超敏C反应蛋白和中性粒细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值在2型糖尿病发生急性心肌梗死中的价值分析

目的:探讨超敏C反应蛋白(hs-CRP)和中性粒细胞/高密度脂蛋白胆固醇比值(NHR)与2型糖尿病(T2DM)发生急性心肌梗死(AMI)的相关性。方法:选取2021-12-2022-09本院确诊的T2DM患者217例,依据是否合并AMI将其分为T2DM+AMI组(n=108)和T2DM组(n=109),选取同期本院体检健康人群作为对照组(n=86)。检测外周血中白细胞总数(WBC)、中性粒细胞数(NEU)、hs-CRP、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC),同时计算NHR,分析各组间上述指标的差异。采用单因素和多因素Logistic回归分析相关指标与T2DM并发AMI的危险因素。应用ROC曲线用于评估hs-CRP和NHR对T2DM患者发生AMI的预测价值。结果:与对照组比较,T2DM组和T2DM+AMI组WBC、NEU、TC、TG、hs-CRP和NHR水平均升高,HDL-C水平降低;与T2DM组比较,T2DM+AMI组WBC、NEU、TG、hs-CRP和NHR升高,差异均有统计学差异(P<0.05或P<0.0...     

对细胞分析异常警示进行镜检复查的临床意义

目的 加强使用血细胞分析仪细胞计数时对镜检复查重要性的认识。方法 应用SF—3000五分类血液分析仪检测500例血液标本，并对有异常警示的标本镜检复查。结果 500例分析结果中162例有异常警示，而162例异常标本镜检复查后显示血细胞形态异常者149例。结论 对全血细胞计数时的异常警示要加强镜检复查。     

乙型肝炎病毒在HepG2细胞中的稳定复制及表达

目的 建立HBVHepG2肝细胞株，使HBV能长期稳定地表达抗原并复制。方法将含完整转录单位的1．2倍体HBVDNA经Sal1位点克隆入真核表达载体pREP10，构建的重组载体pREP—HBV以Lipofemamine2000转染HepG2细胞，250μg／ml。潮霉素筛选抗性细胞克隆。ELISA检测细胞上清液中的HBsAg和HBeAg。电子显微镜下观察细胞上清液HBV颗粒。制备HBV特异性探针，以Southern印迹法检测细胞株内HBV核心颗粒DNA。结果获得含1．2倍体HBVDNA的重组载体，即pREP—HBV，该重组载体转染HepG2细胞后，获得5株潮霉素抗性细胞RHBV1～RHBV5。均能表达HBsAg和HBeAg。Southern印迹结果显示各株细胞均可见明显的杂交拖带，即存在HBVDNA复制中间体。细胞培养上清液浓缩后在电子显微镜下可见成簇的、直径约42nm的HBV颗粒及直径为22～26nm的球形颗粒。结论 成功建立了HBV稳定复制及表达的HepG2细胞株，目前细胞已传代50次，每3天1次。     

乙型肝炎病毒对HepG2细胞影响的蛋白质组学分析

HBV可引起急慢性肝炎、肝硬化，并与原发性肝细胞癌发生、发展关系密切。近年来，尽管HBV编码蛋白，如S蛋白、表面抗原大蛋白等，致肝细胞病变作用得到广泛重视，但HBV对宿主细胞的整体影响尚鲜见报道。本研究采用蛋白质组学相关技术，即差异凝胶电泳（differentialin—gel electrophoresis）和基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MALDI—TOF-TOFMS）技术，整体研究HBV对HepG2细胞蛋白表达的影响，鉴定其中的差异蛋白质，为更合理地探讨HBV对细胞功能的影响提供理论依据。     

2014～2017年山东省泰安地区输入性疟疾患者临床及实验室相关指标分析

目的 分析2014～2017年山东泰安地区输入性疟疾患者临床及实验室相关指标特征,以提高对输入性疟疾的诊治水平。方法 回顾性分析泰安市中心医院2014～2017年58例输入性疟疾患者的临床资料,对患者体征、血细胞检测、肝功能进行统计分析。结果 58例患者以发热为首发症状者最多,占82.8%; 感染疟原虫类型以恶性疟居多,为56.90%; 血细胞检测中,疟疾组白细胞计数(WBC)和中性粒细胞百分比(N%)均高于对照组且差异具有统计学意义(WBC:t=5.371,P<0.05,N%:χ²=9.592,P<0.05),血小板(PLT)计数低于对照组且差异具有统计学意义(t=7.239,P<0.05),恶性疟患者血小板(PLT)计数低于其他三种疟疾患者,且差异均具有统计学意义(q=4.221～6.778,均P<0.05),三日疟患者白细胞计数(WBC)和中性粒细胞百分比(N%)均低于其他三种疟疾患者,且差异具有统计学意义(WBC:q=3.523～6.818,均P<0.05,N%:χ²=58.19～63.23,均P<0.05); 肝功能检查中,疟疾组患者谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)均高于正常对照组,且差异有统计学意义(t=2.131～8.922,均P<0.05),恶性疟患者TBIL高于三日疟,且差异具有统计学意义(q=4.983,P<0.05); 疟疾组患者经治疗后,PLT和AST变化最为明显,患者PLT逐渐上升,AST逐渐下降,在出院前可恢复正常。结论 输入性疟疾患者实验室指标有明显特点,且不同类型疟原虫的感染实验室指标有差异,在工作中应加以重视,提高疟疾的诊治水平。     

乙型肝炎病毒DNA聚合酶末端蛋白抗α-干扰素功能区域分析

目的 确定乙型肝炎病毒（HBV）DNA聚合酶末端蛋白（terminal protein，TP）抗α-干扰素（IFN-α）的功能区域。方法 PCR扩增IFN-α诱导人类6-16基因启动子并克隆入pCAT-Basic中，构建IFN—α反应报告载体p6-16CAT。以FuGENE6转染该报告载体至Huh7细胞并给予不同浓度IFN-α2a刺激，ELISA法检测细胞内氯霉素乙酰基转移酶（CAT）的表达，建立Huh7细胞对IFN-α反应强弱的定量判定标准。构建TP（包括Spacer区）基因缺失突变体重组真核表达载体，通过融合表达的多肽表位抗体，Westernblot法检测目的蛋白在Huh7细胞中的表达。重组表达载体分别与报告载体p6-16CAT共转染Huh7细胞，转染后48h给予终浓度为100IU／ml的IFN-α2a刺激，作用24h后裂解细胞，通过检测胞内CAT含量高低评价各缺失突变体抗IFN-α作用，并据此确定TP（包括Spacer区）抗IFN-α作用的功能区域。结果 获得6-16基因启动子并构建IFN-α反应报告载体p6-16CAT。转染p6-16CAT的Huh7细胞在IFN-α2a刺激下CAT表达显著增强，且在IFN-α2a终浓度为100IU／ml时达到最大。Westem blot显示，IP（包括Spacer区）各基因缺失突变体在Huh7细胞中表达相应蛋白。共转染p6-16CAT及部分／全长1P的Huh7细胞在IFN-α2a刺激下，胞内CAT值和对照组相比无显著差别，相反，全长TP＋部分／全长Spacer使细胞内CAT值显著下降。结论 DNA聚合酶Spacer区与HBV抗IFN-α作用密切相关。     

乙型肝炎病毒X蛋白对MMPs及TIMPs的影响

目的全面分析乙型肝炎病毒X蛋白（Hepatitis Bvirus Xprotein，HBx）对基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinases，MMPs）及组织金属蛋白酶抑制物（Tissue Inhibitors of Metalloproteinases，TIMPs）的影响，探讨其在肝细胞癌的侵袭转移中的可能作用。方法PCR扩增HBVX基因并克隆人真核表达载体pcDNA3．1／HisC，重组载体及空载体分别以Lipofectamine2000转染HepG2细胞并以800μg／mlG418筛选抗性细胞克隆。以Western blot检测抗性细胞HBx表达。抽提细胞总RNA，半定量RT-PCR检测MMPs及TIMPs。收集细胞培养液上清，以明胶酶谱检测MMP2及MMP9活性，反相明胶酶谱检测TIMPs活性。结果构建了HBx重组载体pcDNA3．1-XB。该重组载体及对照空载体转染HepG2细胞后，G418筛选，分别获得抗性细胞克隆HepG2-XB及HepG2-HIS，前者经Westernblot证实可表达HBx。半定量RT—PCR显示HBx可促进MMP2、7、13、14、16、17、19、23、24及TIMP1、4基因的转录，抑制MMP1、3、8、9、10、11、12、15、20及TIMP2、3基因的转录。明胶酶谱检测显示HBx可促进酶原MMP2（Pro—MMP2）及活性MMP9（Active—MMP9）表达，抑制酶原MMP9（Pro—MMP9）表达；反相明胶酶谱显示HBx可促进TIMP1、TIMP4的表达，同时抑制TIMP2及糖基化TIMP3的表达。结论HBx蛋白对MMPs、TIMPs转录表达的影响是多方面的，但这种影响在HBx促进肝癌细胞侵袭转移过程中的确切机制有待进一步阐明。