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目的:采用人工偶联方法构建多西环素完全抗原,制备多克隆抗体。方法:分别采用直接偶联法、甲醛一步法、重氮法+混合酸酐法和重氮法+碳二亚胺法等4种方法将多西环素与牛血清白蛋白(bull serum albumin,BSA)或鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联,构建人工完全抗原。选择最好偶联效果制备的抗原免疫BALB/c小鼠,通过直接ELISA法检测多克隆抗体效价,竞争抑制ELISA法分析其灵敏性及特异性。结果:重氮法+碳二亚胺法偶联的多西环素人工完全抗原效果最好,其与BSA的偶联比为8.37∶1,与OVA的偶联比为4.92∶1。采用该方法偶联的抗原免疫小鼠获得的多克隆抗体效价在1∶8 000以上;该抗体对多西环素的半数抑制浓度(IC50)为98.89~120.32μg/L,与其他四环素类药物的交叉反应性较低。结论:重氮法+碳二亚胺法的偶联效率最高,获得的多西环素多克隆抗体效价较高,特异性和灵敏度均较理想。 相似文献
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夏圣 《医学检验进修杂志》1996,3(3):113-114
白细胞介素15(IL-15)是新发现并克隆的细胞因子,已在酵母菌中表达成功。IL-15含114个氨基酸,由非淋巴细胞分泌。尽管IL-15与IL-2氨基酸序列上无同源性,但二者蛋白三级结构和功能相似。IL-15能引起PHA活化的T细胞、B细胞、NK细胞及CTLL细胞的增殖,也能诱导LAK细胞。IL-15通过与IL-2R的β、γ亚单位及另一未知亚单位组成的IL-15R结合而引起靶细胞被激活,实现其免疫 相似文献
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B7分子是提供协同刺激信号的重要分子,包括B7-1(CD80)、B7-2(CD86),其相应配体为CD28、CTLA-4。B7-1分子与CD28结合后能诱导协同刺激信号的产生,癌性胸水来源的淋巴细胞体外用重组人IL-2(rhIL-2)激活后,对肿瘤细胞也具有较强的细胞毒性;也被认为是一类TIL。本文观察了B7分子在TIL细胞的细胞毒中的作用,发现B7-1基因转化MDA-453肿瘤细胞后,能增强TIL细胞对此转化肿瘤细胞的细胞毒活性。 相似文献
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目的 :探讨CD3AK细胞在基因治疗中的应用 ,并对逆转录病毒载体转导CD3AK细胞IL 2基因的方法进行研究。方法 :利用逆转录病毒载体PLIL 2SN向人CD3AK细胞中导入IL 2基因。结果 :从转导细胞中RT PCR扩增出 347bpNeoR 基因特异性片段 ,并测出培养上清液中IL 2浓度为 3 .2 76 μg·L-1。结论 :转导的IL 2基因得到表达 ,转导成功。这有助于进一步研究转导后淋巴细胞的功能 ,以开展基因免疫治疗的研究 相似文献
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血管内皮细胞生长因子的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
夏圣 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》1997,18(4):161-163
血管内皮细胞生长因子又称血管通透因子,是近年来发现的一种促血管生长因子。它地下沉生理性血管生成和异常病理性血管形成都有着重要的调节作用本文就近年来对此因子的研究进展作一综述。 相似文献
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目的 检测胃癌患者外周血中单个核细胞(PBMC)中转录因子RORγt和细胞因子IL-17的表达水平及血浆IL-17的表达,探讨Th17细胞特异性RORγt及IL-17的变化在胃癌临床监测中的意义.方法 收集43例胃癌患者外周血标本,40例健康志愿者标本;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-17的表达;采用直线相关检验方法对健康人群和胃癌患者转录因子RORγt和IL-17表达水平进行相关性分析.结果 胃癌患者外周血PBMC的RORγt、IL-17 mRNA表达水平均明显高于健康对照组(P<0.05),且二者呈现明显正相关(P<0.01);胃癌转移组与未转移组相比,RORγt和IL-17 mRNA明显升高(P<0.05),此外,血浆IL-17的表达也明显升高(P<0.01).结论胃癌患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA表达水平及血浆IL-17明显升高,提示Th17细胞与胃癌的发生发展可能存在着一定的关系. 相似文献
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建立了脂质血管生长因子(LAF)的乳化方法,并研究了乳化的脂质血管生长因子对小鼠脾细胞及ConA诱导的IL-2水平的影响,结果显示:LAF能明显抑制小鼠脾细胞的增殖用降低IL-2的产生水平,而对照的皮下脂肪抽提物则无此效应,同时发现,乳化过程中加入的Tween-80有一定的细胞毒性。 相似文献
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目的:探索融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP纯化以及复性的条件,以提高其复性效率,为后续融合蛋白生物学功能的研究做准备。方法:表达、提取并纯化包涵体形式的融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP,分别用稀释复性、透析复性、柱上复性的方法,对融合蛋白进行复性,分析不同方法的特点及包涵体复性率,采用流式细胞术检测融合蛋白的穿膜活性。结果:3种复性方法得到的融合蛋白复性率依次为:柱上复性得率最高,其次是透析复性,稀释复性得率最低。柱上复性后蛋白的穿膜效率最高,相对较低的是稀释复性,而未复性的融合蛋白穿膜效率极低。结论:3种复性方法均能对PTD穿膜蛋白复性,但以柱上复性最佳。 相似文献
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