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1.
目的构建并制备表达人CD137L蛋白的5型重组腺病毒(Ad5-CD137L), 并初步研究其在小鼠中的抗肿瘤免疫效果。方法将密码子优化CD137L蛋白的表达基因插入pDC316穿梭质粒,并与pBH-GloxΔE1,3Cre腺病毒骨架质粒, 共同转染HEK293细胞, 构建Ad5-CD137L种子。扩增并纯化后, 对所得Ad5-CD137L重组腺病毒的插入目的基因与蛋白表达情况进行鉴定。检测Ad5-CD137L在C57BL/6小鼠体内的特异性细胞免疫和抗肿瘤免疫水平。结果成功地构建了Ad5-CD137L, PCR和测序结果表明插入目的基因与构建理论值相符。免疫荧光法鉴定Ad5-CD137L能在HEK293细胞中表达目的蛋白, 经Western印迹法鉴定该目的蛋白的相对分子质量约为25 000, 与理论值相符。与空腺病毒相比, Ad5-CD137L能显著诱导小鼠特异性IFN-γ(t=6.315, P=0.003), 抗肿瘤免疫效果更显著(t21 d=8.275, t29 d=4.492;t39 d=5.101, P均<0.001)。结论成功构建了Ad5-CD137L, 该重组病毒具有... 相似文献
3.
目的:研究成人大骨节病髋关节病变的影像学特点,并与骨关节炎患者进行对比。方法:对四川省壤塘县112例(224髋)确诊为成人大骨节病的患者进行髋关节摄片,观察髋关节髋臼侧、股骨侧有无影像学改变,测量髋关节Sharp角、CE角、髋臼指数、头转子间距离、头颈指数和颈干角,并将测量结果与我院40例(80髋)原发性骨关节炎患者进行对比分析。结果:224髋中有22髋(9.8%)出现髋部异常改变,主要表现为髋臼软骨下骨硬化或囊变、股骨头形态不规则伴密度异常、颈干角变小。112例患者Sharp角平均37.92°、CE角平均30.26°、髋臼指数平均43.86、头转子间距离平均1.69cm、头颈指数平均1.80、颈干角平均121.8°。与骨关节炎患者相比,大骨节病组患者颈干角较小,其组间差异有统计学意义(P〈0.05),但均在正常范围内;其余测量指标两组比较均无统计学差异。结论:成人大骨节病部分患者髋关节在影像学方面具有异常改变,主要表现为髋臼软骨下骨硬化或囊变、股骨头形态不规则伴密度异常、颈干角变小。上述影像学改变与骨关节炎患者相比无明显特异性。 相似文献
4.
直肠炎是一种发生在直肠内的炎症,轻者仅黏膜发炎,重者炎症累及黏膜下层、肌层,甚至直肠周围组织,也可累及结肠部分黏膜都有炎症。常见的直肠炎有急性直肠炎、慢性直肠炎、放射性直肠炎、结核性直肠炎等。 相似文献
5.
目的 探讨重组Ⅲ型人源化胶原蛋白阴道凝胶治疗阴道干涩的临床疗效和安全性。方法 将2014年1月至5月重庆医科大学附属第二医院和山西医科大学附属第一医院收治的80例阴道干涩患者随机分为两组,分别给予重组Ⅲ型人源化胶原蛋白阴道凝胶(研究组,2g/次)和透明质酸衍生物阴道凝胶(对照组,3g/次)治疗,隔日1次,共10次。比较治疗前后及两组之间阴道干燥指数、阴道p H值、外阴阴道刺痛、性交疼痛、症状缓解时间以及总体疗效。结果 符合研究方案且完成研究者,研究组38例,对照组38例。治疗后研究组干燥指数增加3分、增加了33.3%,有效率为63.2%;对照组增加2分、增加了27.3%、有效率为39.5%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗对pH值均无影响。治疗后外阴阴道干涩刺痛、性交疼痛症状均有改善,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。研究组对疗效满意度的主观评价中,满意及非常满意的比例为63.1%,对照组为24.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白阴道凝胶可安全、有效地缓解阴道干涩症状,尤其适用于不宜使用激素治疗的患者。 相似文献
6.
目的 探讨多发性肌炎和皮肌炎治疗前后磁共振成像( MRI)检查的价值.方法 纳入15例多发性肌炎及皮肌炎患者,治疗前后分别行患者双下肢近端肌群MRI检查,检测血清肌酸激酶水平,并测定肌力;对比治疗前后肌力与MRI结果之间、肌力与肌酸激酶之间的相关性.统计学处理采用独立样本t检验及Pearson相关分析.结果 治疗前患者MR[计分2.37±0.62,肌酸激酶(3841±3175) U/L,肌力评分15.1±2.4;治疗后MRI计分1.30±0.28,肌酸激酶(549±338) U/L,肌力评分18.1±0.9,差异有统计学意义(P<0.05).肌力与MRI计分、肌酸激酶水平均有相关性,且与前者呈强相关(r=-0.890,P<0.05).结论 MRI能更好地反映多发性肌炎及皮肌炎患者肌力改善情况,较血清肌酸激酶有更高的敏感性. 相似文献
7.
目的 研究重组4-1BB配体(recombinant 4-1BB ligand,r4-1BBL)作为佐剂对治疗性重组人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus-16,HPV16)蛋白疫苗(HPV16蛋白疫苗)免疫效果的影响.方法 对4-1BBL胞外功能区进行密码子优化,并通过NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点定向插入pET28a表达载体.将获得的重组表达载体转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达.用蛋白质印迹法对重组蛋白进行鉴定,并用非还原性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电子显微镜分析重组蛋白结构.用CCK-8试剂盒检测纯化r4-1BBL对小鼠T细胞体外增殖的影响.同时将r4-1BBL与HPV16蛋白疫苗联合免疫C57BL/6小鼠,用酶联免疫斑点试验检测小鼠的细胞免疫应答水平,观察r4-1BBL对HPV16蛋白疫苗抑制肿瘤生长的影响.结果 密码子优化的4-1BBL胞外功能区能在重组表达载体中表达,且表达产物同时以包涵体和可溶性形式存在.可溶性产物的结构主要为二聚体,电子显微镜下可以观察到类似亚单位的结构.纯化r4-1BBL可促进小鼠脾淋巴细胞的体外增殖.与单纯HPV16蛋白疫苗相比,r4-1BBL联合HPV16蛋白疫苗能诱导更强的特异性细胞免疫应答(t=3.525,P=0.024)和产生更明显的肿瘤生长抑制作用(t=2.534,P=0.021).结论 r4-1BBL能在小鼠中提高HPV16蛋白疫苗的免疫效果,具有作为HPV16蛋白疫苗佐剂的潜力. 相似文献
8.
目的:建立一种高效液相色谱法检测全血中羟氯喹及其代谢物去乙基羟氯喹、去乙基氯喹的新方法,并分析干燥综合征患者血药浓度与免疫相关临床指标的相关性。方法:取100 μL全血样本,加入内标,以两倍量的乙腈沉淀蛋白,离心取上清进样。用Zorbax SB-C18色谱柱分离,流动相为0.2 mol·L-1磷酸二氢钾-乙腈=15:85(磷酸调至pH3.0),流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温35℃。考察该方法的专属性、标准曲线和定量限、精密度和准确度、提取回收率、稳定性;测定53例患者羟氯喹及其代谢物血药浓度,并收集患者白细胞水平、血小板计数、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血细胞沉降率等临床检验指标,用SPSS软件分析血药浓度与临床指标的关系。结果:羟氯喹、去乙基羟氯喹、去乙基氯喹、内标氯喹的保留时间分别在8.6,4.1,5.2 min和12.8 min左右,羟氯喹及其代谢物在3~3 000 ng·mL-1范围内线性良好,最低定量限为3 ng·mL-1,批内、批间精密度、方法回收率符合要求;患者用药后白细胞水平有明显降低,其他临床指标无明显变化,血药浓度高组患者白细胞水平较高,其他指标在高低浓度组间没有明显差异。结论:该方法灵敏度高、结果准确、样品处理简单、分析快速,可用于临床检测。干燥综合征患者服用羟氯喹后白细胞计数有统计学差异,服药后高浓度组患者白细胞计数显著高于低浓度组患者。 相似文献
9.
目的研制大鼠抗肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VPl特异性中和单克隆抗体(单抗),并用Westem印迹、ELISA和免疫荧光检测(IFA)等方法验证其特异性。方法采用单克隆杂交瘤技术人工合成包含EV71 VP1中和抗原决定簇位点SPT0的多肽偶联载体蛋白KLH,腹腔内注射免疫大鼠数次后,取有预期免疫应答的脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA法筛选和有限稀释法亚克隆获得稳定的阳性单克隆杂交瘤细胞株并鉴定其IgG亚型。选取其中1株单克隆杂交瘤细胞系BC6,体外培养后注射于SCID裸鼠腹腔制备腹水以产生大量抗体,用ProteinA层析柱亲合纯化后获得纯化抗体。细胞培养微量中和试验测定该单抗中和EV71的滴度,并将其用于多种方法检测EV71特异性抗原。结果共获得8株稳定的单克隆杂交瘤细胞系,分别有6株属于IgGl亚型,2株为IgG2a亚型。通过制备腹水大量产生抗EV7l大鼠单抗BC6并纯化,其对EV71的中和滴度为1:32。BC6用于Western免疫印迹可特异检测大肠埃希菌表达的EV71VPl重组蛋白和EV71样品中的VPl,用于ELISA可灵敏特异地定性或定量检测EV71抗原含量,用于IFA可特异识别被感染Vero细胞内的EV71颗粒,而对柯萨奇病毒A16型无交叉反应。结论成功制备获得了大鼠抗EV71VPl的特异性中和单抗,可应用于Western免疫印迹、ELISA、IFA等方法,成为灵敏特异地检测EV71VPl或全病毒颗粒的有效工具。 相似文献
10.
F波是周围神经在阈上超强刺激条件下,由逆行冲动引起的运动神经纤维的非突触性反应。F波最显著的特点是能够反映神经全程的功能状态。目前国内外各项神经F波相关研究在周围神经病中已逐渐成为常规检查手段,尤其对整个神经特别是近端神经的运动传导功能可做出早期估价。面神经是人体在骨管内走形最长的脑神经,应用F波可全程、早期的检测其功能状态。 相似文献