产微球茎属（Microbulbifer sp.）FG4菌株琼胶酶功能基因的克隆与表达

以FG4菌株琼胶酶基因侧翼序列为基础,构建重组质粒与载体,从而获得高效产琼胶酶的表达菌株。本研究利用染色体步移法获得FG4菌珠琼胶酶基因功能的侧翼序列之后,将基因组端序列克隆基因片段与表达载体进行重组,并转入到受体细胞BL21中,在鉴定表达菌株的成功构建后利用IPTG诱导表达琼胶酶。实现产微球茎属（Microbulbifer sp.）FG4菌株琼胶酶功能基因的克隆与表达,以期为琼胶酶类在不同领域的实际应用提供理论支持。     

产琼胶酶菌株Agarivorans sp.FG15的筛选鉴定与酶学性质

从中国南海热带海洋环境中分离纯化出产琼胶酶菌株FG15,并以16S rDNA进行分子鉴定,分析其酶学性质。FG15为革兰氏阴性球菌,对硫酸链霉素,氨苄青霉素,羧苄青霉素和氯霉素都不敏感。通过16S rDNA序列分析和BLAST同源性比对发现:FG15菌株的16S rDNA序列与船蛆杆菌(Teredinibacter turnerae),噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)对应序列同源性最高,为95%。利用MEGA 5.0软件构建系统发育树,FG15与噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)亲缘关系最近,同源性高达99%。因此,可以初步鉴定FG15为噬琼胶菌属(Agarivorans sp.)。酶学性质的研究表明:FG15所产琼胶酶的最适温度为36℃,在20~45℃之间热稳定性较好;最适pH为7.5,在pH 7.0~8.0之间酸碱稳定性较好;产酶主要为胞外酶;琼脂酶的动力学参数米氏常数Km为4.978mg/mL,最大反应速率Vmax为10.33μmol/(L·min)。