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反义AFP增强子/TK基因重组逆转录病毒载体的构建及在肝癌细胞中的专一性表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的构建在肝癌细胞中特异性高表达的重组逆转录病毒载体,观察其对体外培养肝癌细胞生物学行为的影响。方法应用DNA重组技术将α-甲胎蛋白増强子(AFE)核心区DNA与单纯性疱疹病毒胸苷激酶(TK)基因融合,反向插入逆转录病毒载体pLXSN,重组体命名为pL/TK/AFE/SN;经PA317细胞包装、G418筛选、病毒滴度测定,挑选滴度高的抗性克隆细胞株扩增培养,收获病毒上清,感染体外培养的Hap3B肝癌细胞和Hela宫颈癌细胞。用Southernblot、Northernblot检测转染细胞的DNA、mRNA,以羟甲基无环鸟苷(GCV)对细胞的杀伤毒性检测外源基因在转染细胞中的表达。结果酶切及Southernblot证实插入pL/TK/AFE/SN的反义AFE/TK基因大小、方向及克隆位点正确。达到一定的产病毒滴度。Northernblot分析显示Hep3B肝癌细胞有TK基因mRNA水平表达;应用GCV后,导入反义AFE/TK基因的Hep3B肝癌细胞生长明显受抑制(P<0.01)。结论成功构建了含反义AFE/TK基因的重组逆转录病毒载体并包装出具有感染能力的假型逆转录病毒;重组载体所含的反义AFP増强子能调控外源性TK基因特异地在Hep3B肝癌细胞中高表达。 相似文献
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通过与到我院实习的德国留学生进行交流,对比两国临床医学本科阶段教育模式,总结出各自特点,并提出德国本科医学教育模式中值得我们借鉴的特点,为探索优化、完善的本科医学教育模式提供线索。 相似文献
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陈迟 《中华医学教育探索杂志》2011,10(12):1492-1494
在住院医师规范化培训过程中,除常规的培训管理外,将住院医师各类考核成绩与其每月绩效进行挂钩,按照得分给予相应奖金;利用绩效考核促进住院医师学习的积极性,加强对住院医师的管理,提高住院医师规范化培训的质量。 相似文献
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目的通过研究炎症性肠病(inflammatory bowel diseases,IBD)患者血清中Tuftsin(促吞噬素)的水平和与临床表现的关系,探讨其在IBD中的作用和意义。方法选取24例溃疡性结肠炎(UC)患者和28例克罗恩病(CD)患者及30例正常对照者,应用反相-高效液相色谱法(RP-HPLC)进一步测定Tuftsin在血清中的表达水平,并分析其与临床表现之间的关系。结果 UC患者Tuftsin水平(1.50±1.04)μg/ml和CD患者Tuftsin水平(1.56±1.06)μg/ml均高于健康对照组(0.92±0.58)μg/ml,(P〈0.05),且与临床疾病活动指数和血清C反应蛋白升高阳性率正相关(P〈0.05),但与病变部位无关(P〉0.05)。结论 IBD患者血清中Tuftsin水平明显增高,且与临床表现有关,提示Tuftsin可能在IBD发病机制中发挥重要的免疫调节作用。 相似文献
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目的 分析新生儿及母源性原发性肉碱缺乏症(PCD)临床筛查、诊断、治疗及基因型,为PCD的临床诊治提供依据。方法 采用串联质谱法(MS/MS)对2009年1月1日—2018年12月31日在浙江省医疗机构出生后3 d的新生儿足跟血进行多种遗传代谢病筛查。游离肉碱(C0)低于本实验室切值的可疑患儿及其母亲同时召回确诊。结果 共筛查3 040 815例新生儿,血C0低于正常参考值(切值<10μmol/L)者4 459例,确诊PCD 患儿121例(其中男55例,女66例);发病率为1/25 131。对确诊后随访资料完整的111例患儿分析显示:初筛C0值为(5.94±2.01)μmol/L、召回复查C0值为(5.70±1.99)μmol/L,差异无统计学意义(t=1.05,P>0.05)。左卡尼汀初始剂量为40~200mg/(kg·d),维持剂量时C0的水平为(24.94±10.26)μmol/L,显著高于治疗前C0水平(t=20.728,P<0.001)。母源性PCD 64例,发病率为1/47 513,C0平均为(3.31±1.79)μmol/L。111例PCD患儿共检出SLC22A5基因上42种变异,其中以c.1400C>G (p.S467C) 突变最为常见,约占33.33%(74/222);其次为c.51C>G(p.F17L)占14.73 %。93.75%的母源性PCD患者母亲进行基因检测(60/64),c.1400C>G (p.S467C) 突变约占35.83%(43/120)。除2例患儿不明原因死亡外,其他PCD患儿生长发育正常。结论 PCD可通过新生儿疾病筛查早期发现,但需排除母源性肉碱缺乏症。基因检测可明确诊断,SLC22A5 c.1400C>G (p.S467C) 变异是浙江省PCD患者最常见的突变类型。左卡尼汀治疗有效,但需要长期规范治疗与随访。 相似文献
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目的探究《住院医师规范化培训教学活动规范手册》(简称教学活动规范手册)在住院医师规范化培训(简称住培)中的应用效果。方法采用非同期对照方法, 选择上海市东方医院2020级和2021级196名住培学员为研究对象, 将2021级95名住培学员设为试验组, 按照教学活动规范手册开展教学活动;将2020级101名学员设为对照组, 采用传统住培带教方案安排教学活动。比较两组学员在教学活动评价、教学活动完成情况和教学活动合格情况上的差异。采用t检验、χ2检验等统计学方法处理相关数据。结果试验组学员对小讲课的评分优于对照组学员[(99.06±2.85)分比(97.88±4.23)分], 疑难病例讨论完成率和合格率更高[98.8%(497次/503次)比97.1%(602次/620次), 98.4%(495次/503次)比89.8%(557次/620次], 教学督导对试验组学员教学活动的评分更高[如小讲课评分(95.89±1.10)分比(89.43±2.33)分], 以上差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论教学活动规范手册改善了住院医师规范化培训教学管理体系, 优化了培训流程, 有助于培... 相似文献
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目的:通过气道管理模拟训练使低年资医务人员掌握基础气道管理的知识,熟练运用各类气道处理工具,拥有正确处置困难气道的能力。方法:挑选资深医学模拟训练导师,组建气道管理模拟培训项目团队;开发气道管理模拟医学培训课程;通过视频教学与实践相结合的综合模拟教学形式,对219名学员进行基于模拟教学的气道管理培训;并通过柯氏评估模型... 相似文献
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目的 探讨新生儿咽喉部肿物患者的临床表现及手术方式。方法 通过回顾2020—2022年就诊于兰州大学第二医院的3例新生儿咽喉部肿物患者的临床资料,总结分析3例新生儿咽喉部肿物患者的临床表现及治疗方法。3例患者中,咽喉部囊肿1例,咽部毛息肉1例,咽部畸胎瘤1例。结果 3例患儿均表现为呼吸或吸吮困难,均在鼻内镜辅助下顺利进行支撑喉镜咽喉部肿物切除手术。随访10个月以上,均无复发。结论 鼻内镜的运用可以帮助明确肿物基底部及其与周围组织的关系,确定手术切除范围,在鼻内镜辅助的支撑喉镜下行咽喉部肿物切除,可以完整切除肿瘤,充分止血,并发症少,应用于新生儿患者具有一定的优势。 相似文献
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