Topical Quercetin and Resveratrol Protect the Ocular Surface in Experimental Dry Eye Disease

Purpose: To determine the anti-inflammatory effect of quercetin (QCT), resveratrol (RES), and their combination in a dry eye disease (DED) model.

Methods: 0.01% QCT, 0.1% RES, 0.01% QCT + 0.1% RES (QCT + RES) or vehicle were topically applied in a desiccating stress (DS) mice model. CD4⁺ T cells isolated from DS-exposed mice were transferred to athymic recipient mice. Corneal fluorescein staining, tear production, and tear cytokine levels were evaluated in DS-exposed mice, and conjunctival CD4⁺ T cell infiltration was evaluated in recipient mice.

Results: QCT (p < 0.001) and QCT + RES (p < 0.05) reduced corneal staining in DS-exposed mice. IL-1α tear concentration was reduced by QCT, RES, and QCT + RES (p < 0.05, 0.01 and 0.01, respectively) compared to DS + vehicle mice. CD4⁺ T cells increased in recipients of DS-exposed mice (p < 0.05) and were lower in recipients of QCT- and RES-treated mice (p < 0.05).

Conclusion: The anti-inflammatory effect of QCT, RES, and QCT + RES on DED-experimental model suggests that their topical application could be used for DED treatment.     

荧光光谱法研究锆离子存在下槲皮素及人血清白蛋白的相互作用

目的 采用荧光光谱法研究有无锆离子(Zr4+)共存时槲皮素与人血清白蛋白(HSA)的相互作用.方法 于10 mL的比色管中,依次加入0.20 mol/L Tris-HCl缓冲溶液(pH 7.40) 2.50 mL,0.10 mol/L NaCl溶液1.0 mL,一定量的HSA溶液,Zr4+溶液,槲皮素溶液,用二次蒸馏水定容至10 mL.HSA荧光激发/发射波长为281/352 nm,激发和发射光狭缝宽度为3 nm,在波长300～500 nm内记录荧光光谱.结果 测得了有无锆离子存在时槲皮素-HSA结合反应的平衡常数和结合摩尔位点数分别为1.032×106 L/mol、2.964×105 L/mol,113、1.07;确定槲皮素-HSA的作用类型为静态猝灭过程.结论 锆离子、槲皮素对HSA荧光均有猝灭作用,而且二者共存时对HSA荧光有协同猝灭作用,其猝灭机制为槲皮素与锆离子形成配合物后再对HSA的荧光有猝灭作用,而不是槲皮素和锆离子各自猝灭的简单累加.     

HPLC测定白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素含量

目的:建立测定白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素含量的HPLC方法。方法:采用正交试验优化白花蛇舌草配方颗粒的提取工艺,用HPLC测定白花蛇舌配方颗粒中槲皮素和山奈素的含量。色谱柱为Hypersil ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%磷酸(45∶55),检测波长360 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。结果:槲皮素在0.09～0.72μg线性关系良好(r=0.999 9),山奈素在0.034 3～0.274 4μg线性关系良好(r=0.999 9),槲皮素、山奈素的平均加样回收率分别为100.80%(RSD 1.79%),101.75%(RSD 1.76%)。结论:该方法简便、快速、重复性好,可作为白花蛇舌草配方颗粒中槲皮素和山奈素的含量测定。     

东北产不同种质山楂果实成分的比较

目的:通过对山楂果实成分含量的测定,对东北产不同种质的山楂果实药材质量进行比较。方法:采用滴定的方法测定山楂果实中有机酸的含量;采用比色法分别测定果实中的可溶性糖及总黄酮的含量;采用HPLC同时测定果实中芦丁、金丝桃苷、槲皮素3种黄酮的含量,并对测定结果进行聚类分析以及差异显著性检验。结果:不同种质的山楂果实的成分含量差异较大。结论:"绵山里红"有药用价值,但食用价值更高;"铁山里红"食用价值低而药用价值高。     

碳糊电极阳极吸附伏安法测定中成药及保健品中的槲皮素

目的:建立碳糊电极(CPE)阳极吸附伏安法测定中成药及保健品中槲皮素的方法.方法:用石墨粉-液体石蜡(4∶1)制备CPE,在HAc-NaAc(pH 3.6)缓冲液中,槲皮素在0.401 V(vs.Ag-AgCl)产生一灵敏的吸附氧化峰.结果:槲皮素浓度在3.13×10-7～1.0×10-5mol·L-1与峰电流呈良好的线性关系(r=0.996 0),检出限为2.1×10-8mol·L-1,应用该法测定中成药及保健品中的槲皮素取得了较好的结果.结论:该法准确可靠、经济实用,可用于槲皮素的测定.     

关于完善《中国药典》2010年版炒槐花质量标准的研究

目的:建立炒槐花中总黄酮、芦丁、槲皮素含量限度要求,为完善2010年版药典中该饮片的质量标准提供实验数据.方法:采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量.采用HPLC测定芦丁和槲皮素的含量,均以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;芦丁的流动相为甲醇-1％冰醋酸溶液(32∶68);槲皮素的流动相为甲醇-水-冰醋酸(44:56∶0.4);检测波长均为257 nm.结果:炒槐花(花)中总黄酮、芦丁、槲皮素含量均不得低于8％,6％,0.35％;炒槐花(花蕾)中总黄酮、芦丁、槲皮素含量均不得低于20％,16％,0.3％.结论:本文方法简便易行、重复性好、结果准确,所制定炒槐花的质量标准提高了该饮片的质控水平,为其临床应用的安全性和有效性提供了实验数据.     

RP-HPLC同时测定蒙药查干-扫日老-4汤中槲皮素和甘草苷

目的建立蒙药查干-扫日老-4汤(甘草、北沙参、拳参、紫草茸)中槲皮素和甘草苷同时测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法采用超声提取法制备供试品。分析色谱柱为symmetry Cl8(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(35∶65);检测波长273 nm;体积流量0.8 mL/min。结果槲皮素和甘草苷分别在0.56～5.6μg和0.50～5.0μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(相关系数分别为0.999 9和0.999 8)。平均加样回收率为97.64%和98.54%,RSD为1.02%和1.44%。结论该方法简便、准确、重复性良好,可作为蒙药查干-扫日老-4汤中槲皮素和甘草苷的同时测定方法。     

自噬对槲皮素诱导人肝癌SMMC-7721细胞死亡的影响

 目的 研究自噬在槲皮素（quercetin,Que）诱导的人肝癌细胞系SMMC-7721死亡中的作用。方法 采用四甲基偶氮唑蓝法测定槲皮素对SMMC-7721细胞的抑制作用;单丹磺酰戊二胺、免疫荧光法观察给药后自噬的发生; 乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率、蛋白印迹法观察槲皮素诱导的SMMC-7721细胞死亡的分子机制。结果 槲皮素对SMMC-7721生长有显著抑制作用,呈明显的时间、剂量依赖性; 槲皮素可激活SMMC-7721 细胞的LC3的表达、诱导自噬的发生;乳酸脱氢酶漏出率实验结果表明,在槲皮素给药前用3-甲基腺嘌呤（3-MA）阻断自噬或者氯喹碱化溶酶体,可增强槲皮素对SMMC-7721细胞的细胞毒作用; 蛋白印迹结果显示,槲皮素可使SMMC-7721细胞溶酶体组织蛋白酶B的表达明显增强。结论 槲皮素能明显抑制SMMC-7721 细胞的生长,并诱导其发生自噬;自噬激活能降低槲皮素对SMMC-7721细胞的毒性;自噬的发生与溶酶体酶组织蛋白酶B表达增强相关。     

高效液相色谱法测定肾石通颗粒中槲皮素的含量

目的建立肾石通颗粒中槲皮素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法Krom asil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相,检测波长:370 nm,流速:1.0 m l.m in-1,柱温:40℃。结果HPLC法可测定肾石通颗粒中槲皮素的含量,结果验证槲皮素在5.20~20.80 mg.L-1的浓度范围内峰面积与量呈良好的线性关系,回归方程为:A=3.858×105×C 8.094×103(r=0.99998,n=7);平均加样回收率可达98.9%(RSD=0.40%,n=9)。结论该法具有专属、可靠、灵敏度高、干扰小等特点,可作为肾石通颗粒中槲皮素的含量测定方法。