猪骨支架材料与人骨支架材料的理化性能及力学特征

背景:骨组织工程研究的核心是构建类似人体骨组织结构和性能的组织工程支架。目的:对比观察猪骨支架材料与人骨支架材料的理化性能及力学性能。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-03/12 在南方医科大学临床解剖学研究所和广东省组织构建与检测重点试验室完成。材料:新鲜健康成人尸体 4 具由广州市红十字会南方医科大学遗体捐献接收点提供,家属知情同意。市售低温深冻 6 个月的成年猪6 只。方法:取人和猪髂骨,剔除软组织,刮除骨髓和骨膜,用锯骨机将松质骨切成 5 mm× 5 mm×40 mm 左右的骨条,超声清洗、H2O2和乙醇浸泡、甩干、冻干、辐照处理得到猪骨支架材料和人骨支架材料。主要观察指标:对两种支架材料进行扫描电镜观察;对比两种支架材料孔隙率、蛋白质和钙、磷含量及力学性能。结果:扫描电镜下两种材料均具有骨本身的骨小梁、小梁间隙及骨内管腔系统,具有天然网状结构。三维支架系统形态完整,其中猪骨支架材料较人骨支架材料具有更多的三维孔隙,2 种材料的孔隙大小接近,均在400 μm左右。猪骨支架材料孔隙率高于人骨支架材料(P < 0.05),蛋白质含量低于人骨支架材料(P < 0.05),钙、磷含量与人骨支架材料相当(P > 0.05)。两种支架材料弹性模量比较差异无显著性意义(P > 0.05)。结论:猪骨支架材料在理化性能和力学性能方面与人骨支架材料极相近。     

局部解剖学开课时间对教学质量的影响

局部解剖学是介于基础医学与临床医学之间的一门桥梁课程,是学习其他基础医学和临床医学课程的基础[1-2],是在系统解剖学的基础上,研究人体局部的层次结构、器官的位置、毗邻关系及其临床应用的一门学科.也是临床医学,特别是外科学等手术学科和影像医学与核医学的主要基础课,具有很强的临床实际应用意义[3].目前在国内的医学院校均对临床医学等专业开设了局部解剖学课程,部分院校将其放在第二学年的第一学期(即第3学期),还有部分学校将局部解剖学设置在第三学年的第一学期(即第5学期),或者将系统解剖学和局部解剖学合二为一展开[4].我们对此进行了调整,具体情况如下.     

胎盘血管三维模型构建用血管灌注技术

有关胎盘血管网的研究,曾有学者[1～3]利用胎盘铸型标本做了大量工作.胎盘血管铸型虽然可以观测一、二、三级胎盘血管形态,但由于受测量工具限制,四到七级的微小血管管径无法测量,而用CT扫描三维重建的方法,则可以对胎盘血管网进行全面而精细的研究.本文旨在为CT扫描三维重建用建立一种胎盘血管灌注铸型技术.     

脂肪源干细胞移植对糖皮质激素性骨质疏松骨量影响的实验研究

摘要：目的探索异体脂肪源干细胞（ADSCs）移植对糖皮质激素性骨质疏松（GIOP）大鼠骨密度和骨组织微结构的影响,
为GIOP的治疗探索一种新的方法。方法雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组（A组）、模型组（B组）、治疗对照组（C组）
和细胞治疗组（D组）。利用醋酸泼尼松龙建模成功后,C和D组分别通过尾静脉移植生理盐水和ADSCs。对各组大鼠作
腰椎和股骨骨密度测量以及胫骨骨组织形态计量学分析。结果与A组相比,B组腰椎和股骨骨密度、骨小梁的相对体
积、厚度和数量均明显降低,骨小梁的分离度和单位骨小梁破骨细胞数显著增加(P<0.05)。ADSCs治疗后,D组中的各项
指标均明显改善,并与B组比较具有统计学差异(P<0.05),亦明显优于C组。结论ADSCs可以有效的改善大鼠GIOP,这
为GIOP的治疗提供了一种新的方法,也为“筋膜学假说”提供了部分实验支持。     

人IgE重链3-4区蛋白的表达、纯化及功能分析

目的通过基因重组的方法表达IgECε3-Cε4区,鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的相互作用．并用重组蛋白免疫小鼠制备血清。方法用RT—PCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞调取IgECε3-Cε4cDNA片段,克隆至pET28a（＋）构建原核表达载体IgECε3-Cε4-pET28a（＋）,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）,诱导表达IgECε3-Cε4区蛋白,通过Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白后,用免疫荧光方法鉴定重组蛋白与天然细胞表面受体FcεRⅠ之间的结合能力,并用UniCAP100全自动分析检测仪对重组抗原进行定量检测与鉴定：用表达蛋白免疫BALB／c小鼠,制备抗鼠血清,用Western—blot法对多克隆抗体进行鉴定。结果成功调取的人IgECε3-Cε4区基因与已报道的序列相一致;获得的IgECε3-Cε4区蛋白相对分子质量（Mr）同预期的结果相一致;IgECε3-Cε4能特异性结合人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠ受体;通过UniCAP 100全自动分析检测仪能够检测到重组抗原并精确到国际单位;免疫鼠血清多抗能特异性结合天然人血清IgE。结论成功构建了IgECε3-Cε4-pET28a（＋）表达载体,获得了能被人嗜碱性粒细胞表面的FcεRⅠα亚基特异性识别的IgECε3-Cε4区蛋白．并用天然人血清IgE鉴定了多克隆抗体,为下一步单克隆抗体的制备打下了基础。     

大鼠脂肪源干细胞中骨形态发生蛋白信号通路相关分子的表达

目的:探讨大鼠脂肪源干细胞(ADSCs)成骨和成脂肪分化能力及骨形态发生蛋白(BMP)信号通路相关分子的表达.方法:切取Wistar雌性大鼠腹股沟脂肪垫,用酶消化法培养ADSCs.将第4代ADSCs经成骨和成脂肪诱导分化培养后,进行相应的茜素红和油红O染色,以鉴定ADSCs的分化潜能.同时取培养的第4代ADSCs进行流...     

同种异体脂肪源干细胞移植对耐力训练大鼠血清生化指标及运动能力的影响

摘要：目的从筋膜学角度观察同种异体移植脂肪源干细胞（ADSCs）对耐力训练大鼠体内某些血清生化指标活性及运动
能力的影响。方法40只Wistar雄性大鼠随机分成安静对照组（空白对照组）、游泳训练照组（模型组）、安静移植细胞组
（实验对照组）和游泳移植细胞组（实验组）。模型组和实验组进行力竭游泳训练。力竭游泳训练1周后,实验组与实验对
照组经尾静脉输入ADSCs。游泳训练结束后,记录各组大鼠游泳力竭的时间以及检测血清尿素(BUN)、乳酸脱氢酶
(LDH)、血乳酸(BLa) 和血红蛋白( Hb) 含量。结果模型组与空白对照组比较,Hb水平显著降低,血清BUN、LDH、BLa水
平均显著升高(P<0.01),力竭时间显著延长(P<0.01);与模型组比较,实验组Hb显著提高(P<0.01),而BUN、LDH、BLa水平
均明显降低(P<0.01),力竭时间有较大提高(P<0.01)。结论移植ADSCs可有效延缓了大鼠运动性疲劳的产生,提高了大
鼠的运动能力。     

人参皂甙对K562细胞作用的基因表达谱研究

目的 运用基因芯片技术研究人参总皂甙(TSPG)作用后K562细胞基因表达谱的变化.方法 200 μg/ml TSPG作用于K562细胞3 d后,提取总RNA,合成cRNA并分别用cy3和cy5标记,与AgilentHuman 1B寡核苷酸基因芯片杂交,研究基因表达谱的变化.结果 TSPG刺激K562细胞后共有362个基因表达发生变化,与对照组K562细胞比较,表达上调的基因有20个,主要有代谢相关基因,信号转导相关基因,细胞受体相关基因等;表达下调的有342个,包括免疫防御相关基因,DNA结合与转录因子,代谢相关基因,细胞周期相关基因等.RT-PCR技术验证了FOSL1、E2F2、CCNE2和ODZ1四个基因表达的变化.结论 TSPG刺激K562细胞后,影响了细胞内一系列基因的表达.这些基因可能与TSPG的抗肿瘤机制有关.     

人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达

目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a(+)重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT-PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段,并插入pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达带6×His标签的融合蛋白。结果PCR和酶切电泳鉴定结果显示SH2B1β基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS-PAGE电泳结果表明获得相对分子质量约75000的目的蛋白。结论成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21(DE3)中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础。     

差速贴壁法分离培养脂肪源间充质干细胞

目的:探讨差速贴壁法从大鼠腹股沟脂肪垫分离纯化脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的可行性。方法:采用差速贴壁培养法分离ADMSCs,并与普通培养法得到的ADMSCs进行表面分子CD44阳性率对比。在第2代ADMSCs中加入条件培养基进行诱导,根据条件培养基的不同分成3组:①成骨诱导组:加入成骨培养基;②成脂诱导组:加入成脂培养基;③对照组:仅加入基础培养基。成骨诱导组和对照组进行碱性磷酸酶(ALP)检测,成脂诱导组和对照组进行油红O染色检测。结果:差速贴壁培养法获得CD44阳性率更高的ADMSCs。成骨诱导组的ALP大大高于对照组,成脂诱导组油红O染色阳性,对照组油红O染色均为阴性。结论:差速贴壁培养法从大鼠腹股沟脂肪垫中分离得到高纯度ADMSCs。