PCR技术检测DMD/BMD的策略和方法

假肥大性肌营养不良 (ＤＭＤ/ＢＭＤ)是由营养不良性基因突变引起的Ｘ 连锁性疾病。应用分子遗传学分析方法检测突变 ,在常规诊断实验中很难实现 ,主要是由于基因的大小和结构所决定的。这段基因长度为 2 4Ｍｂ ,包括 79个外显子 ,这些外显子由 14ｋｂ的ｍＲＮＡ编码。每个外显子均 <2 0 0ｂｐ ,而内含子却在 10 9ｂｐ到 2 0 0ｋｂ以上变化不等。由于发生新突变 (约占ＤＭＤ的 1/ 3) ,基因重组率高于正常水平 (约 10 % ) [1 ] 以及种系镶嵌现象 ,进一步阻碍了其研究[2 ] 。1　策　略建立一套固定的基因诊断程序来分析所有的ＤＭＤ/ＢＭＤ是…     

LightCycler实时监测PCR定量分析血清HBV DNA

目的 检验LightCycler实时监测PCR（real-time detection PCR,RTD-PCR)对血清中HBV DNA定量检测的灵敏性和可重复性，探讨HBV血清标志物与HBV DNA定量的关系。方法 HBV定量按深圳匹基公司乙肝PCR荧光检测试剂盒使用说明，对乙肝标志物已明确的773例血清中HBV DNA定量结果进行统计分析。结果 实时监测PCR对血清中HBV DNA定量检测的灵敏性高，可检测低至1000拷贝／ml血清；可重复性好，批间误差＜20％；各种标志物类型的血清HBV DNA含量分布情况表明，HBV血清标志物中HBeAg与HBV DNA含量有明显的关系，一般HBeAg阳性血清HBV DNA含量较高，但也有相当一部分例外。结论 LightCycler实时监测PCR对血清中HBV DNA定量检测灵敏性高可重复性好；仅根据HBV血清标志物往往不能确定乙肝患者HBV DNA复制水平的高低，HBV DNA定量检测具有十分重要的临床意义。     

PCR与ELISA检测3815例血清中HBV—DNA的对比分析

为更清楚地了解乙肝病毒标志物和ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ之间的相互关系，我们用两种方法同时进行检测，结果表明：ＰＣＲ与血清标志物ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗ＨＢｃ，抗ＨＢｅ有着良好的相关性，而且ＰＣＲ更灵敏，更特异，尤其对乙肝标志物全阴性的患者更具有价值。ＥＬＩＳＡ法也具有ＰＣＲ不可替代的作用。     

应用聚合酶链式反应检测myc族癌基因

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术的应用简化了基因分析和检测过程。在PCR扩增过程中,引物决定产物合成的起点和方向、其顺序决定产物的特异性。选择基因间同源DNA顺序作引物,通过PCR可以扩增同源基因和基因家族。我们称这种使用一对引物能同时扩增几个或多个基因的方法为“通用引     

三温式PCR检测婴儿呼吸道感染性疾病中的CT—DNA

沙眼衣原体(CT)是婴儿呼吸道感染性疾病的重要病原菌.长期以来,应用血清学检测CT敏感性低、特异性差,且CT的常规培养颇为困难.近年来随着PCR技术的问世,感染性疾病的基因诊断在临床上的应用和推广,同时也为快速诊断CT在儿科呼吸系统疾病中的感染提供了灵敏而特异的手段.现将我院对患有呼吸道感染性疾病的124例婴儿的咽分泌物用PCR技术检测CT-DNA的结果报告如下.     

逆转录－套式PCR检测血清中丙肝病毒RNA

利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度和特异性。经逆转录和两轮ＰＣＲ扩增，可检出１×１０－３ｕｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。研究了影响ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ检测的各种因素，并对ＲＮＡ分离及ＲＴ－ＰＣＲ反应体系进行了优化，在此基础上研制了ＨＣＶ的ＰＣＲ检测试剂盒。     

运用聚合酶链反应技术检测结核分枝杆菌

ＰＣＲ检测结核分枝杆菌是一种高效的实验方法，具有极高的敏感性和特异性；检测出结果所用时间比生物培养法综合了约１００倍，比涂片法更加敏感，甚至可检测到１个结核杆菌。     

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值姜艳，谭玉芹，鞠吉雨，冯永堂，王健（潍坊市第二人民医院潍坊２６１０４２潍坊医学院免疫学教研室）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是具有灵敏、快速、特异的一基因诊断技术。我们对结核性胸膜炎的胸水标本行ＰＣＲ结核菌检测，同时用胸...