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人血管内皮细胞生长因子基因克隆、表达与纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF121)基因在pET-24a(+)中的表达,获得高效表达、具有生物学活性的rhVEGF121。方法提取人原髓白血病细胞(HL60)总RNA,RT-PCR扩增hVEGF121基因,经DNA序列分析后,克隆于高效原核表达载体pET-24a(+),并转化到大肠杆菌B121(DE3)中,经IPTG诱导表达,超滤复性,DEAESephamseFastFlow阴离子交换和SephacryS-100分子筛色谱纯化后,以HUVEC测定其生物学活性。结果SDS-PAGE结果显示,目的蛋白质以包涵体形式存在,表达量达菌体总蛋白质的20%,纯化后rhVEGF121纯度达95%以上,生物学活性检测证实,具有刺激HUVEC增殖的功能。结论在原核系统中实现了hVEGF121的高效表达。 相似文献
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重组人血管内皮细胞生长因子工程菌高密度发酵工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立人血管内皮细胞生长因子(BL21/pET-24a/hVEGF121)工程菌的高密度发酵工艺.方法采用发酵罐发酵,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如培养基、诱导时间及补料进行优化.结果采用M9复合培养基、活化至对数生长期时诱导4 h以及以甘油为碳源连续流加补料的条件发酵,可使菌体量提高至68 g/L,rhVEGF121的表达量达菌体蛋白总量的23%.结论该发酵工艺提高了工程菌的产量和rhVEGF121的表达水平. 相似文献
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山荷减肥颗粒配合有氧运动疗法治疗儿童单纯性肥胖症的临床研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:观察山荷减肥颗粒配合有氧运动疗法治疗儿童单纯性肥胖症的临床疗效及对血脂、瘦素(Leptin)水平的影响。方法:36例单纯性肥胖症患儿均口服山荷减肥颗粒(由山楂、荷叶、泽泻、决明子等组成),同时配合有氧运动疗法。1月为1疗程,共治疗3疗程。主要观察临床疗效及血脂各项指标和瘦素水平的变化。结果:显效21例,有效10例,无效5例,总有效率为86.1%。治疗后肥胖患儿体重指数(BMI)从治疗前(26.06±5.64)降至治疗后(19.88±5.01),治疗前后比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。治疗后除HDL-C外,血脂其他指标均有明显改善,与治疗前比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。 leptin水平治疗前为(37.34±6.69)ng/mL,治疗后为(18.89±10.62)ng/mL,治疗前后比较,差异有非常显著性意义(P< 0.01)。结论:山荷减肥颗粒配合有氧运动疗法治疗儿童单纯性肥胖症疗效显著。 相似文献
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目的:研究骨碎补总黄酮(AFFDR)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导的急性肾衰竭大鼠肾组织细胞间黏附因子-1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法:用LPS(30mg/kg)腹腔注射建立急性肾衰竭大鼠模型,分模型组(LPS组)、骨碎补总黄酮治疗组(LPS+AFFDR组)、正常对照组(Control组)和骨碎补对照组(AFFDR组)。实验第7天测定各组大鼠血清肌酐(Scr)的含量,观察肾脏的超微结构和ED-1阳性巨噬细胞的浸润,并用半定量RT-PCR方法检测AFFDR对肾组织ICAM-1 mRNA表达的影响。结果:LPS引起大鼠Scr明显升高,肾脏近曲小管出现明显病理改变。AFFDR有效降低LPS攻击大鼠Scr的含量,明显减轻近曲小管的损伤。LPS组肾组织ED-1阳性巨噬细胞浸润和ICAM-1 mRNA的表达明显高于对照组,而LPS+AFFDR组肾组织ED-1阳性巨噬细胞的浸润和ICAM-1 mRNA的表达明显低于LPS组。结论:AFFDR防治内毒性急性肾衰竭的作用机制可能与其抑制肾组织ED-1阳性巨噬细胞浸润和ICAM-1的表达有关。 相似文献
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激素性股骨头坏死模型的建立及病理和影像学特征 总被引:5,自引:0,他引:5
目的建立兔激素性股骨头坏死动物模型,观察激素性股骨头坏死的病理及影像学特征。方法将20只健康新西兰兔随机分成两组,每组10只。A组:模型组,注射马血清及醋酸泼尼松龙造模;B组:正常对照组。采用X片及CT观察股骨头形态的变化,处死动物,标本进行常规组织病理学检查,并进行动脉墨汁灌注观察。结果X片及CT结果显示:造模组两侧股骨头密度不均一,关节面模糊;墨汁灌注血管造影显示股骨头血管显著减少;病理组织学观察结果显示:骨小梁骨细胞陷窝空疏,骨细胞核固缩,部分血管栓塞,骨髓腔内造血组织明显减少。结论马血清、激素诱导的激素性股骨头坏死动物模型病理变化、影像学改变符合临床典型股骨头坏死的特征,为进一步研究股骨头坏死发病机制及治疗方法提供基础。 相似文献
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CpG-ODN是人工合成的含有CpG基序的ODNs,能够模拟细菌DNA的免疫刺激活性,通过细胞内定位的Toll样受体9活化抗原递呈细胞(APC),如树突状细胞(DC)和B细胞,分泌大量Th1型细胞因子诱导产生Th1型免疫应答。CpG—ODN不仅增强T淋巴细胞的活化,在特定条件下还可以抑制T淋巴细胞功能。在抗感染、抗肿瘤疾病中,CpG—ODN作为新型的免疫佐剂得到了广泛的应用,但其安全性问题应引起足够的重视。 相似文献
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阐述加强学科建设对地方高校发展的重要意义,以及新形势下广东药学院应准确定位、跟进形势,并采取多种措施服务地方经济发展,增强办学特色。 相似文献
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MAGE-3多肽诱导特异性T细胞对人肝癌细胞株的杀伤作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察MAGE-3多肽特异性T细胞的诱导和对人肝癌细胞株HepG 2细胞的作用。方法合成MAGE-3多肽271~279肽段,合成肽诱导培养的淋巴细胞与人肝癌细胞株HepG 2细胞共同混合培养,观察T细胞对肿瘤细胞的结合;MAGE-3多肽诱导肝癌患者外周淋巴细胞,四聚体方法检验MAGE-3多肽特异性T细胞的诱导。结果MAGE-3多肽特异性淋巴细胞与对人肝癌细胞株HepG 2细胞有明显的聚集、粘附和可能的攻击作用;肝癌患者外周淋巴细胞中特异性T细胞频数提高。结论MAGE-3多肽可以诱导肿瘤患者特异性T细胞,诱导的特异性T细胞对人肝癌细胞株HepG 2细胞可能有杀伤作用,显示MAGE-3多肽可作为肝癌生物治疗特异性表位肽候选多肽。 相似文献
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目的:研究含不同佐剂的SARS灭活疫苗免疫小鼠后,小鼠的早期细胞免疫和体液免疫反应。方法:灭活的SAPS冠状病毒F69株分别与弗氏佐剂、氢氧化铝、CpG佐剂配伍,制备灭活疫苗。接种6周龄SPF’级BALB/C小鼠。定时采血,分析小鼠外周血中CD4^ 、CD8^ T细胞亚群动态变化,同时测定鼠血清中特异性IgG抗体及抗体的病毒中和活性。结果:由3种佐剂制备的SARS灭活疫苗免疫小鼠后,CD4^ 、CD8^ T细胞百分比升高或无明显改变,CD4/CD8比值无显著性改变。其中,弗氏佐剂疫苗免疫小鼠的CD4^ T细胞百分比升高较明显,且在一段时间内,维持在一个较高的水平;铝佐剂疫苗免疫小鼠后,未观察到明显T细胞亚群改变;而CoG佐剂疫苗免疫小鼠的CD8^ T细胞百分比改变较其它佐剂疫苗改变更明显。与此相异的是,3种疫苗均可诱导小鼠产生较高滴度特异性IgG抗体,并且所产生的抗体具有中和活性。在初免后第34天,3种佐剂组的IgG抗体滴度分别为1:12800、1:3200和1:1600,中和效价分别为1:2560、1:960和1:320。结论:SARS灭活疫苗接种小鼠后,可诱导较强的体液免疫反应,同时轻度上调CD4^ 、CD8^ T细胞活性,程度因佐剂而异。 相似文献