牛胰岛素A链的合成及其与天然B链组合成结晶胰岛素

本文报导了牛胰岛素A链的S-磺酸盐(Ⅰ)的合成以及自Ⅰ和天然B链S-磺酸盐(Ⅱ)组合为结晶牛胰岛素的半合成。十二肽酸Ⅴ脱N-保护基后,与九肽酰肼Ⅳ经迭氮化物法缩合得带保护基的A链(Ⅵ),粗产物经钠-液氨处理去保护基后,用乙酸缓冲液调至pH 3.8以除去部分杂质,然后进行S-磺酸化。经纸层析纯化的S-磺酸盐Ⅰ,其旋光率、纸电泳和纸层析的行为、氨基酸组成以及末端分析数据均与天然牛胰岛素A链S-磺酸盐的相符。产物Ⅰ与天然胰岛素B链S-磺酸盐经巯基乙酸还原和空气氧化后,得到的粗产物的生物活力相当于天然牛胰岛素活力的5—10％,经仲丁醇-乙酸柚提后,活力可提高5—10倍,抽提物再经含乙酸锌的丙酮-柠檬酸缓冲液纯化,可得结晶产物Ⅲ,其晶形与天然牛胰岛素相同,其活力(20—23国际单位/毫克)与后者相仿。上述结果及其他证据都证明我们已合成了牛胰岛素A链和所获得的半合成结晶产物就是结晶牛胰岛素。     

肽化学进展及发展趋势

生命科学中的重要课题,诸如细胞分化、免疫防御、肿瘤病变与治疗、抗衰防老、生殖控制及生命节律等,都和肽化学有密切关系。多肽的近期发展已经突破了多肽激素的概念,神经多肽、免疫活性多肽、多肽毒素等等的飞速发展,一些活性肽之间的相互关系被阐明,使我们对生物活性肽的功能有了更深入的了解。多肽合成技术的发展有可能将更多的     

酶促合成肽的研究I.亮-脑啡肽色氨酸类似物的酶促合成

在先后以α-胰凝乳蛋白酶和和木瓜酶作催化剂的作用下,从C端的LeuNH2的氨基开始,逐个与N保护的氨基酸或其衍射生物缩合,合成了亮-脑啡肽色氨酸类似物-TyrGlyGly Trp LeuNH2.对酶的专一性、有机溶剂的选择和合成条件等进行了研究,在Z-TyrOMe和GlyGlyTrp LeuNH2的缩合反应中,比较了相转移法和均相法。上述两种酶的酶促接肽的供体以N-酰基氨基酸酯为好,比相相应的游离酸反应速度快,副反应少,如用嗜热菌蛋白酶,则以N-酰基氨基酸为好,酶促合成与从有机合成所得的产物相同。初步的体外实验表明合成的TyrGlyGlyTrpLeuNH2和天然的亮-脑啡肽对豚鼠回肠的收缩显示相同程度的鸦片样的抑制作用。     

δ-氨基乙酰丙酸的合成

研究了合成δ-氨基乙酰丙酸(ALA)的简便方法。由带保护基的二肽:ZGly-DL-ValOH,KGly-DL-LeuOH, 2Gly-DL-ILeOH和ZGly-DL-AlaOH经环化、加成、开环和水解反应,合成了δ-氨基乙酰丙酸(4)。     

N-乙酰基-3-二茂铁基-丙氨酸乙酯的合成及其拆分

应用手性固定相高效液相色谱对外消旋混合物进行光学活性拆分,具有快速、简便、效果好的优点。唐琴梅等制备了L-氨基酸酰氨型和L-二肽酰氨型固定相,对D、L-α一氨基酸和D、L-α-氨基膦酸的衍生物进行拆分,发现含芳环基团的化合物在手性柱上拆分效果较好,可能与芳环中含有六个π电子有关。N-乙酰基-     

高效液相色谱手性固定相的研究 IV. (L,L)-二肽叔丁酰胺型手性固定相拆分α-氨基烃基膦酸衍生物对映异构体

本文制备了十种新型(L,L)-二肽叔丁酰胺型键合硅胶手性固定相, 并将其用于高效液相色谱拆分外消旋α-氨基烃基膦酸衍生物。实验结果表明拆分效果良好。本文就固定相及α-氨基烃基膦酸衍生物的结构对拆分效果的影响进行了,讨论并对拆分机制进地了初步探讨。     

酶催化与有机合成

酶是一类特殊、高效的催化剂,或称生物催化剂。与普通催化剂不同之处,在于它不是简单的无机或有机化合物,或过渡金属络合物,而是由活细胞所产生的生物大分子。酶催化反应也属均相催化反应,所不同的是它的反应介质通常是水,而不是其他均相催化反应所赖以进行的有机溶剂。新近发展的固定化酶,又使酶催化由均相发展为非均     

Novel immonium type peptide coupling reagent: 5-(1H-benzotriazol-1-yloxy)-3,4-dihydro-l-methyl 2H-pyrrolium hexachloroantimonate (BDMP )

A novel immonium type coupling reagent, 5-(1H-benzotria-zol-1-yloxy )-3,4-dihydro-1-methyl 2H-pyrrolium hexachlo-roantimonate (BDMP) has been designed, synthesized and u-tilized to synthesize oligopeptides and biologically active pep-tide both in solution and solid phase with satisfactory yield, low racemization and fast reaction rate. The estimation of racemization and the influence of several reaction parameters were studied by HPLC method using the model reaction: Z-Gly-Phe-OH Val-OMe·HCl→Z-Gly-D/L-Phe-Val-OMe. It was shown that the reactivity of BDMP was much higher and the racemization was much lower than those of HOBt-based 'onium' reagents, even though its analogues BOMI. To further verified the effectiveness of BDMP, Leu-enkephalin was synthesized both in solution and solid phase using BDMP as coupling reagent. The proposed mechanism was also speculated.     

带保护基的胰岛素A链羧端十二肽的合成

已知合成的胰岛素A链羧端带保护基的十二肽酯Ⅰ在不同条件下皂化,得十二肽Ⅱ,其物理性质略有差异,经制成牛胰岛素A链井进一步制成半合成牛胰岛素粗产物后,其生物活力相当于天然胰岛素的1—4％。根据二条不同的路线直接合成了带保护基的胰岛素A链羧端十二肽Ⅱ,路线一:由已知的四肽Ⅲ制成其酰肼衍生物,再转变为相应的迭氮化物后与脱N-苄氧羰基和γ-叔丁基的五肽Ⅴ(即Vb)缩合成九肽Ⅵ,Ⅵ经脱除N-保护基后与已知的三肽酰肼Ⅶ以迭氮化物法缩合郎得十二肽Ⅱ.路线二:三肽酰肼Ⅶ先制成迭氮化物再与脱N-保护基的已知二肽酯ⅩⅩⅢ反应成五肽酯ⅩⅩⅣ,再经肼解得五肽酰肼ⅩⅩⅤ,然后按迭氮化物法与脱苄氧羰基的二肽Ⅹ缩合成七肽酯ⅩⅩⅥ,再肼解得七肽酰肼ⅩⅩⅦ,最后通过迭氮化物法与五肽V_b缩合,亦得相同的十二肽Ⅱ.由这两种方法直接合成的十二肽Ⅱ,其质量较皂化所得为优,并已用于牛胰岛素A链的合成与结晶牛胰岛素的半合成和全合成。五肽Ⅴ和七肽ⅩⅩⅥ都曾各按二条不同的路线合成,而得到相同的产物,本文报导的合成肽段均经分析证明为化学纯的均一物质。     

测定心血管紧张素转化酶抑制剂体外抑制动力学的反相HPLC法

报道一种用反相ＨＰＬＣ技术简便、有效地研究心血管紧张素转化酶抑制剂体外抑制动力学的新方法。该法利用马尿酰－甘氨酰－甘氨酸作酶底物，反相ＨＰＬＣ跟踪监测酶解产物马尿酸的浓度随时间变化来研究酶解反应的历程