HB-EGF对坏死性小肠结肠炎新生大鼠回肠组织促炎因子IL-12和IL-18的影响

目的建立新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型,探讨肝素结合性表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)对NEC新生大鼠回肠组织促炎因子白细胞介素-12(IL-12)和白细胞介素-18(IL-18)水平的影响及其对肠道保护作用的机制。方法 30只SD新生大鼠随机分为3组:NEC模型组(缺氧复氧冷刺激+人工喂养)、HB-EGF干预组(缺氧复氧冷刺激+HB-EGF+人工喂养)和正常对照组(母乳喂养),观察造模和干预后大鼠一般状况和盲肠近端回肠组织病理改变及用ELISA双抗夹心法检测回肠组织IL-12和IL-18的水平。结果HB-EGF干预组病理评分≥2分的发生率小于NEC模型组(20%vs 90%,P<0.05);HB-EGF干预组的IL-12及IL-18水平均低于NEC模型组(P<0.01)。结论 HB-EGF可能通过降低NEC新生大鼠中促炎症因子IL-12及IL-18水平,从而起到保护肠道的作用。     

不同剂量生大黄粉在危重病患者肠胃并发症的临床研究

目的：分析和研究不同剂量生大黄粉在危重病患者肠胃并发症的临床治疗效果。方法选取我院2011年3月-2013年8月内科收治的危重患者58例,将其按双盲随机方法分为两组,观察组29例与对照组29例。两组患者均给予对症治疗,对照组患者在对症治疗基础上按每千克体重计算加用大黄粉0.05 g/次;观察组患者在对症治疗基础上按每千克体重计算加用大黄粉1.5 g/次,治疗5天后,将两组患者治疗效果进行对比。结果观察组患者胃肠功能衰竭率、上消化道出血发生率明显低于对照组（P ﹤0.05）,具有统计学意义。观察组患者肠内营养供给时间、住院天数、每日大便次数等项指标均低于对照组（P ﹤0.05）,具有统计学意义。观察组患者炎症指标、肾功能指标检测值均优于对照组（P ﹤0.05）,具有统计学意义。结论将大剂量生大黄粉应用于危重病患者肠胃并发症治疗中,能够有效改善患者肾功能,控制炎症反应,减少胃肠功能衰竭及上消化道出血等情况发生,对提高救治成功率有重要意义。     

先天性食管闭锁围手术期监护及管理

目的总结先天性食管闭锁患儿围手术期监护及临床特点,以加强围手术期管理。方法对2005—2013年广州市妇女儿童医疗中心收治的先天性食管闭锁患儿围手术期的临床资料进行回顾性分析。结果研究期间收治的182例食管闭锁患儿中21例放弃治疗,纳入分析161例。术前66例需机械通气,机械通气组早产儿比例及合并心脏畸形患儿比例均高于非机械通气组(63.6%比29.5%,57.6%比16.8%,P<0.05)。术后每隔1 h采用CRIES评分法进行1次疼痛评估,≥4分者137例(85.1%),1~3分24例(14.9%)。术后1周内开奶患儿(59例)住院时间和机械通气时间与术后1周后开奶患儿(102例)比较差异无统计学意义(P>0.05)。体重增长良好组(74例)住院时间短于体重增长不良组(87例)[(18.1±4.2)天比(25.3±10.9)天,P<0.05]。术后使用奥美拉唑组(53例)吻合口漏发生率与未使用奥美拉唑组(108例)差异无统计学意义(P>0.05),但吻合口漏持续时间缩短[(7.2±4.3)天比(13.1±6.8)天,P<0.05]。结论先天性食管闭锁患儿中早产及合并心脏畸形者需呼吸支持的比率较高,营养状态良好可缩短住院时间,术后使用奥美拉唑抑酸可缩短食管吻合口漏持续时间。     

MD-2和GM2A基因多态性与新生儿坏死性小肠结肠炎的关系

目的探讨MD-2和GM2A基因多态性与新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的关系。方法选择2011年6月至2012年5月本院确诊为Ⅱ期及Ⅱ期以上NEC的新生儿(NEC组),用基因测序方法对MD-2、GM2A基因外显子及位于MD-2基因启动子区的rs11465996位点进行重测序,检测基因多态性,并将功能性多态位点与同期非NEC新生儿(对照组)进行比较。结果 NEC组共纳入42例,对照组共纳入83例。MD-2基因外显子区域未检测到频率异常的多态性位点;NEC手术组rs11465996位点(MD-2启动子区)携带低频等位基因(G)的基因型频率显著高于对照组(55.0%比30.1%),NEC组rs1048719位点(GM2A基因1号外显子)及rs2075783位点(GM2A基因内含子)携带低频等位基因(分别为A、C)的基因型频率显著高于对照组(分别为38.1%比20.5%、42.9%比13.3%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MD-2基因启动子区域的rs11465996多态性与NEC严重程度有关;GM2A基因1号外显子的rs1048719多态性及内含子区域的rs2075783多态性与NEC发生有关。     

肝素结合性表皮生长因子样生长因子在坏死性小肠结肠炎新生大鼠线粒体途径细胞凋亡中的作用

目的 探讨肝素结合性表皮生长因子样生长因子(heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF)在新生儿坏死性小肠结肠炎(neonatal necrotizing enterocolitis,NEC)新生大鼠模型线粒体途径细胞凋亡中的作用. 方法 新生无特定病原体Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,每组10只.NEC模型组:采用代乳品人工喂养,并给予100％氮气缺氧90 s,4℃冷刺激10 min,每天2次,连续3 d;HB-EGF干预组:在NEC模型组基础上予HB-EGF灌胃,每次800 μg/kg,每天4次,连续3d.正常对照组:鼠乳喂养3d,不予任何干预.大鼠生后72h禁食12h后处死.取回肠末端组织,HE染色观察病理改变并评分;电镜下观察线粒体超微结构变化;免疫组织化学方法检测细胞色素C含量;Western印迹技术检测凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)及凋亡肽酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,APAF-1)的表达.组间差异比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验,P＜0.05为差异有统计学意义. 结果 (1)HB-EGF干预组NEC发生率为2/10,低于模型组(9/10),差异有统计学意义(x2=7.27,P＜0.01);对照组未发生NEC.(2)NEC模型组线粒体在肠上皮细胞及肌层细胞中存在明显肿胀,基质内有多数电子透亮区,线粒体超微结构严重损伤.HB-EGF干预组有少量线粒体肿胀,损伤较NEC模型组减轻.(3)NEC模型组回肠组织细胞色素C表达较对照组增强,差异有统计学意义(0.030±0.018与0.002±0.001,q=6.15,P＜0.01),HB-EGF干预组回肠组织细胞色素C表达(0.014±0.018)较NEC模型组减弱,差异有统计学意义(q=3.53,P＜0.05).NEC模型组的APAF-1表达较对照组增强(1.364±0.299与0.215±0.033,q=15.31,P＜0.05),AIF表达也增强(0.181±0.050与0.127±0.045,q=3.71,P＜0.05);与NEC模型组比较,HB-EGF干预组APAF-1的表达(0.455±0.123)减低(q=4.04,P＜0.05),AIF的表达(0.289±0.045)则明显增强(q=7.32,P＜0.05). 结论 HB-EGF能降低新生大鼠NEC发生率,其机制之一可能是通过下调APAF-1表达而减少新生大鼠线粒体途径细胞凋亡.     

糖巨肽的生物学作用及研究进展

糖巨肽(GMP)是乳中κ-酪蛋白经凝乳酶水解后产生的一个多肽片段.目前,人、牛和山羊的GMP结构已经研究得比较清楚.GMP多肽链中含有的唾液酸结构对其生物学作用的发挥具有重要影响.GMP具有抗感染、调节免疫、抗炎、营养保健等多种生物学作用,它作为一种新型的生物功能蛋白,将会在医学和食品等领域得到越来越广泛的应用.     

早产大鼠坏死性小肠结肠炎三种常用模型的建立及评价

目的 用人工喂养+缺氧+冷刺激、缺氧-复氧及腹腔注射内毒素(lipopolysaccharides,LPS)等国内外常用方法建立早产大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)模型,并进行比较和评价. 方法 A组早产大鼠(n=10)采用代乳品人工喂养,并给予100%氮气缺氧90 s,4℃冷刺激10 min,每天2次,连续2 d;B组早产大鼠(n=10)给予100%氮气5 min,100%氧气5 min,每天2次、连续3 d;C组早产大鼠(n=10)给予腹腔注射LPS 5 mg/kg;D、E、F组为相应正常对照组,每组10只.HE染色后光镜下观察肠道、肝、肺及肾组织病理改变,并对肠组织损伤情况进行病理评分,评分≥2分确定为NEC. 结果 A、B、C组均出现不同程度的活动减少,腹胀腹泻,肠道扩张充血.A至F组的肠组织损伤病理评分结果分别为(3.13±0.64)分、(1.40±0.52)分、(2.00±0.42)分、(0.30±0.48)分、(0.30±0.48)分和(0.40±0.52)分,模型组与相应对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);模型组内B组与A组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);C组与A组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05).A、B、C组的NEC发生率分别为6/8、20%(5/10)和4/8,对照组的NEC发生率均为0.C组的肝脏、肾脏和肺脏损伤较A、B组严重,而对照组各重要脏器均未见异常. 结论与缺氧-复氧和腹腔注射LPS等单因素的建模方法相比,综合运用人工喂养+缺氧+冷刺激更接近新生儿NEC的病因,且其发生率高,重复性好,特异性强,是一种较为理想的NEC建模方法.