应用3H-TdR掺入法对SMMC-7721细胞株药敏试验条件的探讨与应用

目的探讨3H-TdR掺入法在进行SMMC-7721系细胞肿瘤药敏试验实验时的最佳实验条件.方法确定出3H-TdR掺入法药敏实验时的最适细胞浓度、最适实验药物浓度、3H-TdR掺入最适时间;在最适条件下采用3H-TdR掺入法测定肝癌SMMC-7721细胞株对临床常用的9种抗癌药物的敏感性.结果应用3H-TdR掺入法检测肝癌SMMC-7721细胞株药敏试验的最适实验细胞浓度为1×104个/孔,最适试验药物浓度为1×PPC,3H-TdR最适掺入时间为收集细胞前8 h;肝癌SMMC-7721细胞株对DDP、ADM、5-FU、CPT高度敏感,对MTX、VP-16、MMC、NVB低度敏感,对PYM不敏感.结论 3H-TdR掺入法可用于肿瘤药物敏感性测定并确定出它的最适实验条件.     

金边瑞香对SMMC7721,NKM45,A549,S180肿瘤细胞增殖的影响

[摘要] 目的 探讨金边瑞香对SMMC7721, NKM45, A549, S180肿瘤细胞增殖的影响。方法 采用流式细胞术,观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞增殖周期的影响;采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721, NKM45, A549, S180肿瘤细胞株增殖作用的影响。结果 ① 金边瑞香浸膏可使SMMC-7721细胞增殖周期G0～G1细胞增多,S期细胞减少,且0.5g/ml金边瑞香浸膏作用最明显,G0～G1期细胞达80.64%;1g/ml,G0～G1期达到72.19%。②金边瑞香浸膏浓度在0.03125~1g/ml范围内对体外培养的SMMC7721, NKM45, A549, S180肿瘤细胞生长均有一定程度的抑制作用,其抑制作用与剂量成正相关,0.5g/ml金边瑞香浸膏对SMMC7721, NKM45, A549, S180肿瘤细胞生长抑制率为65.82%, 60.38%, 42.36%, 49.94%,但随着浓度增加,这种抑制作用反而减弱,在1g/ml其生长抑制率均有所减弱。结论 金边瑞香能使体外培养的SMCC7721细胞周期阻滞在G0～G1期,金边瑞香对体外培养的SMMC7721, NKM45, A549, S180肿瘤细胞株的增殖均有较强的抑制作用。     

多重耐药产PER-1型超广谱β内酰胺酶阴沟肠杆菌的研究

目的研究多重耐药阴沟肠杆菌017对β内酰胺类抗菌药物耐药的机制。方法使用双纸片扩散法和改良三相试验对阴沟肠杆菌017进行β内酰胺酶的表型检测，并用聚合酶链反应(PCR)扩增β内酰胺酶基因，对PCR产物进行测序确定基因型别。结果阴沟肠杆菌017经双纸片扩散法证实产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经三相试验证实该菌除了产ESBLs外，还同时产AmpC酶。PCR产物经测序长度为579bp，与GENEBANK的PAPER1A基因序列100％符合，确定为PER-1基因。结论阴沟肠杆菌017耐β内酰胺类抗菌药物的主要原因是PER-1型ESBLs和AmpC酶所致。     

金边瑞香浸膏对小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18表达的影响

目的观察金边瑞香（daphne odora var.marginata,DOVM）浸膏对小鼠血清干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素18（IL-18）表达的影响。方法选用昆明系小鼠60只,随机分为生理盐水组（对照组）和1、2、4、8、16 g/（kg.d）DOVM浸膏组共6组,每组10只。DOVM浸膏不同浓度组分别灌胃给药0.02 mL/g,1次/d,连续14 d;生理盐水组给予生理盐水灌胃0.02 mL/g,1次/d,连续14 d。常规分离血清后,采用生物素双抗体ELISA夹心法（ABC-ELISA）测定各组小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18的水平。结果1 g/（kg.d）DOVM浸膏组血清IL-4水平明显高于生理盐水组（P〈0.05）。生理盐水组与DOVM浸膏不同浓度组血清IFN-γ、IL-18水平比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）,DOVM浸膏不同浓度组间血清IFN-γ、IL-18水平比较差异也均无统计学意义（P均〉0.05）。结论1 g/（kg.d）DOVM浸膏对小鼠IL-4的表达有一定促进作用。     

BALB/c小鼠系统感染白念珠菌血清IL-18,IL-4,IFN-γ的动态变化

目的探讨BALB/c小鼠系统感染白念珠菌后IL-18,IL-4,IFN-γ的动态变化。方法BALB/c小鼠随机分成4组:高菌量感染组,低菌量感染组,免疫功能低下组,正常对照组。分别于系统感染白念珠菌1,4,7天后应用ABC-ELISA检测各组小鼠的IL-18,IL-4,IFN-γ的水平。结果IL-18水平从感染第1天骤降后(但仍高于免疫功能低下组,P<0.05~0.001),至感染后第7天达正常水平;而IFN-γ始终高于正常对照组及免疫功能低下组(P<0.05);IL-4于感染1天后低于正常对照组(但仍高于免疫功能低下组,P<0.05~0.001),感染4天后则与正常对照组差异无显著性,7天后高于正常对照组(P<0.05)。结论高低菌量白念珠菌感染的BLAB/c小鼠,免疫系统早期多以Th1型细胞应答为主;后期Th1/Th2型细胞因子均升高,表明细胞免疫和体液免疫均参与了抗白念珠菌感染。     

金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药谱变迁分析

金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus,SAU)是临床上常见病原菌,其对抗生素的耐药性日趋严重,特别是近2 0年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistancestaphylococcusaureus ,MRSA)有逐年增高的趋势且这些菌株具有多重耐药特征[1] 。为了解金黄色葡萄球菌对抗生素耐药性的变迁,以便临床合理选用抗生素,我们调查了近年来临床分离的SAU耐药谱,并进行分析,现报告如下。材料与方法一、材料(一)菌株来源　1998年1月～2 0 0 1年12月间从我院各种临床标本(血液、痰、尿液、积液、大便等)分离的金黄色葡萄球菌共2 31株。(二)仪器与试剂…     

活卡介苗免疫治疗可缩短初治肺结核化疗疗程

活卡介苗免疫治疗可缩短初治肺结核化疗疗程雷建平，王继香，周建年，章润泉，张天堑，漆基建，傅颖媛，彭祝宪（江西省肺科医院南昌３３０００６）我院对１０８例无糖尿病等严重并发症，能接受异烟肼（Ｈ）、利福平（Ｒ）、吡嗪酰胺（Ｚ）治疗的初治菌阳肺结核病人给予２...     

金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ,瑞香素对SMMC-7721和 MCF-7细胞作用的研究

目的 研究金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ(E002)、瑞香素(E003)抗肿瘤活性,为进一步研究抗肿瘤机制提供依据.方法 用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度E002、E003对SMMC-7721和MCF-7细胞的抑制率.结果 ①E002、E003浓度为250～1.95 μg/ml时,作用SMMC-7721细胞,两者的抑制率为:(86.9±2.2)%～(50.8±0.6)%. ②E002浓度为250～62.5 μg/ml时,作用MCF-7细胞,其抑制率为:(72.3±2.1)%～(52.48±1.65)%. ③E002对SMMC-7721和MCF-7细胞的IC50值分别为:(1.96±0.03)和(22.89±3.04) μg/ml;E003对SMMC-7721细胞的IC50值为:(1.23±0.11) μg/ml.结论 金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ对SMMC-7721、MCF-7细胞,瑞香素对SMMC-7721细胞的增殖均有显著抑制作用,且呈现良好的剂量依赖性.     

狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸体外抗乙型肝炎病毒活性研究

目的 研究从狭叶五味子Schisandra lancifolia中分离化合物扁枝杉香豆素(phyllocoumarin)和(-)-表儿茶酸[(-)-epicatechin]的体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性.方法 为了筛选和确认扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸体外抗HBV活性,以HepG2.2.15细胞为体外研究HBV模型,分别用RPMI 1640完全培养基稀释不同质量浓度的药物作用于细胞,培养3 d后收集上清,采用MTT法检测药物对HepG2.2.15细胞的生长影响和ELISA法检测培养上清中HBsAg和HBeAg的水平,评价扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸对HBsAg和HBeAg的影响.结果 扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸具有一定的体外抗HBV活性,其细胞毒性非常小,CC_(50)均大于200μg/mL.扁枝杉香豆素具有较强的抑制HBsAg和HBeAg分泌作用.阳性对照药物阿德福韦酯也抑制HBVHBsAg和HBeAg分泌,但在相同质量浓度(1.6μg/mL)下其抑制作用较扁枝杉香豆素弱.结论 狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸具有一定体外抑制HBV HBsAg和HBeAg分泌的作用,从而起到抗HBV作用.