Pathogenesis of congenital pyrimidine 5′ -nucleotidase | deficiency: A study on relationship among erythrocyte morphology, enzyme protein content and activity

Objective: To further explore the mechanism of congenital pyrimidine 5'-nucleotidase I deficiency. Methods; The samples were collected from the family members of a patient with P5'N- I deficiency. The enzyme activities were measured by UMP method and the enzyme proteins were quantified by ELISA while the morphology of peripheral blood cells was observed. Results: The enzyme contents reduced as their enzyme activities decreased in the family especially in four members. There was a significant positive correlation(r =0. 955) between the activity and the content of P 5'N- I . The count of the stippling cell was varied in the family. Conclusion.- One of the reasons for congenital P5' N- I deficiency might be the deficiency in the enzyme content. The morphology of peripheral blood erythrocyte may be an assistant diagnotic index. The P5'N- I activities and contents were measured simultaneously may be a effective method in clinic diagnosis.     

降钙素受体基因多态性与昆明地区2型糖尿病伴骨质疏松症的相关性

目的 研究降钙素受体(CTR)基因多态性与昆明地区2型糖尿病(T2DM)伴骨质疏松症的相关性,探讨T2DM伴骨质疏松症发病的遗传性易感因素.方法 收集2017年6月至2019年1月在昆明市第一人民医院甘美医院内分泌科住院的T2DM患者237例,按骨密度结果分为T2DM无骨质疏松组(A组)61例,T2DM合并骨量减少组(...     

巴林特小组在改善肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突中的应用

目的:探讨巴林特小组在肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突中的应用。方法:将纳入本研究的护理人员分为对照组和试验组各23人,对照组实施常规心理干预,试验组在此基础上实施巴林特小组模式,应用职业倦怠感表和工作-家庭冲突表评价干预前后的效果。结果:干预后试验组职业倦怠感得分为(154.42±9.61)分,低于对照组的(160.43±9.73)分(P<0.05)。干预后试验组工作-家庭冲突得分为(24.47±2.98)分,低于对照组的(26.56±2.96)分,试验组家庭-工作冲突得分为(20.69±1.76)分,低于对照组的(22.78±2.02)分(P<0.05)。结论:巴林特小组能够有效改善肿瘤科护士职业倦怠感和工作-家庭冲突。     

SARS患者康复期淋巴细胞功能状态及T细胞受体Vβ24个亚家族表达的格局

背景:严重急性呼吸道综合征(severe acuterespi ratory syndrome,SARS)是由SARS相关冠状病毒感染引起的急性传染性疾病。但目前其康复期患者细胞免疫状态仍有待进一步研究。目的:观察SARS患者康复期淋巴细胞功能状态和T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族表达的格局。设计:前后对照观察。单位:广东省中医院中心实验室。对象:选择2003-01/04在广州中医药大学第二附属医院收治的76例治愈的SARS患者,全部病例均符合"非典型肺炎的临床诊断标准"、"非典型肺炎重症病例诊断标准、出院标准"及《中医临床诊疗术语证候部分》的诊断标准,男30例,女46例,平均(32±11)岁。选择10名同期健康到院体检者,女5名,男5名,平均(32±7)岁,所有受试对象对检测项目知情同意。方法:①TCRVβ24个亚家族的表达检测:取受试对象全血2mL,用EDTA-K2抗凝管抗凝。在流式细胞术检测专用管中,分别加入各种荧光素标记的mAb:抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD25、抗CD28、抗HLA-DR、PC5-抗CD3mAb、TCRVβ1(PE FITC)、Vβ2(PE FITC)、Vβ3(FITC)、Vβ4(PE FITC)、Vβ5.1(PE FITC)、Vβ5.2(PE)、Vβ5.3(PE)、Vβ7.1(PE FITC)、Vβ7.2(FITC)、Vβ8(FITC)、Vβ9(PE)、Vβ11(PE)、Vβ12(FITC)、Vβ13.1(PE)、Vβ13.2(PE)、Vβ13.6(PE FITC)、Vβ14(FITC)、Vβ16(FITC)、Vβ17(PE FITC)、Vβ18(PE)、Vβ20(FITC)、Vβ21.3(FITC)、Vβ22(PE FITC)和Vβ23(PE)10μL,然后加入抗凝血50μL。混匀后,于室温避光孵育15min,再加入溶血素溶血、洗涤。最后将沉淀溶在300μLPBS中,用CoulterESP流式细胞仪进行检测。②T细胞亚群,T、B细胞的活化状态及Ts细胞和Tc细胞百分率的检测:每次收集5000个细胞,用仪器所带软件分别计算T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)、活化的T、B细胞(CD3 /CD25 、CD3 /HLA-DR 、和CD3-/HLA-DR )、Ts细胞和Tc细胞(CD8 /CD28 、CD8 /CD28-)的百分率。主要观察指标:①T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)的表达。②活化的T、B细胞(CD3 /CD25 、CD3 /HLA-DR 、和CD3-/HLA-DR )的表达。③Ts细胞和Tc细胞(CD8 /CD28 、CD8 /CD28-)的百分率。④TCRVβ24个亚家族的表达。结果:所有受试对象均进入TCRVβ24个亚家族检测结果分析,74例SARS患者及健康对照者10名均进入其余检测结果分析。①T细胞亚群的检测结果:CD4 细胞的百分率均数低于参考值[(33.33±6.64)%,(43±9)%,P<0.01],CD8 细胞的百分率高于参考值[(34.07±6.40)%,(30±9)%,P<0.01]。②活化的T、B细胞表达检测:表达HLA-DR的T、B细胞增加,而表达CD25的T细胞减少。有53例CD25 细胞的百分率低于正常参考值,有64例CD3 /CD25 T细胞的百分率低于正常参考值。只有CD3 /HLA-DR 和CD3-/HLA-DR 细胞的百分率高于正常参考值,其中表达CD3 /HLA-DR 的T细胞增加36例,表达CD3-/HLA-DR 的T细胞增加30例。③Ts细胞和Tc细胞的百分率:Ts细胞(CD8 /CD28-)的百分率较参考值增高[(28.75±7.31)%,(15.99±5.1)%,P<0.01];Tc细胞(CD8 /CD28 )的百分率则低于参考值[(5.99±3.60)%,(13.2±4.1)%,P<0.01]。其中有39例Tc细胞的百分率降低,有48例Ts细胞的百分率升高,CD4 与CD8 T细胞的比值均在正常参考值范围内。④TCRVβ24个亚家族表达:康复期SARS患者TCRVβ24个亚家族表达中,TCRVβ14的表达最高,TCRVβ5.3、和23表达次之,出现TCRVβ24个亚家族表达的不同。正常对照组中只有TCRVβ14表达最高,与SARS患者的结果相一致,但TCRVβ24个亚家族的分布格局不同。两组进行比较,Vβ1、Vβ5.2、Vβ5.3、Vβ7.2、Vβ9、Vβ11、Vβ13.1、Vβ13.2、Vβ17、Vβ18、Vβ22和Vβ23的表达差异显著,康复期SARS患者组均高于正常对照组(P<0.05-0.01)。结论:康复期SARS患者CD8 CD28-T细胞数的升高可导致CD8 T细胞数升高;而Ts细胞数的增加,因其分泌的抑制因子增多,从而造成CD3 和CD4 T细胞数降低。SARS患者康复期TCRVβ24个亚家族在T细胞上的表达不同。CD3 /HLA-DR 和CD3-/HLA-DR T细胞数的升高,可能与T、B细胞的活化较晚有关。     

芍药甘草汤及其拆方对H2O2诱导损伤小肠上皮细胞的保护作用

目的:研究芍药甘草汤及其拆方对H2O2诱导损伤大鼠小肠上皮细胞的保护作用。方法:实验设空白对照组,H2O2模型组,白芍(Paeoniae Radix,PR)组,甘草(Licorice,L)组,白芍甘草不同比例组。药物组在药物作用24 h后,与模型组一起加入200μmol.L-1的H2O2作用2 h,空白对照组正常培养,用MTT方法检测细胞活性,Annexin V/PI双染检测细胞凋亡。RT-qPCR检测Caspase-3和Bax mRNA表达。结果:与空白对照组比较,在H2O2损伤后,模型组细胞MTT检测吸光度(A)明显降低,存活细胞明显减少,凋亡增高,Caspase-3表达明显增高,Bax mRNA无明显变化;与H2O2模型组比较,PR 200μg.mL-1,PR 100μg.mL-1,L 100μg.mL-1,L50μg.mL-1,PR 200μg.mL-1/L100μg.mL-1,PR 100μg.mL-1,100μg.mL-1,PR100μg.mL-1,50 mg.L-1组A明显增高,细胞凋亡明显减轻,Caspase-3表达明显降低。结论:白芍,甘草单用,以及白芍与甘草配伍均对H2O2诱导损伤的小肠上皮细胞有保护作用,其机制可能与抑制Caspase-3 mRNA的表达相关。     

透析病人血液透析期间的护理

屎毒症病人因为长期不断透析,加上透析的不良反应及并发症的产生.使尿毒症病人很容易产生心理问题及不合作行为.血液透析护士应做好病人的心理护理,指导病人透析期间合理饮食和用药.积极观察血压及病情变化,做好内痿护理,从而使病人身心愉快,正确认识疾病,树立战胜疾病的信心,提高病人生活质量,从而提高生存率.     

龟板提取物诱导神经干细胞向神经元分化过程中相关microRNA表达变化

【目的】观察龟板提取物诱导神经干细胞（neural stem cells, NSCs）向神经元细胞定向分化过程中相关microRNA表达的变化。【方法】分离培养孕14 d SD胎鼠原代神经干细胞,经免疫荧光染色鉴定神经干细胞的特异抗原及其多向分化能力。神经干细胞随机设空白对照组、龟板提取物低浓度组（3μg/mL）、龟板提取物高浓度组（30μg/mL）。诱导分化7 d,提取各组细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测不同组别miR-124和miR-9的变化。【结果】与空白对照组比较,龟板提取物低浓度组miR-124和miR-9表达均无显著变化,龟板提取物高浓度组均显著升高（P<0．05）。【结论】龟板提取物可能通过调控miR-124、 miR-9表达在NSCs向神经元细胞定向分化过程中起重要作用。     

腹腔镜胆囊切除术患者抑酸药使用情况调查

目的:调查腹腔镜下胆囊切除术(LC)患者预防应激性溃疡(SU)用药情况,为临床合理应用抑酸药提供参考。方法:采用自行设计的调查表,内容包括基本情况、用药情况、临床检查资料、SU高危因素、用药前后有无消化道出血征象等,对2014年4月行LC患者281例应用抑酸药情况进行统计分析。结果:本组281例中,应用抑酸药预防SU 208例,占74.0%。其中有风险因素用药36例,占17.3%;无风险因素用药172例,占82.7%。均采取静脉给药。结论:LC患者使用抑酸药预防SU在适应证、用法用量等方面存在不合理现象。     

宫颈癌细胞系中RASSF2A基因启动子区甲基化状态的研究

目的拟通过检测4株不同宫颈癌细胞系HeLa、CaSki、SiHa和C33A中RASSF2A基因启动子区甲基化水平,以及分析去甲基化前后RASSF2A基因mRNA和蛋白表达水平、甲基化状态及细胞生物活性的变化,探讨宫颈癌发生的可能机制及治疗对策。方法采用实时定量聚合酶链反应方法检测去甲基化药物5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-dC）作用前后RASSF2A基因的表达;甲基化特异性PCR（MSP）法检测4株宫颈癌细胞系中RASSF2A启动子区甲基化状态;免疫细胞化学方法检测RASSF2A基因表达变化,并用MTT法和流式细胞术观察细胞生物活性的变化。结果宫颈癌细胞系HeLa和SiHa表现为完全甲基化状态,细胞系CaSki和C33A表现为部分甲基化状态。5-aza-dC可使宫颈癌细胞系部分去甲基化,并使RASSF2A基因在宫颈癌细胞中mRNA和蛋白水平表达均显著升高。通过对宫颈癌细胞系HeLa的生物学行为检测发现,通过5-aza-dC的诱导作用,其增殖能力和抗凋亡能力明显下降。结论甲基化是导致宫颈癌细胞中RASSF2A基因表达缺失或降低的重要原因之一。去甲基化药物5-aza-dC能够逆转宫颈癌细胞系RASSF2A基因启动子异常甲基化水平,提高RASSF2A基因的mRNA和蛋白表达水平,提示RASSF2A基因的甲基化水平可以作为评估去甲基化干预是否有效的分子学标志物,为宫颈癌的临床治疗提供新的分子靶点。     

乳腺增生丸质量标准研究

目的对乳腺增生丸的质量标准进行研究。方法采用薄层色谱法同时鉴别乳腺增生丸中鸡血藤、当归、蒲公英3味药材。采用HPLC法三波长同时测定乳腺增生丸中绿原酸、咖啡酸、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸和丹酚酸B的含量。色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(含0.1%磷酸)为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min;检测波长:绿原酸、咖啡酸、阿魏酸为320 nm,芍药苷、芍药内酯苷为230 nm,丹酚酸B为280 nm;柱温35℃;进样量20μL。结果薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。绿原酸、咖啡酸、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、丹酚酸B分别在10.0⁷0.0、2070.0、20¹40、55140、55³85、42385、42²94、10.0294、10.0⁷5.0、25075.0、250¹ 750μg/mL范围内呈良好的线性关系,平均回收率、RSD分别为100.5%、5.9%,100.2%、3.8%,101.2%、1.4%,99.9%、5.1%,100.6%、1.9%,99.8%、3.7%。结论方法准确可靠、重现性好,能有效控制乳腺增生丸的药品质量,为完善和提高乳腺增生丸质量标准提供了依据。