维生素C对人类免疫缺陷病毒灭活作用的研究

目的验证维生素C对人类免疫缺陷病毒(HIV)的灭活作用,为生物制品提供一种安全可行的HIV灭活的方法。方法通过测半数组织培养感染剂量(TCID50),检测不同浓度维生素C在不同温度和作用时间下对HIV的灭活作用,并对有效剂量组进行MT4细胞毒性试验。结果500μg/ml维生素C在无血清状态下有灭活HIV作用,而此剂量对MT4细胞有不可逆转的毒性作用。结论维生素C不适宜用于血及血制品的HIV灭活。     

灭活前后HIV-1生物学性状改变的研究

S/D法及低 p H法是常用的血制品灭活病毒的有效方法。在评价 S/D法及低 p H法灭活 HIV试验中 ,发现不病变样品经盲目传代可以传出病变 ,说明 HIV在灭活因素作用下发生变异。 HIV具有高度的变异性 ,不同地区不同机体 ,同一机体不同病程 ,甚至同一机体一次取样均可分离到不同基因型不同生物学性状的 HIV株 [1 ]。我们曾在 MT4细胞长期自然传代培养 HIV,分析 HIV包膜基因变异及生物学性状改变 ,获得体外传代 HIV包膜基因变异不显著 ;病毒感染毒力及病毒产量上升 ;亚型不变 ,生物学性状相对稳定的结论。为了进一步了解灭活作用下 H…     

抗SARS冠状病毒中和活性单克隆抗体的筛选及其结合位点分析

目的 建立能分泌具有中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体（McAb）细胞株，制备有中和活性的抗SARS-CoV MeAb，用于SARS-CoV感染的早期特异诊断和进行SARS-CoV结构蛋白的功能研究。方法 用灭活纯化sARS-c0V（BJ01株）免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合技术，建立能稳定分泌SAILS病毒MeAb的杂交瘤细胞系，然后用中和试验进一步筛选分泌具有中和活性的抗SARS-CoV MeAb细胞株。利用SARS-CoV的S和N蛋白的不同长度肽段通过EusA鉴定McAb的特异结合区域，分析S和N蛋白不同区域诱导产生抗体的能力和特性。结果 建立了12株能稳定分泌抗SARS-CoV McAb的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光法检测抗体效价在1：320～1：20 480之间，其中6株具有较好的中和SARS-CoV的能力。具有中和活性的McAb中，3株是针对S蛋白的，2株是针对N蛋白的。其中抗S蛋白的中和抗体活性比抗N蛋白的中和抗体活性高，另外1株可能是针对SARS-CoV的其他结构蛋白的。进一步对6株抗S蛋白的McAb的特异抗原结合表位分析，发现其中3株结合位点在S蛋白第12～311氨基酸之间，2株在第310～535氨基酸之间，后者中和效价高于前者，另1株是针对S2蛋白的，SARS病毒的受体结合区正位于第310～535氨基酸这一区段。具有中和活性的McAb通过间接免疫荧光、ELISA、酶标免疫组化法和胶体金方法对SARS病毒进行检测，都显示出高度的特异性和良好亲和力。结论 成功制备了具中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体，并分别测定了McAb对S蛋白和N蛋白的特异抗原结合活性，初步确定了S蛋白的中和表位。为今后SARS病毒的特异诊断、结构蛋白的功能分析和重组疫苗的研制奠定了较好的基础。     

青蒿琥酯诱发大鼠骨髓红细胞微核

青蒿琥酯是新抗疟药青蒿素的水溶性衍生物。本实验通过大鼠骨髓微核试验对其遗传学毒性进行了研究。结果表明，青蒿琥酯１００－３００ｍｇ／ｋｇ单次尾静脉注射后６ｈ均诱发早期微核，并与剂量呈正相关。青蒿琥酯４８和９６ｍｇ／ｋｇ（分别相当于临床剂量的２０和４０倍）给药后６、１２、２４ｈ引起骨髓多染红细胞（ＰＣＥ）微核频率增高，ＰＣＥ／ＮＣＥ（正成红细胞）比率下降，２４ｍｇ／ｋｇ（临床剂量的１０倍）对微核率及Ｐ     

自然环境中人类免疫缺陷病毒感染活力的探索

目的 明确自然环境下人类免疫缺陷病毒（HIV）的灭活规律，防止日常生活和医疗卫生工作中接触HIV阳性体液引起的HIV感染。方法通过测TCID50，检测了HIV在水和含10％血清RPM11640培养液稀释后，持续存在于4℃、室温（20℃～26℃）、37℃不同时间的感染活力，并对不病变样品盲目传三代以明确其感染性。结果〈4℃无论在水或细胞培养液中，HIV感染活力〉35d；室温及37℃下，水中HIV感染活力可维持7～14d，培养液中可维持14-21d。结论HIV在自然环境中抵抗力较强，对HIV阳性体液及其污染物应谨慎处理，防止HIV意外传播。     

青蒿琥酯诱发大鼠骨髓细胞膜系的脂质过氧化作用

用ＴＢＡ法测定了青蒿酯中毒大鼠骨髓脂质过氧化作用产物－－丙二醛含量以探求该药的造血毒性机制。结果表明，１００－３３３ｍｇ／ｋｇＳＡ引起骨髓ＭＤＡ含量与剂量呈正相关线性半高；相关系数γ＝０．９５６６；骨髓ＭＤＡ增殖时间－反应曲表明，达峰时间为１６．５ｈ；ＴＭＤＡ峰反庆消除一半需７６．５ｈ。     

复方萘酚喹对比格犬的长期毒性

目的 :观察犬连续口服复方萘酚喹的毒性剂量、损伤的靶器官、可逆性及安全剂量范围。方法 :给比格犬口服复方萘酚喹 1 7.5 ,87.5或 1 4 0mg/(kg·d) ,每天 1次 ,连服 1 4d。给药结束后 ,各组活杀 2 /3,留 1 /3继续观察2 8d。观测了临床症状和生理指标 ,血液学 8项、血生化 1 3项、尿 8项、心电图、眼底、骨髓和组织病理学。结果 :主要毒性反应见于 1 4 0mg/(kg·d)组 ,给药后 5 /6只犬出现恶心、呕吐等消化系统症状 ,部分动物出现阵发性抽搐 ,几分钟后自行缓解。该组给药后GOT ,GPT明显升高 ,心电图Q_T间期延长 ,骨髓红系受到抑制 ,组织学检查可见肝细胞损伤明显。 87.5mg/(kg·d)组各种毒性反应均较大剂量组轻 ,所有毒性反应于停药后自行恢复。 1 7.5mg/(kg·d)组未见明显毒副作用。结论 :1 4 0mg/(kg·d)为重度中毒剂量 ,87.5mg/(kg·d)为中度中毒剂量 ,1 7.5mg/(kg·d)为安全剂量。毒性靶器官是肝脏和骨髓 ,损伤是可逆的     

新分离的冠状病毒与严重急性呼吸综合征病原关系的研究

目的　确定新分离的冠状病毒与目前流行的严重急性呼吸综合征的病原关系。方法　以用细胞培养法从严重急性呼吸综合征病例标本中分离出的冠状病毒为抗原 ,通过免疫荧光染色及中和试验测定严重急性呼吸综合征患者血清中抗新分离的冠状病毒的抗体 ,分析确定新冠状病毒与严重急性呼吸综合征的病原关系。结果　在临床确诊的 1 1 3份严重急性呼吸综合征患者血清标本中 ,99份检测出有抗新冠状病毒的抗体。 1 0对双份血清检测结果显示 ,后采集的血清抗体效价均比发病初期采集的明显增高 ,最高的升高 1 2 8倍。中和试验结果证明 ,病人血清抗体能够中和新分离的冠状病毒。结论　新分离的冠状病毒与此次流行的严重急性呼吸综合征密切相关 ,是目前流行的严重急性呼吸综合征的主要病原体     

HIV感染者合并HBV、HCV、HGV感染初步调查

ＨＩＶ感染者合并ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＧＶ感染初步调查吕富双王宏霞鲍作义李敬云艾滋病病毒（ＨＩＶ）与一些肝炎病毒（ＨＢＶＨＣＶＨＧＶ）有相似的传播途径，合并感染的机会较大，而一旦出现合并感染，病毒之间以及病毒与宿主之间可能发生非常复杂的相互影响和相互作用...