尿激酶型纤溶酶原激活物系统对骨巨细胞瘤细胞基质金属蛋白酶-2和组织基质金属蛋白酶抑制物-3表达的影响

目的:研究尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)信号转导对骨巨细胞瘤基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制物-3(TIMP-3)的调节。方法:用免疫组化检测骨巨细胞瘤组织中uPAR、MMP-2和TIMP-3的表达。用免疫共沉淀法检测uPA对瘤细胞信号转导通路的p44蛋白磷酸化水平。用蛋白印迹法检测用uPA和uPAR抗体处理后瘤细胞MMP-2和TIMP-3蛋白表达。结果:(1)uPAR主要表达在部分单核基质细胞和一些多核巨细胞的胞膜上;(2)MMP-2主要表达在瘤细胞的胞浆,在多核巨细胞,其表达有明显的极向性;(3)在骨巨细胞瘤组织TIMP-3表达量低于MMP-2,在多核巨细胞也显示极向性表达;(4)将uPA-ATF加入培养的骨巨细胞瘤细胞后,细胞信号通路上的p44蛋白磷酸化水平明显增高。用uPAR抗体处理后,细胞p44蛋白磷酸化水平明显降低。说明uPA-ATF参与细胞信号转导,而且受uPAR拮抗剂的影响;(5)uPA-ATF信号通路上调MMP-2和TIMP-3的表达,而uPAR抗体则下调MMP-2和TIMP-3的表达。结论:本实验首次直接证明uPA-ATF通过信号转导能调节MMP-2和TIMP-3的表达,而后者则在骨巨细胞瘤局部骨质吸收中起重要作用。     

靶向DAL-1基因的shRNA表达载体的构建与鉴定

目的：建立DAL-1稳定抑制的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞实验模型．方法：构建靶向DAL-1的shRNA表达载体转染NSCLC细胞株，筛选出阳性克隆，在mRNA和蛋白质水平鉴定其抑制效率，最终得到DAL-1稳定抑制的细胞株．结果：通过双酶切鉴定和测序鉴定构建的shRNA表达载体序列正确，T4表达载体在mRNA和蛋白质水平能有效抑制DAL-1的表达，抑制率分别为（87．4±2．0）％和（82．7±2．1）％．结论：成功设计并构建了靶向DAL-1的shRNA表达载体，建立了DAL-1稳定抑制的NSCLC细胞株，为进一步研究DAL-1在NSCLC细胞中的作用提供了实验模型．     

骨巨细胞瘤TIMP-3启动子甲基化的研究

目的 检测骨巨细胞瘤(GCT)中TIMP—3启动子甲基化及其蛋白表达，探讨该肿瘤组织TIMP—3蛋白表达缺失的原因和TIMP-3启动子甲基化与GCT分级和复发的关系。方法 用免疫组织化学SP法和蛋白免疫印迹检测TIMP—3在GCT组织中的表达，用甲基化特异的PCR(MSP)法检测TIMP—3基因启动子的甲基化状态。结果 TIMP—3主要在单核基质细胞和多核巨细胞的胞质表达，后者的表达具有明显的极向性。17例GCT中有5例(29．4％)TIMP—3蛋白丢失，其中4例的TIMP—3启动子发生异常甲基化，且均为组织学分级为Ⅱ级的病例。结论 GCT的局部骨质破坏，可能与TIMP—3丢失有关；而TIMP—3启动子的异常甲基化，是TIMP—3基因失活和蛋白丢失的重要机制。     

从《智能系统学报》数据统计分析看新刊发展之路

期刊创办初期会面临许多困难。分析了《智能系统学报》2006年创刊以来的数据,同时与其他期刊进行横向和纵向对比,分析了创刊年限、影响因子、总被引频次、来源文献量和索引情况等主要期刊指标之间的关系,以实例说明新刊发展的可行之路。     

儿童替牙期引发的问题

几天前，我们几个久未谋面的同学聚会，闲聊时发现，原来，不知不觉间．大家的小孩都快到换牙的时候了。可是，枉费几人都是学医出身的（非口腔专业），问来问去，竞都没搞清楚到底小孩哪些牙是要换的、哪些牙是不换的，再具体到换牙年龄、换牙时吝易出现哪些状况，以及该如何预防等问题，更是几乎一无所知。最后，大家齐齐将目光转向我，一致要求在美食上来之前得到满意的答案。     

选牙刷，把好三道关

“好了，小家伙的牙现在是没有问题了。不过要记得每天认真刷牙，至少每半年来检查一下口腔。”我拍拍刚从治疗床上爬起来的小病人，对他妈妈说。     

塞牙了，牙签非首选

【牙签＆牙线之道（上篇）】 一般人尽量不要用牙签。即便是牙间隙明显,不得不用的,也要注意使用方法。     

非小细胞肺癌细胞系中DAL-1表达与其启动子甲基化的关系

目的 探讨非小细胞肺癌中潜在抑癌基因DAL-1的表达与其启动子甲基化的关系.方法 10例非小细胞肺癌初诊患者,每例在治疗前抽取胸水并分离培养肿瘤细胞成系.分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、western blot检测DAL-1的mRNA水平和蛋白水平的表达,用甲基化特异性PCR检测DAL-1基因启动子的甲基化.结果 10个细胞系中有9个完全不表达DAL-1mRNA和蛋白,仅有1个表达与人支气管上皮细胞株HBE水平相当.9个不表达DAL-1的细胞系有6个检出启动子CpG岛甲基化.结论 DAL-1在大多数非小细胞肺癌患者胸水分离细胞系中表达缺失.而DAL-1启动子甲基化是造成这种现象的主要原因.     

要健齿，多补钙？

强壮的牙齿不易烂。但如何强壮,细辨有门道。 易烂牙,多因素相关 “小家伙,你的牙齿可算是补完了。”我对着治疗床上扭来扭去的淘气小男孩说道。话音刚落,小家伙立马高喊：“解放喽!”跳下治疗床就跑出了诊室。