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人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切入位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×103左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。 相似文献
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目的 通过检测部分门诊病例血清的戊型肝炎病毒标志物(HEV IgG),简要描述本地区的戊型病毒性肝炎的感染水平.方法 收集河南省人民医院内科门诊病例血清415份,应用万泰公司的戊型病毒性肝炎诊断试剂盒进行ELISA检测,检测结果进行统计学分析,对不同分组进行x2检验.结果 415例门诊病例的HEV阳性率为21.93%,在性别间、年龄分组间,差异有统计学意义,而在城乡间的差别无统计学意义.结论 我市的戊型病毒性肝炎阳性率处于全国HEV感染率的平均水平,成人的HEV阳性率显著性高于青少年.在低年龄阶段进行有效的疫苗接种,可以控制戊型病毒性肝炎在我省的流行. 相似文献
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丁型肝炎病毒抗原的原核表达及抗原性分析 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 利用含T7启动子和His纯化标签pRSET B质粒构建丁型肝炎病毒抗原(HDAg)重组表达质粒(pRSETB-HDAg),转化宿主菌,表达并纯化,获得生物活性高抗原性强的基因工程重组抗原.方法 将中国河南株HDAg基因片段插入pRSET B表达质粒,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导表达.表达产物经Chelating亲和层析纯化后,采用EIA方法分析HDAg的抗原性.结果 重组HDAg稀释1000倍(10 ng/ml)仍与抗体有较强的反应.经与美国HDAg和华美公司生产的HDV诊断试剂同时检测26份HDV阳性参比血清,三者结果比较,除美国抗原漏检1份,检出率为96.15%(25/26份)外,病毒CDC和华美试剂均无漏检,检出率为100%,三者检测结果具有很高的符合率.结论 成功构建了丁型肝炎病毒抗原重组表达质粒(pRSETB-HDAg),在原核细胞获得稳定高效表达,EIA 检测证明HDAg抗原性好,可用于组装HDV诊断试剂,用于临床丁型肝炎患者的诊断和我国丁型肝炎病毒感染流行病学的调查. 相似文献
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目的 了解我国不同民族的健康人群戊型肝炎病毒感染情况.方法 采用ELISA方法检测人群血清中戊型肝炎病毒(戊肝,HEV)IgG抗体.汉族人群血清分别来自于四川、北京、黑龙江和山东,回族和藏族人群血清来自于甘肃、宁夏和青海,总共10 448份血清采集于2006 -2008年.结果 七省市人群HEV抗体总阳性率为17.97%(1878/10 448).汉、回和藏不同民族人群HEV抗体阳性率分别为24.32% (1794/7376)、3.59%(81/2258)和0.37%(3/814).不同地区人群HEV抗体阳性率分布,四川、北京、黑龙江和山东汉族人群阳性率分别为27.45%、20.30%、22.89%和22.68%,甘肃汉和回族分别为24.63%( 184/747)和6.12%( 77/1258),宁夏回族和青海藏族分别0.40%和0.37%.汉回藏不同民族各年龄组人群HEV感染分布,汉族各年龄组人群HEV抗体阳性率,在≤10岁年龄组为5.19%,11~20岁组为11.64%,21 ~ 30岁组为20.08%,31 ~ 40岁组为34.17%,41 ~50岁为41.75%,51 ~60岁组为48.58%,≥61岁组为57.43%.回族人群各年龄组人群HEV抗体阳性率依次为3.11%,3.96%,2.11%,3.98%,2.52%,4.57%和6.67%.藏族人群3份阳性者分布在21~30岁组、31 ~40岁组和51 ~60岁组各1份,阳性率为0.63%、0.58%和1.01%.结论 汉族人群戊肝病毒感染明显高于回族和藏族,感染率随年龄增长而升高.回藏族人群HEV抗体阳性率低下,应加强对HEV感染的监测. 相似文献
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目的 了解北京地区戊型肝炎(戊肝)病毒感染现状.方法 采用EIA诊断试剂检测人群、猪和鸡血清中戊肝病毒(HEV)抗体.结果 1208份人群血清中有260份HEV-IgG抗体阳性,总阳性率为21.52%,对260份HEV IgG阳性血进行IgM抗体检测,有22份阳性,占8.46%.32份猪血清中有15份阳性,阳性率为46.88%,34份鸡血清HEV抗体全部为阴性.人群不同年龄组HEV抗体阳性率依次为11~20岁为5.60%(14/250),21~30岁为20%(42/210),31~40岁为24.03%(62/258),41~50岁为26.44%(78/295),51~60岁为32.82%(64/195),男女不同性别HEV感染率比较,男性阳性率为29.51%(144/488),女性为21.70%(102/470).结论 北京地区人群和与人接触密切的家畜猪均存在戊肝病毒感染,人群戊肝病毒感染率随年龄增长而升高,尤其是男性戊肝病毒感染率明显高于女性,郊区流动人群戊肝病毒感染率明显高于市内人群,家畜猪感染率是人群的2倍以上. 相似文献
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四种乙肝病毒表面抗原ELISA诊断试剂的评价 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 对四种国内乙肝病毒表面抗原诊断试剂进行评价。方法 用四种试剂分别对标准品和未知血清进行检测,用几种常用诊断试验评价方法对检测结果进行分析和比较。结果 四种试剂对标准血清的检测结果较好,A、B两种试剂的总符合率为100%,另两种的总符合率也在90%以上,其中B试剂有较好的精密性。δ值比较显示A和B两种试剂有较好的诊断特性。四种试剂在一定的抗原浓度范围内都有良好的线性关系。针对于未知样本的检测中,四种试剂与采用电发光法的罗氏诊断试剂有较好的一致性。结论 国内主要厂家的HBsAg ELISA诊断试剂具有较高的检测效能。在实际工作中,可以通过常用的诊断试剂筛选实验,经统计分析后筛选出较高效能诊断试剂用于检测。 相似文献
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目的 了解我国健康人群丙型肝炎病毒感染现状.方法 采用北京万泰生物药业的HCV EIA诊断试剂检测人群血清丙型肝炎病毒(丙肝,HCV)IgG抗体.结果 六省市(区)人群血清共9 538份,HCV抗体阳性数37份,总阳性率为0.39%,其中北京人群阳性率0.23%,黑龙江人群为0.74%,山东人群为0.26%,宁夏人群为0.10%,甘肃和四川人群阳性率均为0.44%.对37例HCV阳性者性别及年龄分析,男性19例占51.35%,女性18例占48.65%,<10岁年龄组1例,占2.70%,10~19岁组5例,占13.51%,20~29岁4例占10.81%,30~39岁组6例,占16.22%,40~49岁组9例,占24.32%,≥50岁有12例占32.43%.对HCV阳性者重叠其他型别肝炎病毒感染分析,单独HCV阳性2例,占5.41%,伴有HAV-IgG抗体阳性35例,占94.59%,伴有HEV-IgG抗体阳性10例,占27.03%,伴有HBsAg、HBcAb和HbeAb阳性者2例,占5.41%,该2例HAV和HEV抗体也阳性.结论 六省市(区)人群HCV感染率均在1%以下,感染者年龄以50岁以上最高,决大多数HCV阳性者重叠有其他型别的肝炎病毒感染. 相似文献
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目的 探讨以痘苗病毒载体表达的甲肝病毒培养合适的细胞系和重组病毒灭活以及甲肝病毒抗原保存条件.方法 将构建成功的表达甲肝抗原的重组痘苗病毒分别接种于K4、143、HEL、Hep-2和Vero等细胞,用ELISA测定重组甲肝抗原的表达产量和不同方法灭活重组病毒后的抗原活性.结果 在K4、143和HEL细胞表达重组甲肝抗原的产量略优于Hep-2和Vero细胞,重组病毒经β-丙内酯和甲醛灭活后,甲肝抗原活性不变,制备的重组甲肝抗原稳定性好.结论 痘苗病毒表达载体可以提高甲肝抗原表达效率,具有十分广阔的应用前景. 相似文献