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端粒酶是由端粒酶反转录酶和端粒酶RNA构成,端粒酶RNA中含有端粒合成所需的模板序列.现仅获得了拟南芥的端粒酶RNA序列.为了建立快速有效的富集植物端粒酶的方法并克隆水稻的端粒酶RNA序列,研究中使用不同浓度的PEG6000选择性的沉淀端粒酶萃取液中的杂蛋白.结果表明当PEG6000浓度为4%时,端粒酶活力最高,并可以有效降低核糖体28S rRNA和18S rRNA的干扰.从端粒酶蛋白液中提取RNA,并在其3′端连接接头,在模板区设计上游引物,PCR扩增获得一条292 bp的未知片段,其中含有端粒模板序列5'-AAACCCTAA-3′.将该片段及拟南芥端粒酶RNA的转录调控区进行序列比对分析发现,两者具有类似的转录调控元件.因此,初步判定292bp的目的片段为水稻端粒酶RNA的模板下游序列. 相似文献
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端粒是真核生物线性染色体末端的特殊结构,一定长度的端粒在维持真核生物遗传信息完整性和染色体结构稳定性中起重要作用.建立一种简单快捷定量测定水稻单个端粒绝对长度的方法对研究水稻各个染色体端粒具有积极的意义.研究将特殊接头连接到水稻染色体端粒的G-overhang末端,并利用近端粒区域的特定引物以及下游接头引物,通过PCR技术,获得所需鉴定的端粒,结合DNA凝胶电泳成像分析系统,定量检测水稻单个端粒的长度.结果显示本方法可以通过少量水稻基因组DNA有效测定单个端的粒长度. 相似文献
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利用水稻端粒酶对端粒序列的合成作用,对模板基因序列进行定点突变,构建了pCambia1301-T突变型、pCambia 1301-Y野生型载体.经农杆菌介导,选用水稻不同品种和组织,探索候选序列的鉴定体系.结果显示,不同水稻品种诱导愈伤,差异显著,其中中花11号可快速诱导愈伤,比广陆矮4诱导时间缩短一半,用成熟胚和幼胚分别诱导愈伤,无明显差异;对突变型、野生型、正常组织进行基因组DNA端粒鉴定和端粒酶活性分析,发现突变型端粒酶活性明显高于对照.这些均表明该鉴定体系完整、可靠,为端粒酶RNA模板基因序列的鉴定建立了有效的方法. 相似文献
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针对5 000 t/d熟料生产线存在的问题,针对性地采取了节煤措施,包括:减少熟料灰对煤粉的污染;窑头选用新型煤粉燃烧器;优化改造入窑生料计量设备;优化改造预热器系统保温;优化篦冷机篦板,提高篦冷机冷却效率;减少窑系统漏风。通过几年的持续改造,该生产线2017年熟料标准煤耗达到99.19 kg/t,较2012年下降了9.82 kg/t。 相似文献
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1 V型选粉机的作用
V型选粉机是和辊压机配套使用的一种静态打散分级设备,它将经过辊压机挤压处理的物料打散,然后将打散后物料中一定粒级的细粉分离出来,有利于辊压机的平稳运行,提高系统产量,同时具有烘干功能.其工作原理是:物料由上部进料口喂入机体并形成料幕,气流从进风口引入并穿过料幕,与物料直接接触.在选粉区,物料被选粉... 相似文献