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991.
结合平板分离法、poly-P和PHB染色以及柠檬酸铁还原实验,从污水处理厂活性污泥中分离获得一株以Fe(Ⅲ)为电子受体厌氧聚磷的聚磷菌株AP3, 其16S rDNA与Pseudomonas mosselii ATCCBAA-99的同源性为99%。菌株AP3于柠檬酸铁液体培养基和无铁液体培养基中厌氧避光、27 ℃静置培养,在含有Fe(Ⅲ)的培养基中比在无Fe(Ⅲ)的培养基中生长好;菌株AP3在无Fe(Ⅲ)的培养基中,表现出典型的厌氧释磷特征,释磷量为3.68 mg·L-1;在含有Fe(Ⅲ)的培养基中,先厌氧释磷,释磷量为6.62 mg·L-1, 10 h之后开始厌氧聚磷,聚磷量为5.89 mg·L-1。菌株AP3能以Fe(Ⅲ)为电子受体,具有厌氧聚磷特征。 相似文献
992.
993.
目的构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S。方法体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAd5/F35在Ad5/F35-BJ5183感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S,经PacⅠ酶切线性化后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,获得重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,经2轮扩增后,测定病毒滴度;采用PCR及Western blot法检测感染细胞中HF2S基因的转录及蛋白的表达。结果重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S及重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S经鉴定均构建正确;经包装及2轮扩增后,重组腺病毒Ad5/F35-HF2S病毒滴度可达1013IU/ml;经PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的HF2S基因能够在AD-293细胞中表达。结论已成功构建了表达HF2S基因的重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,为研究Grb2-SH2结构域在CML中的基因治疗和作用机制奠定了基础。 相似文献
994.
目的观察β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对3T3-L1前脂肪细胞分化及相关基因mRNA转录的影响,并探讨其抗肥胖的作用机制。方法将3T3-L1前脂肪细胞分为4组:空白对照组、常规分化组、BRL37344处理组、常规分化+BRL37344组。采用油红O染色法初步判断各组脂肪细胞的分化情况,RT-PCR法检测各组脂肪细胞分化过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(Peroxisome proliferators activated receptorγ2,PPARγ2)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte fatty acidbinding protein,aP2)、脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA的转录水平。结果经不同浓度的BRL37344处理8 d后,3T3-L1前脂肪细胞中PPARγ2、aP2、LPL基因mRNA的转录水平均下调,且呈剂量依赖性,其中10-7mol/L BRL37344作用明显;在不同的分化时间点,经10-7mol/L BRL37344处理后,细胞分化相关基因与相应对照组相比,均呈下调趋势(P<0.05)。结论β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344可能通过下调脂肪细胞分化相关基因的转录,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化。 相似文献
995.
《中国生物制品学杂志》2013,(10)
目的观察肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂GW3965预处理对大鼠肝移植缺血再灌注损伤(ischemiareperfution injury,IRI)的影响及其对肝功能的保护作用。方法将雄性SD大鼠随机分为2组,GW3965预处理组于供体大鼠尾静脉注射LXR激动剂GW3965,0.3 mg/kg;对照组于相同部位注射相同剂量的生理盐水。参照改进的Kamada两袖套法建立大鼠原位肝移植模型,分别于肝移植术后3、6、24 h,采用全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,Western blot法测定移植肝脏组织中白细胞介素-1受体相关激酶-4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4,IRAK-4)、干扰素调节因子3(interferon-regulator 3,IRF3)蛋白的表达,凝胶迁移试验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)测定核因子-kappa B(nuclear factor-κB,NF-κB)的相对活性度,并观察肝脏组织的病理学变化。结果与对照组比较,GW3965预处理组血清中ALT、TNF-α含量在各时间点均明显降低(P<0.05),肝脏组织中IRAK-4、IRF3蛋白的表达以及NF-κB相对活性度也明显降低(P<0.05);GW3965预处理组各时间点肝组织的损伤均较对照组明显减轻。结论 LXR激动剂GW3965可抑制TLR4信号通路中的IRAK-4、IRF3蛋白的表达水平和NF-κB的活化,从而减轻肝移植IRI,在肝脏移植IRI中起到保护作用。 相似文献
996.
目的探讨云芝糖肽(polysaccharopeptide,PSP)对乳腺癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的作用。方法体外分离乳腺癌患者或健康人PBMC,并将其分别分为PSP组(分别加入终浓度为25μg/ml的PSP和终浓度为100μg/ml的PHA)和对照组(只加入终浓度为100μg/ml的PHA),采用TLR4单克隆抗体对各组细胞进行免疫荧光染色。将乳腺癌患者PBMC分为空白对照组、TLR4抗体组、PSP组和PSP+TLR4抗体组,采用Q-PCR检测各组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平。结果健康志愿者对照组PBMC荧光强度较强,而健康志愿者PSP组PBMC荧光强度较弱;乳腺癌患者PSP组与乳腺癌患者对照组相比,细胞荧光强度更弱。与空白对照组比较,TLR4抗体组PBMC IL-12和组TNF-α的表达水平均显著降低(P<0.05),PSP组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平均显著上调(P<0.05或<0.01);与PSP和TLR4抗体组比较,PSP+TLR4抗体组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α的表达水平均显著上调(P<0.05或<0.01)。结论 TLR4可能是PSP的作用受体之一。 相似文献
997.
目的研究阿昔莫司对巨噬细胞RAW264.7三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ATP binding cassette transporterA1,ABCA1)及其上游调控因子肝脏X受体α(Liver X receptor,LXRα)的影响,探讨其促进胆固醇逆转运(Reversecholesterol transport,RCT)、抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的可能机制。方法体外培养RAW264.7细胞,将细胞分为空白对照组(不含阿昔莫司)和不同浓度的阿昔莫司干预组(分别含5、10、25μg/ml阿昔莫司),作用24 h后,采用RT-PCR法检测各组细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平;Western blot法检测各组细胞中ABCA1和LXRα蛋白的表达;闪烁计数法检测各组细胞内胆固醇的流出。结果阿昔莫司呈浓度依赖性地增加RAW264.7细胞中ABCA1和LXRα基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)及细胞内胆固醇的流出率(P<0.01)。结论阿昔莫司可通过LXRα途径上调巨噬细胞ABCA1的表达,促使细胞内胆固醇流出,从而延缓AS的发生发展。 相似文献
998.
999.
1000.
放射治疗是目前脑胶质瘤综合治疗最重要的治疗手段之一,但恶性脑胶质瘤产生的耐辐射作用限制了它的临床作用.因此,寻找胶质瘤耐辐射新机制具有十分重要的意义.研究表明,在脑胶质瘤放射治疗中,表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)与脑胶质瘤的辐射敏感性,自噬与肿瘤辐射抗性产... 相似文献