金刚烷胺与利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外作用敏感性比较

目的评价金刚烷胺和利巴韦林对不同甲型流感病毒株的体外抑制作用,为临床选择抗流感病毒药物提供实验依据。方法分别接种甲型流感病毒标准实验株[H1H1（A/PR/8/34、A/FM1/47）,H3N2（A/Aichi/2/1968）]和临床分离株[H1N1（A/Guangzhou/GIRD02/2009、A/Guangzhou/GIRD166/2009）,H3N2（A/Guangzhou/GIRD18/2009、A/Guangzhou/GIRD26/2009）],于狗肾细胞（MDCK）,采用空斑试验观察金刚烷胺和利巴韦林对甲1和甲3型流感病毒不同实验株和分离株的敏感性。对测试毒株的MP基因进行序列测定和分析,了解金刚烷胺的药物敏感性。结果金刚烷胺在MDCK细胞的半数毒性浓度（TC50）为335μg/ml,对部分甲型流感病毒标准实验株[A/FM1/47（H1N1）、A/Aichi/2/1968（H3N2）]及临床分离株[A/Guangzhou/GIRD02/2009（H1N1）]有抑制作用（半数有效浓度IC50分别为14.9、20.1、16.8μg/ml）。利巴韦林的TC50为2.05mg/ml,对测试的所有毒株均有抑制作用（IC50为6.8～37μg/ml）。金刚烷胺耐药毒株均为单位点突变（第31位的丝氨酸S置换为天冬酰胺N,S31N）。结论甲型流感病毒对金刚烷胺较易出现耐药,而利巴韦林体外对金刚烷胺敏感株和耐药株均有显著的抑制作用,临床抗流感病毒治疗时可考虑应用。     

中国非小细胞肺癌患者K-Ras和EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的 探讨中国非小细胞肺癌（NSCLC）患者中K-Ras和表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况及其与临床病理特征的关系。方法 回顾性分析2011年7月至2013年8月广州医科大学附属第一医院收治的381例NSCLC患者的临床病理特征,并应用扩增突变阻滞系统（ARMS）检测其癌组织中EGFR基因18、19、20、21外显子共21个点突变和K-Ras基因12、13密码子共6个点突变,分析其突变情况及与临床病理特征的相关性。结果 21例（5.5％）存在K-Ras基因突变,其中20例12密码子,1例13密码子Asp突变;146例（38.3％）存在EGFR突变,其中4例18外显子突变（G719S）,52例19号外显子序列缺失突变,3例20外显子序列缺失突变,85例21外显子突变（81例L858R,4例L861Q）,2例双突变。男性患者K-Ras基因突变率高于女性患者,差异有统计学意义（6.8％ vs. 2.5％, P=0.018）。EGFR基因突变与性别、吸烟史、临床分期、全身转移、病理类型均有关（P＜0.05）。二分类Logistic回归分析显示,病理类型和性别与EGFR基因突变密切相关。结论 中国NSCLC患者中EGFR突变常见,该突变与腺癌有关;K-Ras基因突变率较低,多见于男性,其他相关因素尚需进一步研究。     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.     

2009年广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物耐药性分析

目的 分析2009年1-10月份广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药情况,为临床预防和治疗季节性甲型流感提供参考依据.方法 选取2009年1-10月份广州地区6家医院分离的季节性甲型流感病毒株311株,其中H1亚型159株,H3亚型152株.对病毒的毒株基质蛋白(MP)基因进行序列测定,利用数据库和软件进行生物信息分析,并测定软件随机抽取的临床分离的H1和H3病毒株(各10株)对金刚烷胺的药物敏感度,分析广州地区2009年1-10月份季节性甲型流感病毒的耐药性和基因重组情况.结果 159株H1亚型流感病毒中148株对金刚烷胺耐药(93.1%);152株H3型流感病毒均对金刚烷胺耐药(100%);除1株H1亚型流感病毒发生V27A/S31N双重位点突变外,其余均为S31N单位点突变;159株H1亚型流感病毒中MP基因B型(人类)97株,F型(欧洲/澳洲鸟类)62株;152株H3亚型病毒的MP基因均为B型.结论 广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药比例高,且H1亚型流感病毒与欧洲/澳洲鸟类流感病毒可能存在MP基因交换.

Abstract：

Objective To study the prevalence of adamantane-resistance among influenza A viruses isolated from Guangzhou between January and October in 2009, and to provide more information for clinical usage of adamantine drugs. Methods Totally 311 influenza A strains isolated from 6 hospitals in Guangzhou between January and October in 2009 were selected, and the MP gene of all 311 strains ( 159 strains of H1subtype, 152 strains of H3 subtype ) was sequenced. The susceptibility of viruses to rimantadine was assayedby biological methods in cells. Result A hundred and forty-eight strains of influenza A ( H1 ) viruses( 93. 1%, 148/159 ) were resistant to the adamantanes, and all the 152 influenza A ( H3 ) viruses were resistant to the adamantanes. An amino acid substitution S31N was found in most of the strains except 1strain with double mutation V27A/S31N. Furthermore, the M gene of influenza A ( H1 ) viruses was divided into genotype B ( human ) ( 97/159 ) and genotype F ( European and Australian birds, 62/159 ), while the M gene of influenza A ( H3 ) viruses was genotype B ( human ) ( 152/152 ). Conclusion Resistance rate of seasonal influenza A viruses isolated from Guangzhou was high. The MP gene of influenza A ( H1 ) may be replaced by a gene from European and Australian birds through a reassortment event.     

降钙素原在医院获得性肺炎和呼吸机相关性肺炎的诊断和抗感染管理中的应用价值

医院获得性肺炎(HAP)和呼吸机相关性肺炎(VAP)是我国现患率居第一位的医院感染性疾病。国内外相关指南相继进行了更新,旨在提高HAP/VAP诊断和治疗水平,改善患者的结局,但我们仍然面临诸多挑战。降钙素原(PCT)是较C反应蛋白(CRP)更特异的感染相关生物学标志物,对重症细菌感染和脓毒症具有反应快速、特异性高的优点,动态监测PCT可指导HAP/VAP的诊断及抗菌药物治疗的疗程。     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.     

广州地区2009年乙型流感病毒血凝素基因特征分析

根据抗原性和基因特异性的差异,乙型流感病毒可分为B/Victoria/2/87系(Victoria系)和B/Yamagata/16/88系(Yamagata系)[1].血凝素(HA)基因与该病毒的进化趋势相关[2],HA的抗原变异主要发生在HA1区域[3],该区域4个主要的抗原表位[120-loop(HA1 116-137)、150-loop(HA1141-150)、160-loop(HA1 162～167)和190-helix(HA1194-202)]如发生变化,往往引起变异相关病毒株进化方向的改变[4].为了解2009年乙型流感病毒进化情况,本研究分析了HA1基因特点.     

应用小瓶离心培养法分离检测2009年1-6月广州市成人流感样病例相关病毒

目的 应用高通量的小瓶离心法快速分离检测广州市成人流感样病例相关病毒,分析广州地区患有ILI的成人呼吸道病毒感染情况,评价其在临床实验室开展快速病毒培养的意义.方法 采集2009年1-6月广州市成人流感样病例患者标本652份,应用小瓶离心法(包括MDCK、HEp-2、LIE-MK_2和MRC-5 4种细胞),离心接种后,通过观察CPE、血凝(HA)、血吸附(HAD)及直接免疫荧光法(IF)等方法进行病毒分离鉴定.结果 652份成人流感样病例标本中共检出阳性161份,5种病毒病原体,病毒培养阳性率为24.69%,其中甲型流感病毒62株(62/161,38.51%),乙型流感病毒88株(88/161,54.65%),副流感病毒8株(8/161,4.96%),腺病毒2株(2/161,1.24%),呼吸道合胞病毒1株(1/161,0.62%).用小瓶离心培养法发出各种病毒培养报告的平均时间分别为:流感病毒2 d、腺病毒3 d、副流感病毒3 d.结论 (1)离心培养法具有快速、灵敏、高通量的特点,对临床实验室诊断病毒具有应用推广价值.(2)在分离的Iu病原体中,流感病毒占主导,乙型流感病毒为优势毒株,自2009年1月延续至6月,并呈逐步增多的态势,出现夏季高峰.     

广州市成人流感样疾病882例病原学及临床特征分析

目的 探讨引起广州地区成人流感样疾病(influenza like illness,ILI)的呼吸道病毒病原学分布及其临床特征.方法 2009年1-9月份采集882例成人ILI患者的鼻和(或)咽拭子,应用小瓶离心法进行病毒分离与鉴定,并对患者的临床特征进行分析.结果 (1)病原学分布:882份鼻和(或)咽拭子标本中,病毒培养阳性385份(43.7%),共检测出9种病毒,以季节性甲型流感病毒为主,共259例(67.3%),其余分别为乙型流感病毒107例(27.8%);人副流感病毒(HPIV)1～3型5例(1.3%);腺病毒、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)及肠道病毒各2例(0.5%);混合感染8例(2.1%),其中季节性甲型流感和乙型流感病毒混合感染6例,乙型流感病毒与HPIV-3混合感染1例,腺病毒与呼吸道合胞病毒(RSV)混合感染1例.2009年3-5月份以乙型流感病毒为优势毒株,6-8月份则以季节性甲型流感病毒为主;(2)临床特征:ILI患者以18～30岁人群为主(49.7%),中度发热、咽喉痛及咳嗽为主要临床症状,上呼吸道感染和肺炎的比例为88.4%(727/882)和10.7%(95/882).季节性甲型流感和乙型流感的临床症状相似,流感病毒检测阳性组的白细胞和淋巴细胞平均数均较病毒阴性组低.腺病毒、HPIV及RSV感染者年龄较低,肠道病毒与疱疹病毒感染者未出现皮疹.结论 (1)引起2009年广州地区成人ILI的病原以季节性甲型流感和乙型流感病毒为优势病毒,其他呼吸道病毒散发,病毒病原体多样化特征不明显,呈季节性流行;(2)不同病毒感染的成人ILI患者发热程度不同,伴有明显的全身和上呼吸道症状,肺炎少见.     

成果导向的PBL和CBL教学法在肺真菌病教学中的应用

肺真菌病是指由真菌感染导致的肺部疾病,其作为导致患者死亡、致残的重要并发症之一,值得早期关注并引起重视。在肺部真菌病专病教学中,为提高住培医师在呼吸内科轮科期间对肺真菌病的诊治能力,结合“提升医疗和综合诊治能力”的教学目标,通过分析学情,以“非专科医生”为主体,基于成果导向教育的理念,实施病例导向教学（case-based learning,CBL）和问题引导教学（problem-based learning,PBL）的教学策略,最后通过全面的评价指标完成教学效果评价。该方法提高了对住培医师的教学效果,值得在肺部真菌病的教学中进行探索。