PCR产物的克隆方法

ＰＣＲ产物的克隆方法肖翠英张思仲聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）已经成为分子生物学的强有力工具，并应用于核酸检测、序列分析、克隆、突变研究和现代分子生物学的许多其它方面。现今，克隆前扩增ＤＮＡ已经成为日常的操作。...     

鼻咽癌患者外周血培养细胞染色体的显带研究

采用常规和显带技术,对41名未经治疗的鼻咽癌患者的外周血培养细胞进行了细胞遗传学检查,同时以21名健康人作为对照。结果表明,患者组染色体的数目和结构畸变率均远高于对照组(分别为后者的6.6倍和6.97倍)。畸变最经常涉及 C 组,其次为 G、F、A 组。此外,在部分患者还可见到一些结构异常的标记染色体。本文根据实验结果分析了某些标记染色体的构成机制,并对畸变细胞和标记染色体的来源和涵义进行了探讨,认为鼻咽癌患者外周血培养细胞中较高的畸变率和某些标记染色体的出现可能是患者染色体不稳定性的反映。     

HBV与HBV转基因小鼠

本文从HBV的分子生物学和病理学角度综述了HBV基因组结构与组织的研究进展,以及对其深入研究的新途径即HBV转基因小鼠,并就其在医学上的意义进行了概述。     

精蛋白异常及正常原发不育男性精蛋白2基因5'端GA重复区的研究(摘要)

运用ＰＣＲ技术对９４例原发不育患者的精蛋白２基因（ＰＲＭ２简称Ｐ２）５′端ＧＡ重复区进行了分析，以比较各等位片段的分布，并在异常组进行突变筛查。材料和方法９４例原发性男性不育患者来自本院男性门诊，年龄２５～４０岁。经蛋白电泳筛查，分为精蛋白正常组（８...     

Taqman技术定性检测主要性病病原体的临床评价

目前对性传播疾病主要病原体淋病奈瑟菌 (ＮＧ)、沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲脲原体 (ＵＵ)的病原检测 ,主要采用培养法和常规聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术。本试验采用Ｔａｑｍａｎ技术对临床标本中ＮＧ、ＣＴ及ＵＵ进行定性检测 ,并与培养法和常规ＰＣＲ方法比较 ,评价Ｔａｑｍａｎ技术在性病病原体定性检测中的临床应用价值。一、材料与方法1 .仪器试剂 :ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ热循环仪系罗氏公司产品 ;ＮＧ、ＣＴ、ＵＵ所用引物及Ｔａｑｍａｎ探针由上海生工生物工程有限公司合成。2 .标本来源与分类 :2 0 0 1年 1～ 6月四川大学华西医院泌…     

原发男性不育患者精蛋白基因的初步研究

为了解男性不育患者精子发育中组蛋白到精蛋白的转换机理、转换障碍与不育的关系，从８７例原发不育患者和９例正常可育者精液标本中，提取生殖细胞核碱性蛋白，进行醋酸尿素凝胶电泳。结果显示８例精蛋白异常，异常率９．１９％，全部涉及精蛋白２组分的缺乏。异常与正常个体相比，精蛋白占核碱性蛋白比例由５５．９１±７．４％下降为４．１８±２．２３％，说明精蛋白的异常，尤其是精蛋白２的缺乏，可能导致精蛋白的功能缺陷，是造成原发男性不育原因之一。对精蛋白异常不育和正常可育的２０名ＤＮＡ标本（８例精蛋白异常不育个体，８例精蛋白正常不育个体，４例正常可育）．以Ｐ２的基因探针进行了ＤＮＡ杂交，用特异扩增Ｐ１、Ｐ２、ＴＰ２编码区的引物对全部ＤＮＡ标本进行了ＰＣＲ扩增和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析，结果未见突变、插入和缺失等异常。初步说明精蛋白异常者在这三个编码区内ＤＮＡ的结构异常可能性极小。由此提示，进一步的深入研究工作，应注重编码区旁侧调控序列以及考察转录、翻译及翻译后加工各个环节的影响。     

遗传病基因诊断的基本质量控制

迄今能进行基因诊断的遗传病已逾百种。在临床上 ,遗传病基因诊断的范围主要包括 :直接针对遗传病患者的临床诊断 ;对遗传病家系中的易患个体进行症状前诊断与携带者检出 ;对遗传病家系中的患病高风险胎儿的产前诊断。在国外 ,针对部分常见遗传病已有一些比较规范的基因诊断程序[1,2 ],而我国虽然遗传病的基因诊断工作已开展近 2 0年 ,但受检测技术的局限性、从业人员缺乏必要的培训及实验室管理水平低下等因素的影响 ,严重制约了检测质量的持续提高 ,因此健全与发展遗传病基因诊断的基本质量控制规范具有相当重要的意义。此外 ,由于遗传病…     

提高我国疾病相关基因单核苷酸多态性研究的水平

1 我国的疾病遗传多态性研究 上一世纪80年代我国即开始了一些与疾病相关的遗传多态性研究[1,2].其后随着DNA分析的普及,针对已知致病基因及其紧密连锁位点的多态性研究迅速增多,其目的大多是为了包括连锁分析在内的遗传诊断[3-6].