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A cDNA for human TNF-α (615bp) was isolated by means of polymerase chain reaction (PCR) using first strand cDNA from PMA-induced HL-60 cells as template. The result from sequencing the 615 bp cDNA fragment indicated that it corresponded to the entire sequence of mature human TNF coding region. Direct expression of mature human TNF was achieved using a plasmid pHT-1 constructed by ligation of the cDNA and a synthetic DNA. The IPTG-induced bacterial product (hTNF) showed cytotoxicity to mouse L-929 cells. The TNF activity was further identified by neutralization of a specific monoclonal antibody against human TNF-α. Approximately 80,000 units of activity were detected per ml of culture at A600=2. 相似文献
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在分析化学定性分析教学中,按硫化氢系统分组法将阳离子分为V个组。第Ⅲ组阳离子的分析方法甚多,Tenbusch等曾总结了13种分离法,但最常用的组内分离一般有两种方法即氨法和碱法。按氨法分离时,部分Mn~(2+)生成MnO(OH)_2而留在沉淀中,部分Co(OH)_2发生共沉淀,造成Mn_(2+),Co~(2+)两边跑,即一部分随Fe(OH)_3,Al(OH)_3,Cr(OH)_3共沉淀下来,一部分留在溶液中,使分离不完全,检出有一定困难。按碱法分离时,部分Zn(OH)_2被带下共沉淀,因而在检出时易丢Zn~(2+)。我们在近几年的实验课教学中,改进了阳离子第Ⅲ组组内分离条件。分离效果好,克服了碱法和氨法分离的缺点。 相似文献
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1引言氨基酸的测定方法很多,如薄层层析法、纸层析法、高压液相色谱法和气相色谱法等,但所分析的样品多为比较洁净或透明的液体,沉淀或悬浮物较少,样品前处理较易进行。鱼饵料由细小粉末压制而成,因此要测定其中的游离蛋白氨基酸,必须先用水浸泡处理使氨基酸溶解,而水浸液出现许多固体悬浮物,即使高速离心亦难以分离,给测定造成困难。本文采用柱前衍生气相色谱法,测定了两种鱼饵料中的游离蛋白氨基酸,以鸟氨酸为内标物,采用质谱定性。方法快速、简便,效果理想。2实验部分2.1材料及试剂两种鱼铒料分别为漳州鱼饵料(国产)和海… 相似文献
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We carry out a systematic study of the different contributions to the deviations of the elliptic flows from the quark number scaling in high energy heavy ion collision in a quark combination model. The effects that we considered are: the resonance decay, the flavor dependence of the quark elliptic flow and the combination of quarks/antiquarks with slightly different transverse momenta. Our results show that the deviations observed in experiments can be well reproduced within the combination framework if all the three effects are considered. We make a detailed analysis of the different contributions using a Monte-Carlo program and suggest measuring the quark number scaling in intermediate pT range more precisely. 相似文献