安体优I抑制肿瘤淋巴管生成的实验研究

目的：观察安体优I对615小鼠HCa—F肝癌淋巴道转移的影响,探讨其作用机理。方法：生理盐水、干扰素和安体优1分别作用于动物模型,3周后检测转移淋巴结计数及转移率;免疫组化检测VEGF—C和Flt-4,5’-Nase—ALP双重组织化学法检测淋巴管微密度。结果：模型组、0l—IFN组和中药组转移淋巴结计数分别为5．88±2．30、4．13zl：1．64和3．50±1．91个;淋巴结转移率分别为78．6％、61．1％和57．4％;微淋巴管密度分别为25．25±4．59、22．384-4．41和21．75±4．71;VEGF—c的阳性率分别为87．5％、25．0％和25．0％,Fit-4阳性率分别为100．O％、37．5％和50．0％,中药组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）;结论：安体优I具有抑制615小鼠HCa—F肝癌淋巴道转移作用,其机制可能与下调淋巴管生成信号通路VEGF—c及其受体Fit-4的表达,抑制肿瘤淋巴管生成相关。     

乳腺癌组织内NF—κBp65的表达与淋巴转移的关系

目的：研究乳腺癌组织内细胞核因子（NF—κBp65）与血管内皮生长因子-c（VEGF—C）的表达及意义。方法：采用SABC免疫组化染色法检测乳腺癌组织及癌旁对照组织内NF—κBp65与VEGF—C蛋白的表达,并分析二者的相关性及与临床病理因素的关系。结果：乳腺癌组织内NF—κBp65蛋白表达的阳性率为76．0％,明显高于癌旁对照组织30．0％（P〈0．05）;乳腺癌组织内VEGF—C蛋白表达的阳性率为84．O％,明显高于癌旁对照组织20．0％（P〈0．05）;乳腺癌组织内NF—κBp65蛋白与VEGF—C蛋白的表达呈正相关（1=0．53,P〈0．05）,并且均与肿瘤淋巴转移密切相关。结论：乳腺癌组织内NF—κBp65的高表达可上调VEGF—C表达,进而导致肿瘤周围淋巴管增生、扩张,促进肿瘤细胞向区域淋巴结转移。     

乳腺癌组织和血清中内皮细胞抑制素VEGF表达与肿瘤血管生成

目的:研究乳腺癌患者癌组织和血清内皮细胞抑制素(ES)、VEGF表达和肿瘤血管生成间的关系,初步探讨乳腺癌血管生成调节机制.方法:采用免疫组化法检测59例乳腺癌组织ES、VEGF表达及其微血管密度(MVC);分别采用竞争性酶联免疫试验和ELISA测定患者乳腺癌组织和手术前、后血清ES及VEGF水平.结果:1)癌组织ES、VEGF阳性表达率分别为69.5%和59.3%,明显高于癌旁组织(P＜0.005).2)手术前乳腺癌组血清ES和VEGF水平显著增高;手术3周后,血清VEGF水平明显下降,而ES仍保持在较高水平.3)癌组织VEGF表达、组织和血清VEGF水平间具有密切相关性(P＜0.05);癌组织ES表达和血清ES水平间仅有弱的关联(P=0.06).4)癌组织VEGF阳性和阴性组,MVC分别为37.5±10.3和22.8±8.3,有显著性差异(P＜0.001),且血清VEGF浓度与MVC呈正相关(P＜0.0001,r=0.63);癌组织VEGF表达阴性组,血清ES与MVC显示负相关(P=0.03,r=-0.45).结论:VEGF是促进乳腺癌血管生成的直接相关因子,而ES可能是肿瘤及其转移的血管生成负调控因子.     

血管内皮生长因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)在直肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)在直肠癌中的表达意义.方法 选择60例直肠癌患者为研究对象,并选取同期体检健康者60例作为对照组.使用免疫化学发光法和免疫组化法分别测定血清CEA水平和VEGF蛋白表达水平,分析其表达水平及临床关系.结果 ①研究组血清中CEA检测值明显高于对照组,P＜0.05;②在不同直肠癌TNM分期中,肿瘤组织中CEA阳性率除T1、T2组之间无统计学差异(P =0.153)外,其余各组比较均有统计学差异(P＜0.05);在N分期不同阶段,肿瘤组织CEA阳性率各组间比较差异有统计学意义;在不同M分期中,CEA阳性率分别为43.8％ (M0)、88.7％ (M1),组间比较差异有统计学意义;在不同病理分期中CEA阳性率:Ⅰ期～Ⅱ期与Ⅲ期～Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05),Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅲ期与Ⅳ期组间比较差异没有统计学意义(P＞0.05);③肿瘤组织中VEGF表达与肿瘤浸润程度(T分期)有关(P=0.01),与淋巴转移程度(N分期)相关(P-0.03),与临床病理分期有相关性(P=0.009).结论 血管内皮生长因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)均与直肠癌的发病密切相关,并与临床TNM分期表现出明显相关性,对直肠癌的临床诊断、治疗和预后有重要意义.     

VEGF反义RNA对人食管癌细胞抑制作用的研究

目的: 研究血管内皮生长因子(VEGF)反义RNA对人食管癌细胞的抑制作用,探讨以VEGF反义RNA进行食管癌基因治疗的可行性.方法: 采用脂质体法将反义VEGFcDNA质粒转染入食管癌细胞TE-1;用MTT法检测细胞增殖情况;用免疫组化法检测VEGF蛋白表达;原位杂交和RT-PCR技术检测VEGFmRNA的表达.流式细胞术检测细胞的凋亡率和周期分布.结果: 被反义VEGFcDNA质粒转染的食管癌细胞有外源性VEGF反义基因的整合及表达,该细胞的VEGFmRNA及蛋白表达水平降低,但细胞生长速率无明显改变,未发生明显凋亡现象;接种裸鼠后,形成肿瘤的时间明显延长,肿瘤的体积和重量明显减小.结论: VEGF反义RNA可抑制食管癌细胞VEGF表达和裸鼠体内的肿瘤生长.该表达体系为食管癌基因治疗的进一步研究奠定了基础.     

平调饮抗肿瘤作用的实验研究

背景与目的:建立H22肝癌腹水瘤荷瘤小鼠模型,通过给予模型鼠平调饮灌胃评价其抗肿瘤作用.材料与方法:用H22腹水肝癌株种植于小鼠右腋皮下,致移植性肿瘤,建立H22肝癌腹水瘤荷瘤小鼠模型.将模型鼠分成阴性对照组,平调饮组,平调饮+5-Fu组和5-Fu组,共4组,各组模型鼠分别灌胃生理盐水、平调饮、平调饮+5-Fu和5-Fu,连续灌胃10 d后,观察瘤体大小、胸腺指数、脾脏指数、抑瘤率、生命延长率和VEGF在肿瘤及肿瘤周围组织中的表达.结果:平调饮组肿瘤平均瘤体、VEGF值减小,胸腺指数、脾脏指数、抑瘤率(48.6%)及生命延长率(168.3%)增高.结论:平调饮可提高胸腺指数,降低5-Fu对免疫功能的毒性作用,显著延长荷瘤小鼠的生存期.平调饮可能通过促进肿瘤细胞分化成熟,抑制肿瘤细胞增殖,降低肿瘤组织和肿瘤周围组织中VEGF表达,而对H22腹水型小鼠肿瘤的发展起抑制作用.     

大鼠肺鳞癌发生发展过程中肿瘤血管生成及血液供应研究

目的　探讨肺癌发生发展过程中肿瘤血管生成和血液供应 ,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体Flk 1与肿瘤血管生成的关系。方法　 10 0只Wistar大鼠左肺下叶支气管灌注致癌质碘油 ,分批处死获取肺鳞癌癌变及进展期病变标本 ,使用油画颜料染成黄、绿两种颜色的液态硅橡胶分别灌注支气管动脉与肺动脉 ,免疫组化检测病变组织中VEGF、Flk 1的表达及vWF染色切片上的微血管密度 (MVD)。结果　经支气管动脉灌注黄色液态硅橡胶显示 ,肿瘤病灶呈黄色的新生血管团与曲张的支气管动脉相连通 ,镜下见癌巢间质肿瘤微血管腔充盈硅橡胶颗粒 ;经肺动脉灌注绿色液态硅橡胶 ,肿瘤区绿色的血管呈不连续的枯树枝、断枝、残枝状 ,与肿瘤血管不连续 ,镜下肿瘤微血管腔无硅橡胶颗粒。原位癌的MVD计数 ( 3 9.5 0± 12 .60 )与不典型增生 ( 8.92± 3 .80 )及侵袭癌 ( 61.0 5± 19.92 )比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。从支气管粘膜上皮增生→鳞状化生→不典型增生→原位癌→侵袭癌 ,VEGF和Flk 1阳性系数逐渐升高。MVD与VEGF和Flk 1表达均呈正相关 (r分别为 0 .9798和 0 .90 78,P <0 .0 0 5 )。结论　肺癌新生血管形成是大鼠肺鳞癌发生发展的重要现象 ,新生的肿瘤血管与支气管动脉相连通 ,与肺动脉不相连通 ,证明肺鳞癌发生     

VEGF反义寡核苷酸抑制大鼠胶质瘤生长的时间与剂量的效应关系

目的在大鼠脑内原位注射反义寡核苷酸观察胶质瘤的生长抑制情况的时间与剂量的效应关系。方法所有大鼠均在立体定向导引下右尾状核区接种1×106C6胶质瘤细胞。不同时间和剂量VEGF反义寡核苷酸均在立体定向导引下原穿刺靶点注射。其中实验Ⅰ组在接种细胞的同时原位注射1000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸,而实验Ⅱ组则同时注射2000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸。对照Ⅰ组为对照。实验Ⅲ和Ⅳ组在细胞接种后的1和2周各原位注射1次,共2次,每次实验Ⅲ组为1000μmol/L、实验Ⅳ组为2000μmol/L的VEGF反义寡苷核酸。对照Ⅱ组为对照。实验V组仅在接种后2周注射1次2000μmol/L的VEGF反义寡核苷酸,并设对照Ⅲ组为对照。实验3周时处死所有的大鼠,解剖出全脑标本,观察肿瘤的生长情况,测量肿瘤大小。结果实验Ⅰ组的抑瘤率为94.5％,实验Ⅱ组的抑瘤率为100％。实验Ⅲ组的抑瘤率为91.5％,实验Ⅳ组为100％,实验Ⅴ组抑瘤率为87.8％。实验组和对照组的肿瘤体积比较有非常显著的差异。结论 原位应用VEGF反义寡核苷酸能取得很好的抗血管生成的治疗效果,抑瘤效果有明显的浓度依赖性。原位早期使用足量反义核酸能取得更好的效果。     

Survivin在舌鳞癌中的表达及其与血管内皮生长因子的相关性

目的：研究Survivin在舌鳞状细胞癌（tongue squamous cell carcinoma,TSCC）中的表达及其与血管内皮生长因子vascular endothelial growth factor,VEGF之间的相关性。方法：采用免疫组化pv9000法检测45例舌鳞癌组织Survivin、VEGF蛋白的表达。结果：Survivin、VEGF在舌鳞癌组织中表达水平为68．9％、64.4％,显著高于正常舌黏膜组（P〈0．01）。Survivin表达与舌鳞癌组织学分级、TNM分期相关（P〈0．05）,与颈淋巴结转移密切相关（P〈0．01）。VEGF表达与舌鳞癌TNM分期和颈淋巴结转移密切相关（P〈0．05）。在舌鳞癌组织中Survivin、VEGF共同表达率为53.3％,其表达阳性程度呈显著正相关。结论：Survivin、VEGF的表达与舌鳞癌临床病理特征相关,Survivin、VEGF在舌鳞癌中起相互协同作用。     

新加良附方联合5-Fu对荷人胃癌裸鼠血清VEGF、bFGF水平的影响

目的:观察新加良附方联合5-Fu对荷人胃癌移植瘤裸鼠血清血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、碱性成纤维生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,b FGF)水平的影响。方法:建立移植性人胃癌细胞(SGC-7901)裸鼠移植瘤模型,并将模型动物随机分为空白组、5-Fu组及新加良附方高、中、低剂量组、联合给药组(新加良附中剂量+5-Fu组)6组。新加良附方高、中、低剂量组给药剂量分别为10 g·d-1·kg-1、5 g·d-1·kg-1、2.5 g·d-1·kg-1;5-Fu组给药剂量为17mg·d-1·kg-1;空白组给予等量无菌生理盐水,新加良附方联合5-Fu组剂量为新加良附方中剂量(5 g·d-1·kg-1)联合应用5-Fu(17 mg·d-1·kg-1)。给药结束后,采用免疫学方法(ELISA)检测裸鼠血清中VEGF、b FGF的含量。结果:VEGF含量显示:联合给药组,5-Fu组,新加良附大、中、小剂量组裸鼠血清中含量较空白对照组均明显降低(P0.01),新加良附各剂量组对VEGF含量减低作用具有一定的剂量依赖性,联合用药组VEGF含量低于5-Fu组、新加良附中剂量组,但无统计学意义(P0.05)。b FGF含量显示:联合给药组,5-Fu组,新加良附大、中、小剂量组裸鼠血清中含量较空白对照组均明显降低(P0.01)。结论:新加良附方可以下调人胃癌裸鼠的血清中VEGF、b FGF表达水平,提示新加良附方具有一定抗胃癌新生血管生成作用。