中重型β地中海贫血基因类型分析

目的 了解中间型和重型β地中海贫血基因突变类型及其相关血液，生化变化。方法 应用反向点杂交法检测16种β地贫点突变基因，常规进行血细胞分析及其他地贫筛查试验。结果 27例中重型β地贫患者中10例为纯合子，17例为双重杂合子，10例纯合子中5例CD41-42纯合子，占50%，3例TATAnt-28纯合子，占30%；CD17纯合子和IVS-nt654纯合子各1例，各占10%，17例双重杂合子中5例为IVS-nt654/CD41-42占29.4%,3例为CD17/CD41-42，占17.6%;3例为TATAnt-28/CD41-42，占17.6%;2例为βE/IVS-nt654,占11.6%;CD17/TATAnt-28,IVS-nt654/CD17,IVS-nt654/CD1-1,1CD71-72/IVS-nt654各1例，各占5.9%。27例患者血红蛋白均低于90.0g/L。平均为58.8g/L；平均MCV为65.0fl。脆性均少于60%。结论 中重型β地中海贫血基因突变类型多样，组合类型不同，临床表现轻重不一，多呈中重度贫血，血液，生化均有明显改变，多需输血维持生命，故应做好产前诊断，预防其出生。     

血红蛋白电泳诊断血红蛋白H病90例临床研究

目的介绍应用血红蛋白电泳诊断血红蛋白H病(HbH病)的要点.方法应用血红蛋白电泳诊断90例血红蛋白H病.结果100%病例出现快速HbH区带,45.6%(42/90例)出现快速Hb Bart's区带,16.7%(15/90例)可见Hb CS(Hb Constant spring)区带;结论血红蛋白电泳是诊断HbH病的必备条件,而电泳结果受多因素影响,应控制好各实验条件.     

佛山地区孕期夫妇地中海贫血筛查及基因诊断

目的调查佛山地区孕期夫妇及胎儿地中海贫血（地贫）的发生率、基因突变类型及构成比。方法对以MCV和MCH进行筛查地贫阳性者,采用高效液相色谱技术（HPLC）检测血红蛋白（Hb）组分,若HbA2〉3.5%或HbF〉2.0%者采用反向点杂交技术进行β地贫的基因检测,同时对所有地贫筛查阳性及α地贫东南亚缺失型基因携带者的配偶采用GAP-PCR进行α地贫检测,对夫妻双方均为同类型地贫基因携带者的高风险胎儿进行产前基因诊断。结果在5102例标本中检出地贫基因携带者600例,地贫总发生率为11.76%。其中α地贫391例,发生率为7.66%,β地贫209例,发生率为4.10%,α地贫复合β地贫27例,发生率为0.53%。在α地贫中,东南亚缺失型（--SEA/αα）占75.19%,左、右缺失型（αα/-α4.2和αα/-α3.7）占21.22%;β地贫中,β41-42占42.11%,β654次之,占30.62%,β17为10.53%和β-28为9.09%。夫妇为同一类地贫基因型的高风险胎儿98例,发生率1.92%。对98例产前基因诊断,结果正常胎儿23例;α地贫45例,β地贫30例。结论阐明佛山地区孕期夫妇携带α和β地贫基因的发生率、基因突变类型以及通过产前遗传咨询,有效控制重型地贫患儿的出生,对于实行优生优育,提高人口素质具有重大意义。     

单管多重PCR体系快速检测缺失型α地中海贫血

目的采用单管多重PCR体系快速检测三种最常见缺失型α地中海贫血,并探讨该体系应用于临床基因诊断、产前诊断的可行性.方法采用单管多重PCR体系对21例血红蛋白H病和442例临床送检病例血样本进行α地中海贫血基因诊断,另2例取羊水进行产前诊断.结果21例H病中11例为右缺失型H病(-α3.7/--),占52.4%;10例为左缺失型H病(-α4.2/--),占47.6%.442例送检病例中正常(αα/αα)302例;140例为缺失型α地贫,其中东南亚缺失(--SEA/αα)123例,占87.9%(123/140),右失型(-α3.7/αα)10例,占7.1%(10/140),左缺失(-α4.2/αα)7例,占5.0%(7/140).2例羊水中一例为Hb Bart's胎儿水肿胎(--/--),另一例为东南亚缺失(--SEA/αα).结论该体系能快速检测三种最常见缺失型α地中海贫血,方法准确、简便、可靠、重复性好,可望广泛用于临床疑诊病例的基因诊断和产前诊断.     

育龄青年静止型α—地中海贫血的表型分析

目的了解育龄青年静止型α-地中海贫血的表型特征,探讨表型特征的诊断价值。方法利用血细胞仪和高效液相色谱仪,对117例经基因诊断为静止型α-地中海贫血的佛山地区育龄青年进行MCV、MCH和HbA2等指标的检测,并对其均值及处于正常范围的例数进行统计学分析。结果在117例静止型α-地中海贫血中,MCV、MCH和HbA2分别为(83.55±5.60)fl、(26.10±1.03)pg和(2.84±0.29)%;其中MCV、MCH和HbA2处于正常范围的例数分别占52.99%(62/117)、59.83%(70/117)和92.30%(108/117)。右缺失组的MCV及MCH均值分别比左缺失组的高,两者之间差异均有统计学意义(84.17vs82.02,t=-2.180,P=0.032;27.06vs26.10,t=-3.642,P=0.000)。结论静止型α-地中海贫血表型特征不明显,应用表型特征进行静止型α-地中海贫血初筛存在较高的漏检风险。右缺失的表型特征比左缺失更轻微,其筛查漏检的风险更高。     

地中海贫血新生儿脐血MCV的变化

目的探讨地中海贫血新生儿脐血红细胞平均体积(MCV)的变化.方法对108例父母一方为轻型地中海贫血的新生儿脐血用全自动血细胞分析仪进行MCV测定;并用PCR方法进行地贫基因检测.检出地贫基因者57例列为地贫组,未检出地贫基因者51例为正常组.结果地贫组新生儿脐血MCV为97.81±8.93fl,正常组新生儿脐血MCV为111.28±9.74fl(p<0.001).并与正常及地贫的外周血的MCV比较(p<0.001).结论应建立脐血MVC的参考值,对新生儿脐血进行地贫筛查时,应以新生儿脐血MCV值为标准,而不应以外周血的MCV值为标准.     

β地中海贫血的基因诊断及两种试剂比较

目的评价基因诊断在β地中海贫血(β地贫)诊断中的作用,比较不同厂家β地贫基因诊断试剂的临床应用效果.方法采用两种β地贫基因诊断试剂分别对包括周围静脉血、脐血和羊水在内的300份标本分别进行基因诊断,比较两种试剂操作的繁简性和临床诊断符合率.结果两试剂操作步骤大致相同,均可对血液以外的样本如羊水等进行β地贫诊断,均可检测17个突变位点,占β地贫突变发生率的99%以上;与临床诊断结果比较,阳性符合率均在99%左右,阴性符合率均为100%,差异无显著性.结论基因诊断对样本的适用范围较广,对β地贫有确诊和分型意义,并有利于产前诊断,具有准确、敏感、特异、简便等优点,但对17个突变位点以外的稀少类型β地贫仍可能出现漏诊.     

用ROC曲线确定Hb-A2在地贫诊断中的界值

目的 :确定血红蛋白 A2 (Hb- A 2 )在α地中海贫血和β地中海贫血 (地贫 )诊断中的临界值 ,并进行敏感性、特异性和准确性的评估。方法 :采用同步盲法对 383例门诊例行产检的育龄夫妇进行 Gap- PCR、反向斑点杂交基因(RBD)诊断和 Hb- A2的定量测定。 Gap- PCR确诊的α地中海贫血 2 4 6例 ,其中α地中海贫血杂合子 12 2例为病例组 ,12 4例正常者为对照组。 RBD确诊的β地中海贫血 135例 ,其中 10 0例β基因缺陷的杂合子为病例组 ,35例正常者为对照组。确定最适合的临界值 ,并进行准确性、敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比评估。结果 :诊断α地中海贫血 Hb- A 2最适临界值为≤ 2 .3% ,敏感性 5 9.8% ,特异性 5 7.3%。诊断β地中海贫血最适临界值为≥ 3.8% ,其敏感性为 95 % ,特异性77.1%。Hb- A2的受试者工作曲线显示 Hb- A2在β地中海贫血诊断时曲线下面积大于α地中海贫血诊断时的曲线下面积。结论 :Hb- A 2在α地中海贫血筛查时临界值为≤ 2 .3% ,在β地中海贫血筛查中为≥ 3.8%。 Hb- A2的含量变化对β地中海贫血基因缺陷的敏感性和特异性较高 ,对α地中海贫血基因缺失的敏感性和特异性稍低     

地中海贫血新生儿脐血细胞参数检测及分析

目的探讨地中海贫血的新生儿脐血血细胞参数的变化.方法应用Sysmex 9000全自动血细胞分析仪检测62例脐血细胞参数,用PCR法进行地贫基因分析.分为非地贫组、α地贫组及β地贫组并进行脐血细胞参数比较分析.结果白细胞和血小板各项参数组间比较无显著性差异(P>0.05).α地贫组HB、HCT、MCV、MCH及RDW-SD比非地贫组低(P<0.05);α地贫组RBC比非地贫组高(P<0.05).β地贫组HB、HCT及MCV比非地贫组低(P<0.05).结论脐血红细胞参数用于地中海贫的初筛有一定的临床意义.     

地中海贫血新生儿脐血MCV的变化

目的　探讨地中海贫血新生儿脐血红细胞平均体积 (MCV)的变化 .方法　对 10 8例父母一方为轻型地中海贫血的新生儿脐血用全自动血细胞分析仪进行MCV测定 ;并用PCR方法进行地贫基因检测 .检出地贫基因者 5 7例列为地贫组 ,未检出地贫基因者 5 1例为正常组 .结果　地贫组新生儿脐血MCV为 97.81± 8.93fl,正常组新生儿脐血MCV为 111.2 8± 9.74fl(p <0 .0 0 1) .并与正常及地贫的外周血的MCV比较 (p <0 .0 0 1) .结论　应建立脐血MVC的参考值 ,对新生儿脐血进行地贫筛查时 ,应以新生儿脐血MCV值为标准 ,而不应以外周血的MCV值为标准 .