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三聚氰胺单克隆抗体的制备及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
制备了抗三聚氰胺(melamine)单克隆抗体,鉴定了其免疫学特性并建立三聚氰胺标准抑制曲线。以人工合成抗原Melamine-BSA免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的细胞株,以体内诱生腹水法生产三聚氰胺单抗,用硫酸钠盐析法提纯,以直接竞争ELISA法建立三聚氰胺标准抑制曲线。获得了1株能稳定分泌抗三聚氰胺单克隆抗体的杂交瘤细胞株H2C6。用间接ELISA方法测定腹水单抗效价为2×10-7。经金标免疫层析实验鉴定单抗与三聚氰胺特异性结合,H2C6杂交瘤细胞株单抗对三聚氰胺的半数抑制浓度(IC50)为4.15μg/mL。除与三聚氰酸交叉反应性为72%外,与三嗪及各类抗生素等交叉反应性都小于5%。体外多次传代培养和反复冻存复苏后抗体分泌稳定。 相似文献
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采用酶标抗原建立了高效、高灵敏的呋喃唑酮代谢物直接竞争的ELISA检测方法。以呋喃唑酮单克隆抗体包被作为固相抗体,HRP标记的抗原与标准品(或样品)中呋喃唑酮的代谢物衍生物竞争结合抗体,建立了直接竞争酶联免疫检测体系。以3-氨基-2-恶唑烷酮的衍生物(CPAOZ)为标准品建立标准曲线,得到方法的IC50为0.08μg/L,灵敏度为0.015μg/L,线性范围0.0250.5μg/L;检测样品的平均回收率为82.0%121.0%,与其他结构类似物基本无交叉反应。建立呋喃唑酮酶标抗原直接竞争酶联免疫检测方法,灵敏度高、特异性强、操作简单,可以满足畜禽水产实际样品的检测需要。 相似文献
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