酶联免疫吸附试验检测肾综合征出血热病毒抗原最佳条件探讨

本试验表明:以McAb为包被抗体,HRP-SPA为酶标结合物可以将非特异性反应降低接近于零,以患者血清为第二抗体可提变试验敏感性,以OPD或TMB为底物,每步作用60分钟或40分钟、每孔加样0.1ml或0.05ml,结果无明显区别。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特异性研究

用陈株HFRSV免疫获得5株MbAb。B_9株具有血凝抑制和体内保护活性,F_3、H_(11)具有中和活性及体内保护活性。B_9株和大部分野鼠型HFRSV反应,与大部分家鼠型HFRSV不反应,F_3、H_7株与检测的24株HFRSV都反应。     

病损宫颈标本单纯疱疹病毒抗原检测结果的分析

本文以抗单纯疱疹病毒(HSV)型共同性单克隆抗体力捕捉抗体,用ELISA双抗体夹心四步法检测200份宫颈分泌物标本中HSV抗原。其中42(21％)份标本获得阳性结果。宫颈癌、宫颈炎、宫颈糜烂与无病损宫颈标本的阳性检出率有显著性差异;不同程度宫颈炎、宫颈糜烂组之间,不同年龄组宫颈炎、宫颈糜烂标本之间阳性检出率无统计学差异。200份标本同时进行病毒分离作为对照,24份标本因污染未获得结果,其中28份(16％)标本获得阳性结果,二种方法的符合率为93％。     

猪链球菌引起人中毒性休克综合征和脑膜脑炎的流行病学调查及病原学研究

目的 本研究拟本明1998年华东地区一种与病死猪有接触史的人的急性传染病病原体的生物学特征与疾病流行的关系。方法 流行病学调查,并对病死猪及死亡患者进行病理检查,分离病原及其实验研究。结果 该病具有起病急、病情重、病程短、病死率高等特点。临床及病理表现为：起病多似感冒有高热、四肢疼痛、有时有呕吐、腹泻等,迅速发展为肌炎、筋膜炎、DIC、多脏器功能衰竭、休克,多于2～3d内死亡。25例患者中,临床表现为中毒性休克综合征的16例,链球菌性脑膜脑炎综合征的9例,两者的病死率分别为81.25%和11.11%。从猪和病人标本分离的病原体,其形态、生染色性、生物学特征均一致。结论 患者血和病猪脏器中分离的病原菌鉴定结果证明两者均为链球菌。     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。     

恙螨体内汉坦病毒核酸的基因芯片检测

目的 建立快速、灵敏、特异的汉坦病毒基因芯片诊断方法。方法 根据发表的汉坦病毒属(HV)76-118株和R22株S基因核苷酸序列，设计引物和探针，制备寡核苷酸芯片。用CV3标记核苷和引物，运用不对称PCR技术制备单链荧光标记核苷酸片段，并与芯片上的寡核苷酸探针杂交，荧光扫描仪检测并分析信号。结果 研究制备的基因芯片能够检测汉坦病毒HTN型和SEO型病毒核酸的特异性荧光信号。结论 HV的基因芯片检测具有特异、灵敏、快速的优点。基因芯片的制备和检测技术的建立，可为肾综合征出血热等传染病的诊断和预防提供理想的方法。     

嵌合式聚合酶链反应检测恙虫病立克次体DNA

嵌合式聚合酶链反应检测恙虫病立克次体ＤＮＡ郭恒彬，吴光华，唐家琪，李先富，于明明，张云，潘秀珍，李越希目前，国内实验室诊断恙虫病的主要方法是检测患者血清中抗恙虫病立克次体（Ｒｔ）的抗体和患者全血接种小白鼠分离Ｒｔ，这些方法均不能作出早期诊断：国外已采...     

应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法：采用protein-A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基，对噬菌体展示的随机12肽文库进行生物亲和淘洗，夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性，并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：通过3轮生物淘洗，能被抗体捕获的噬菌体克隆为91．7％（11／12）；ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合；序列分析表明7个阳性克隆氨基酸序列相同，均为－MHGPTKNQMWHT，同源性分析显示该序列与HTNV／SEOV M蛋白G2区第750－759位氨基酸有较高的同源性，结论：获得了具有良好结合活性的模拟表位肽，为基于表位水平的HFRSV（肾病综合征出血热病毒）特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据。     

基因芯片技术检测恙虫病东方体DNA的方法建立

目的　研制用于东方体检测的基因芯片 ,建立快速、灵敏、特异的恙虫病诊断方法。方法　根据东方体 5 6kD外膜蛋白基因序列 ,设计群特异性引物及探针 ,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记的引物 ,利用不对称PCR技术扩增DNA片段 ,将扩增的DNA片段与芯片上的探针杂交 ,用荧光扫描仪检测并分析信号。结果　建立的基因芯片能够检测恙虫病东方体标准株DNA的特异性荧光信号。具有特异、灵敏、快速的优点。结论　成功制备的基因芯片有望应用于恙虫病东方体多种样本的检测 ,为恙虫病提供最为理想的诊断方法。     

核糖体展示小分子抗体的研究进展

核糖体展示技术是由Plückthun实验室[1]在多聚核糖体展示技术[2]的基础上改进而来的一种利用功能性蛋白相互作用进行筛选的新技术,它将正确折叠的蛋白及其mRNA同时结合在核糖体上,形成mRNA-核糖体-蛋白质三聚体,使目的蛋白的基因型和表型联系起来,可用于抗体及蛋白质文库选择、蛋白质体外改造等。运用此技术已成功筛选到一些与靶分子特异结合的高亲和力蛋白质,包括抗体、多肽、酶等,是蛋白质筛选的重要工具。1核糖体展示技术的基本原理及特点核糖体展示技术通过聚合酶链反应(PCR)扩增DNA文库,同时引入T7启动子、核糖体结合位点及茎-…