Klebsiella pneumoniae甘油脱水酶α亚基基因的克隆与序列分析

甘油脱水酶是1,3 丙二醇发酵过程中的重要限速酶,具有很好的工业应用前景.其中α亚基为甘油脱水酶的主要组成部分,该基因的正确克隆与分析对甘油脱水酶的正确表达起重要作用.作者采用PCR技术,从肺炎克雷伯氏杆菌A.S.1.1736基因组中扩增得到了编码甘油脱水酶α亚基的gldA基因,并将其克隆至pMD18 T载体中.经核苷酸序列分析证实,gldA基因开放阅读框架由1668bp组成.经GenBank检索对照分析,gldA基因序列与国外文献报道的同源性达99.34%,表明所克隆的gldA基因即为克雷伯氏甘油脱水酶α亚基基因.     

滑县高标准粮田工程设计分析

滑县大部分区域位于引黄补源灌区内,沟渠灌排合一,结合高标准粮田建设要求进行田间工程设计。考虑到项目区农业灌溉水源以地下水为主,输配水工程以地埋式低压输水管道为主;电力配套主要对机井进行低压电缆,高压部分整合电业部门资金配套;渠沟配套主要对部分淤积堵塞段进行疏挖,结合沟渠、道路及田块分布情况配套桥涵;对主要生产路和机耕路进行硬化。工程实施后保证耕地"旱能浇、涝能排",建成水网、田网、路网"三网"配套的高产稳产粮田。     

SOD高含量玉米发酵乳的研制

本文针对超氧化物歧化酶(EC1.15.1.1,简称SOD)是清除生物体内有氧代谢所产生的超氧自由基(O2-)的特殊功能,兼顾玉米营养保健作用.用玉米为主要原料,以高产SOD的乳酸菌为主要发酵株,研制出高产量SOD玉米发酵乳.该发酵乳具有以下优点SOD含量高(180μ/mL),且SOD活性在15d内不下降;乳酸菌活体含量高达6.8×107个/mL,其中SOD高产菌占40%;该发酵乳的理化指标分别为蛋白质为1.48%,脂肪为1.96%,固形物为15.6%,酸度为1.35%;具有较酸奶更好的功能性.高含量SOD玉米发酵乳是一种具有广阔开发前景的功能性食品.     

Scorpion仪器源驱动功能在华北探区的应用

可控震源勘探属于绿色环保勘探方式,在国内外许多探区有着广泛应用。随着可控震源勘探技术的发展,这种勘探方式已经成为了高效率、高密度勘探的首选方法。本文介绍了在华北探区应用Scorpion仪器震源源驱动功能进行施工生产的实现步骤,并对生产中出现的问题与解决办法进行了说明。     

微生物源甘油脱水酶的研究进展

综述了甘油脱水酶的结构、性质、酶活测定及其在甘油发酵中的作用机理等研究情况,介绍了甘油脱水酶基因工程的研究进展,并对其参与甘油脱水酶自杀性失活的再生反应进行了介绍,探讨了甘油脱水酶的研究前景并提出一些建议.     

地层压力预测技术及其在川东北河坝地区的应用

该区纵向上存在多个压力系统。准确预测地层压力有助于减少井下复杂事故,实现高效、安全钻井并保护储层。根据伊顿法计算地层压力的原理,优化模型参数,利用现场录井、钻井和测井资料,对该区地层压力纵向上的变化规律进行综合分析,划分压力系统。最终得到了精度较高的预测结果,满足工程需要。     

甘油脱水酶α亚基基因的克隆、表达及纯化

目的克隆甘油脱水酶α亚基基因,构建表达载体,表达并纯化融合蛋白。方法采用PCR技术克隆甘油脱水酶α亚基gldA基因,并将其重组到含组氨酸标签的表达质粒pET-32a(+)中。将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析柱纯化,并进行Western blot分析及活性检测。结果重组表达质粒pET/gldA经酶切鉴定及序列分析,证明构建正确。转化E.coliBL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达,融合蛋白相对分子质量约81000,与预期大小一致。经Western blot分析,纯化蛋白能与6-Histidine抗体产生特异性免疫反应。α亚基经检测,未显示活性。结论已成功获得甘油脱水酶α亚基蛋白,为进一步研究其生物学性能奠定了基础。     

九州虫草液体培养条件优化

研究九州虫草富锌条件下菌丝体、胞内多糖和胞外多糖含量差异。通过单因子试验、正交试验测定不同因素的作用,菌丝体干重测定采用烘干称重法;胞内和胞外多糖测定应用苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸法。结果表明,九州虫草在加锌条件下菌丝干重最优培养条件是葡萄糖2.0%,蛋白胨1.0%,磷酸二氢钾0.5%,硫酸镁0.5%,硫酸锌200mg/L,装液量80mL/250mL,pH值6.0。最终结果菌丝干重为1.53g/100mL,是原来未加锌基本培养基菌丝干重的2.58倍。     

Klebsiella pneumoniae甘油脱水酶α亚基基因的克隆与序列分析

甘油脱水酶是1，3-丙二醇发酵过程中的重要限速酶，具有很好的工业应用前景．其中α亚基为甘油脱水酶的主要组成部分，该基因的正确克隆与分析对甘油脱水酶的正确表达起重要作用．作者采用PCR技术，从肺炎克雷伯氏杆菌A．S．1．1736基因组中扩增得到了编码甘油脱水酶α亚基的gldA基因，并将其克隆至pMD18-T载体中．经核苷酸序列分析证实，gldA基因开放阅读框架由1668bp组成．经GenBank检索对照分析，gld基因序列与国外文献报道的同源性达99．34％，表明所克隆的gldA基因即为克雷伯氏甘油脱水酶α亚基基因．     

微生物源甘油脱水酶的研究进展

综述了甘油脱水酶的结构、性质、酶活测定及其在甘油发酵中的作用机理等研究情况，介绍了甘油脱水酶基因工程的研究进展，并对其参与甘油脱水酶自杀性失活的再生反应进行了介绍，探讨了甘油脱水酶的研究前景并提出一些建议。