PMCA1-4及其A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织中的表达

目的 研究质膜钙ATP酶异构体1-4(plasma membrane Ca²⁺-ATPase 1-4,PMCA1-4)在成年大鼠前庭组织的分布部位,及其A端和C端剪接变异体的表达类型。方法 选择8周龄健康SD大鼠,解剖出内耳器官行前庭切片,同时取前庭椭圆囊斑和球囊斑提取总RNA。通过免疫荧光方法检测PMCA1-4在成年大鼠内耳前庭组织的表达部位,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PMCA1-4的A端和C端剪接变异体在成年大鼠前庭组织的表达类型。结果 球囊和椭圆囊荧光染色切片中,于毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA1表达,毛细胞纤毛中可见PMCA2强表达,毛细胞和支持细胞的胞体外侧膜可见PMCA3弱表达,PMCA4几乎不表达。4种PMCA亚型在球囊表达的剪接体分别为PMCA1x/b、PMCA2w/b、PMCA3z/(a, b)和PMCA4x/b,它们在椭圆囊的表达类型与球囊相同。结论 PMCA1-4在成年大鼠前庭器官的表达部位存在差异,这4种PMCA亚型的剪接体类型也各不相同。这种差异性可能是为了满足前庭组织和亚细胞结构域对Ca²⁺     

质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达

目的：通过 Western blot 方法检测质膜钙 ATP 酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms 1～3,PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane,BM）的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法①取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过 Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。②取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过 Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。③取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800 ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于 Western blot检测PMCA2的表达。结果①在20μg 的 P2和 P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达（分别为0．126±0．024、0．131±0．012）,PMCA2表达水平较高（分别为4．16±0．528、4．25±0．319）,PMCA3几乎没有表达（均为0）,三者间差异有统计学意义（P＜0．05）。②在3μg 的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平（4．571±0．336）高于P2大鼠（3．622±0．285）,差异有统计学意义（P＜0．05）。③PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2．5 ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。     

质膜钙ATP酶异构体1～4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达

目的：研究质膜钙 ATP 酶异构体（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms,PMCAs）1～4（PM-CA1～4）的 A 端和 C 端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康 SD 大鼠10只,断头后分离出前庭器官（椭圆囊斑和球囊斑）,提取总 RNA,通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法,检测 PMCA1～4的 A 端和 C 端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑 PMCA1～4表达的剪接体分别为PMCA1x／b,PMCA2w／（a、b）,PMCA3z／（a、b、c）和 PMCA4（x、z）／b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PM-CA2、PMCA3和 PMCA4之间表达的 A 端和 C 端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些 PMCA 亚型有着不同的 Ca2＋调节需求。     

颈部脂肪瘤累及颌下腺及腮腺1例

患者,女,24岁。因左颌下肿块3年余收入院。患者3年前无意中发现左颌下肿块,约樱桃大小,间断性疼痛且反复发作,外院曾行相关抗炎对症处理（具体不详）,效果不佳。体查：左颈部胸锁乳突肌前缘可触及2．5cm×2．0cm×1．5cm大小肿块,质软,活动度尚可,无压痛,颈软。心肺腹等均未见明显异常。