叶17根,颞叶52根,岛叶3根。平均每根电极植入时间小于10分钟。术后复查CT,与术前MRI相融合之后分析,可见各电极末端位置与植入术前计划靶点位置基本一致,平均位置误差1．7mm（0．3～3．1mm）。1例患者在电极入路点有少量蛛网膜下腔出血,仅表现轻微头痛。本组患者均无显著的颅内出血等并发症发生。结论ROSA引导植入脑深部电极应用于顽固性癫痫的外科治疗,克服了传统的框架式立体定向仪应用的局限性,更加安全、精准、便捷。     

回生饮注射液对机体免疫的影响

回生饮注射液能使血清凝集素及溶血素的含量显著上升,使外周血中硝基兰四氮唑还原试验(NBT)阳性细胞和酸性非特异性酯酶染色反应(ANAE)阳性细胞百分比明显提高,对二硝基氯苯(DNCB)所激发的迟发型超敏反应的强度有明显减轻作用。表明回生饮不仅是一种良好的免疫增强剂,而且还具有抗过敏作用。     

Effects of cadmium chloride on micronucleus rate and chromosome aberration rate in mouse bone marrow mesenchymal stem cells

背景：氯化镉对骨髓间充质干细胞遗传方面影响的研究暂无报道。 目的：观察化学毒性物质氯化镉对骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响。 方法：贴壁培养小鼠骨髓间充质干细胞细胞株,显微镜下观察空白对照组及氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞的形态学变化,微核实验检测两组微核率,染色体分析检测两组染色体畸变率。 结果与结论：显微镜下观察,空白对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;氯化镉诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多。与空白对照组比较,氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞微核发生率和染色体畸变率均显著增加(P < 0.05)。提示氯化镉可引起小鼠骨髓间充质干细胞遗传物质的损伤。     

氯化镉对小鼠骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响

背景：氯化镉对骨髓间充质干细胞遗传方面影响的研究暂无报道。目的：观察化学毒性物质氯化镉对骨髓间充质干细胞微核率和染色体畸变率的影响。方法：贴壁培养小鼠骨髓间充质干细胞细胞株,显微镜下观察空白对照组及氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞的形态学变化,微核实验检测两组微核率,染色体分析检测两组染色体畸变率。结果与结论：显微镜下观察,空白对照组细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,胞体透亮,折光性强;氯化镉诱导组细胞呈凸起回缩,细胞变小、变圆,贴壁不牢,悬浮细胞增多。与空白对照组比较,氯化镉诱导组骨髓间充质干细胞微核发生率和染色体畸变率均显著增加（P〈0.05）。提示氯化镉可引起小鼠骨髓间充质干细胞遗传物质的损伤。     

中医院校西医学基础课程实验教学改革实践探索

加强中医院校西医基础课程的实验教学改革，以适应社会对高等医学专业人才的需求。在充分调研及论证的基础上，对西医基础课程微生物学、人体寄生虫学、免疫学的实验教学进行了改革与实践，构建了新的实验教学体系，开设了综合性设计性实验项目，并完善了实验考核评价体系，提高了实验教学质量，受到了学生的普遍欢迎。     

外科治疗中央区顽固性癫痫

目的探讨累及中央区顽固性癫痫的外科治疗方法,并分析影响预后结果的相关因素。方法回顾性分析2008～2011年手术治疗的25例累及中央区的顽固性癫痫患者的临床资料。所有病例依情况分别结合颅内电极、皮层电刺激功能区描记、神经导航、术中唤醒和术中电生理监测等手段进行病灶、致痫区和功能区定位。结果3例术后出现短暂的对侧肢体肌力下降,2例术后对侧肢体肌力有回升,活动更灵活。术后随访12—24个月：EngelⅠ级16例,Ⅱ级5例,Ⅲ级1例,Ⅳ级3例。结论对累及中央区的顽固性癫痫患者,应在保障安全的前提下尽可能切除致痫灶和病变。颅内电极记录和术中唤醒等技术可用于颅内致痫灶的定位,在术中电生理监测下充分切除病灶及癫痫样放电区对控制癫痫发作效果良好。     

平喘灵对哮喘大鼠血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷含量及气道炎症细胞Fas表达的影响

目的探讨平喘灵对哮喘大鼠血浆环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）含量及气道黏膜炎症细胞Fas表达的影响。方法用卵蛋白复制大鼠哮喘模型。采用放射免疫法检测各组大鼠血浆cAMP、cGMP含量；用免疫组织化学法检测气道黏膜炎症细胞Fas的表达。结果模型组大鼠较空白对照组大鼠血浆中cAMP含量、cAMP／cGMP比值明显降低，cGMP含量明显升高，气道黏膜炎症细胞Fas表达明显升高（P＜0．05），组织形态学病变明显；经平喘灵治疗后，上述指标均得到改善（P＜0．05）。结论平喘灵治疗支气管哮喘可能与其调节机体cAMP、cGMP含量及气道黏膜炎症细胞Fas表达，稳定cAMP／cGMP比值有关，且平喘灵与激素在治疗哮喘中有协同效应。