高效液相色谱法测定化妆品中吡硫鎓锌等19种组分的不确定度评定

对采用高效液相色谱法测定吡硫鎓锌等19种组分含量,建立了方法的数学模型,分析了检测过程中的不确定度的来源,进行不确定度评定。测量不确定度主要来源包括：标准物质称量、玻璃量器移液定容、标准曲线、样品称量、样品定容、重复性、液相色谱仪。被测化妆品中吡硫鎓锌等19种组分的含量范围为0.004 4%～0.183 7%,当取置信概率为95%,包含因子k=2时,相应的扩展不确定度范围为0.000 1%～0.007 4%。标准物质称量、玻璃量器移液定容和标准曲线引入的不确定度分量为合成不确定度的主要贡献量,建议通过增加系列标准工作溶液实验点数,定期对仪器及量器进行检定和维护等方法减小测量结果的不确定度。     

细胞膜色谱法定量分析5-羟色胺受体的别构效应

建立了大鼠纹状体细胞膜色谱法研究5-羟色胺(5-hydroxytryptamine)受体1D亚型(5-HT1D)的别构效应。利用大鼠纹状体制备得到细胞膜色谱固定相,特异性地识别混合对照品中的尼群地平、欧前胡素和藁本内酯。以不同浓度(4.62×10-7~4.62×10-5mol/L)的欧前胡素为竞争剂平衡细胞膜色谱柱,考察流动相浓度的变化对样品保留行为的影响。结果表明,欧前胡素的添加可使藁本内酯与受体作用的平衡解离常数(KD)增大2.06倍,说明欧前胡素结合5-HT1D受体后会影响藁本内酯在受体上的结合强度。在流动相中添加藁本内酯(5.26×10-7~5.26×10-5mol/L),考察欧前胡素保留因子的变化,测得藁本内酯的KD为(4.15±0.12)μmol/L,与文献报道值基本一致。该方法为定量研究受体的别构效应提供了一种全新思路。     

细胞膜色谱法研究5-羟色胺受体与藁本内酯的亲和作用

建立了大鼠纹状体细胞膜色谱前沿分析法,研究5-羟色胺(5-HT)受体5-HT_1D与藁本内酯的亲和作用。通过大鼠纹状体组织制备得到色谱固定相,利用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)分别测定硅胶吸附前后细胞膜悬液中5-HT的量,求得细胞膜固定相上5-HT受体含量为每克硅胶(40.5±2.3) pg。利用细胞膜色谱与液相色谱的离线联用,特异性地识别混合对照品中的舒马普坦和藁本内酯;以不同浓度(24.2~242 nmol/L)的5-HT_1D受体激动剂舒马普坦为模型药物,连续通过细胞膜色谱柱,记录舒马普坦的突破曲线,测得舒马普坦与受体作用的平衡解离常数(K_D)为389 nmol/L;并将舒马普坦通过不同浓度(37.0~370 nmol/L)的藁本内酯饱和后的细胞膜色谱柱,记录色谱柱饱和前后舒马普坦突破曲线的变化,测得藁本内酯与受体作用的K_D值为4.21 μmol/L。该方法快速、有效,适用于求解存在竞争结合时药物与受体作用的平衡解离常数。     

高效液相色谱法同时测定化妆品中的法莫替丁、雷尼替丁和西咪替丁

建立高效液相色谱法同时测定化妆品中法莫替丁、雷尼替丁和西咪替丁含量的方法。采用十八烷基键合硅胶填充柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相,梯度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测器为二极管阵列检测器,检测波长为226 nm,进样体积为10μL。法莫替丁、雷尼替丁和西咪替丁与相邻杂质峰之间的分离度良好,其质量浓度分别在0.16~78.84、0.17~83.91、0.17~83.95μg/mL范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系。平均回收率为94.63%~102.09%,5次重复测定结果的相对标准偏差为0.34%~0.88%。该方法简便快速,专属性强,精密度良好,可用于化妆品中法莫替丁、雷尼替丁和西咪替丁的检测。