中医甲印正常值研究

中医甲印正常值研究杨瑞合刘风星王书云郭运强（河北医科大学四院０５００１１）左连富（河北省肿瘤研究所０５００１１）中医甲印古今研究甚少，笔者随机对１４５０名健康人甲印指数、长度进行了调查，力求找到一个具有统计学内涵的甲印正常值服务于临床，现报告如下。１...     

JAK2抑制剂对食管癌细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响

目的 研究食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及COX-2表达与信号转导子和激活子3（STAT3）信号传导通路的关系，明确以JAK2/STAT3为靶向的信号转导在Eca-109细胞中的分子调控机制。方法 将JAK2抑制剂AG490作用于Eca-109细胞，用MTT法检测细胞增殖；流式细胞仪、DNA琼脂糖电泳法及透射电子显微镜检测细胞凋亡；Western blot法检测细胞中JAK2、p-JAK2、p-Stat3及COX-2的蛋白表达变化；RT-PCR 检测COX-2 mRNA的变化。结果 AG490呈时间、剂量依赖性的抑制Eca-109细胞增殖并诱导凋亡，抑制JAK2/STAT3通路蛋白的表达，呈浓度依赖性地下调p-JAK2及p-Stat3蛋白的表达（P <0.05），并下调COX-2 mRNA及蛋白的表达（P <0.05）。结论 JAK2/STAT3信号传导通路调控AG490对Eca-109细胞作用的细胞内信号传导机制，最终通过下调COX-2表达影响Eca-109细胞的增殖并诱导凋亡。     

青蒿琥酯抑制人食管癌Eca-109细胞系的CDC25A表达

目的观察青蒿琥酯（artesunate，Art）对人食管癌Eca-109细胞系的抑瘤作用，并进一步探讨ATt诱导肿瘤细胞周期阻滞与CDC25A、TGF-β表达的关系。方法体外培养人食管癌Eca-109细胞系及正常人外周血单个核细胞（hPBMC），利用MTT法测定细胞增殖；采用流式细胞术（FCM）测定细胞周期；应用RT．PCR方法检测CDC25AmRNA表达，应用Western blot方法检测蛋白表达。结果Art能显著抑制Eca-109细胞的增殖，ICS0为（68．80±0．76）μmol／L，而对hPBMC的增殖则没有明显抑制作用。低浓度Art可将细胞阻滞于G0／G1期，S期细胞显著减少，当浓度达到100μmol／L时，细胞阻滞于G2／M期。Art可显著抑制Eca-109细胞CDC25AmRNA及蛋白表达，同时显著上调TGF-β的蛋白表达水平。结论Art可抑制肿瘤细胞生长，上调TGF-β表达，抑制CDC25A表达。     

流式细胞术测定COX-2、iNOS基因蛋白在食管癌上的表达及意义

 目的　探讨环氧化酶 2 (COX 2 ) ,Ⅱ型一氧化氮合酶 (iNOS)基因蛋白在食管癌上的表达以及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法　采用流式细胞术定量检测 6 5例食管鳞状细胞癌上COX 2、iNOS的蛋白表达量 (用荧光指数FI表示 )。结果　COX 2、iNOS在低分化型 (G3)鳞癌上的表达量明显高于分化型 (G1、G2 )鳞癌 (其P值分别为 0 .0 0 0 1、0 .0 385 ) ;二者之间呈明显正相关。这两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。结论　COX 2、iNOS的表达强弱与食管癌的分化密切相关 ;COX 2与i NOS在促食管癌的发生发展中有互相协同作用     

卵巢癌细胞DNA倍体、p21及p53基因表达产物定量分析

目的　探讨卵巢癌DNA倍体、p2 1及 p5 3基因定量表达情况及其临床意义。 方法　应用流式细胞术 (FCM )和荧光免疫技术 ,对 3 9例卵巢癌组织的卵巢癌细胞和 9例正常卵巢组织的卵巢细胞的染色体倍体、p2 1基因和 p5 3基因表达产物进行定量分析。结果　在卵巢癌组织中DNA的异倍体率、p2 1、p5 3基因蛋白产物的阳性表达率均明显高于对照组 ,两者比较均有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　应用FCM定量测定卵巢癌细胞中的DNA倍体、p2 1及 p5 3基因表达产物 ,在临床上具有重要的参考价值     

Cyclin E、CDK2和p21WAF1在食管上皮癌变过程中的表达及意义

目的探讨食管上皮癌变过程中细胞周期调控因子cyclin E、CDK2和p21WAF1的表达状况及其意义.方法应用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织、31例非典型增生组织和17例正常食管粘膜中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA表达.应用半定量RT-PCR和Western blot检测22例新鲜食管癌及相应癌旁组织的mRNA和蛋白表达.结果从食管正常粘膜、非典型增生组织到癌组织,cyclin E和CDK2蛋白和mRNA阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).食管癌组织中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA高表达,与癌旁组织或切缘正常食管粘膜有显著性差异(P＜0.01).cyclin E、CDK2和p21WAF1基因表达显著正相关(P＜0.01或P＜0.05).结论食管上皮癌变过程中,细胞周期相关基因cyclin E和CDK2表达逐渐增强.cyclin E基因表达异常是食管癌变过程中的早期事件.p21WAF1基因在食管癌中高表达,可能与细胞周期调控的反馈机制有关.     

石蜡包埋肿瘤的流式细胞分析:对诊断病理学的意义

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)DNA 分析,对于判定人类各类型肿瘤的预后和治疗反应具有重要价值。由于各种原因,FCM 在实性肿瘤研究方面尚未得到广泛应用。外科获得的新鲜肿瘤组织标本进行流式分析是不方便的,常常也是不可能的。大多数的肿瘤标本是小的,直到包埋的肿瘤组织满足后或抛弃不要时才有希望作 FCM 分析。许多肿瘤又是相当罕见的,期望得到有价值的流式分析新鲜肿瘤组织资料会花费多年的时间。当流式分     

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞生长的影响及其可能机制

目的:探讨尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞生长和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法检测尼美舒利对Eca-109细胞体外生长的抑制作用;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,琼脂糖凝胶电泳法进一步观察细胞凋亡;RT-PCR法检测COX-2、PPARγmRNA表达变化,Western blot检测PPARγ蛋白表达变化。结果:尼美舒利(50~400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长作用增强,呈剂量-时间效应关系;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,凋亡细胞增多并出现典型的凋亡细胞DNA ladder。此外,尼美舒利可下调COX-2表达并上调PPARγ表达。结论:尼美舒利能抑制Eca-109细胞的生长,其机制可能是通过抑制Eca-109细胞增殖、诱导细胞周期G0/G1期阻滞、细胞凋亡、下调COX-2表达、上调PPARγ表达而实现的。     

食管上皮癌变过程中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子FAS、FASL、FADD和caspase-8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法用免疫组化SP法检测食管黏膜中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达;原位杂交法检测食管黏膜中FADDmRNA和caspase-8mRNA的表达。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FAS蛋白表达率呈逐渐下降趋势,FASL蛋白表达率呈逐渐上升趋势,食管癌与正常组织之间差异明显(P<0·05)。高、中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌(P<0·05)。从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FADD和caspase-8蛋白及RNA阳性表达率呈逐渐下降趋势,食管癌与正常黏膜组织之间差异明显(P<0·01);caspase-8蛋白和mRNA在高、中分化鳞癌中的表达率高于低分化鳞癌(P<0·05)。结论FAS与FASL的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关。FADD与caspase-8基因表达异常在食管癌的发生、发展中可能起着重要作用。