赖氨大黄酸对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用及其机制

目的:观察赖氨大黄酸(RHL)对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用腹腔注射百草枯方法建立活性氧引起血管损伤小鼠模型。将30只C57小鼠随机分为对照组(n=10)、百草枯模型组(n=10)和RHL干预组(n=10)。RHL干预组小鼠在造模前1周灌胃给予RHL,对照组和百草枯模型组灌胃给予等体积蒸馏水。百草枯模型组和RHL干预组腹腔注射百草枯,对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周注射1次,持续2周。造模2周后检测血清丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;DCFH-DA染色观察血管活性氧水平;HE染色观察腹主动脉病理表现;Western blotting 法检测血管损伤相关基因的表达。结果:与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织小鼠血清SOD和GSH-Px活性下降(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05);与百草枯模型组比较,RHL干预组MDA水平下降(P<0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05);DCFH-DA和HE染色,百草枯模型组小鼠血管组织血管组织活性氧水平升高(P<0.05),血管结构破坏, RHL干预组血管活性氧水平下降(P<0.05),病理变化明显减轻。Western blotting法检测,与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和caspase-3表达水平降低(P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,RHL干预组小鼠血管组织 eNOS和caspase-3 表达水平升高 (P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平降低(P<0.05)。结论:百草枯能够诱导体内活性氧水平升高引起血管细胞损伤,RHL通过清除活性氧,上调eNOS表达,下调caspase-3裂解片段表达来拮抗百草枯的作用。     

Central retinal artery occlusion—A new,provisional treatment approach

The retinal ganglion cells infarcted in central retinal artery occlusion (CRAO) are the somata of the optic nerve axons, part of the central nervous system. Consequently, CRAO with inner retinal infarction is a small vessel stroke, usually with the devastating consequence of severe visual loss in the affected eye. At present, there is no generally accepted, evidence-based therapy of nonarteritic CRAO in contrast to ischemic cerebral stroke that has well-accepted treatment protocols. Widely divergent and controversial therapeutic options for CRAO reflect the desperation of treating physicians and disparate conflicting studies. We examine reasons why treatment of nonarteritic CRAO remains problematic and then suggest a provisional new approach to treatment based on updated understanding of CRAO pathophysiology and analysis of current therapeutic options and their rationales.     

肾康注射液的配伍稳定性考察

摘 要 目的：考察肾康注射液与10%葡萄糖注射液的配伍稳定性。方法: 将肾康注射液与10%葡萄糖注射液的配伍液置于室温、光照（4 500Lx）和40℃恒温条件,考察不同条件下0,1,2,4,8,12,24,48 h配伍液的性状、pH、不溶性微粒,以及大黄酸和大黄素的含量。结果: 配伍液在放置过程中性状、pH无明显变化。室温条件下,配伍液在4 h后微粒数有所增加;光照和40℃恒温条件下,2 h时配伍液的微粒数明显增加。大黄酸和大黄素的含量随放置时间的延长而下降,其中大黄酸在光照条件下降最明显,大黄素在光照和40℃恒温条件下降低将近10%。结论:肾康注射液与10%葡萄糖注射液配伍后最好在4 h内输注完,滴注过程应在室温条件（10～30℃）下进行,并避免强光照射。     

小承气汤中大黄酸在大鼠体内的药动学研究

目的 研究小承气汤中大黄与厚朴、枳实配伍对大黄酸在大鼠体内药动学过程的影响.方法 大鼠分别给予大黄及小承气汤,高效液相色谱法测定大黄酸在大鼠体内血药浓度变化.色谱柱为Diomansil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428 nm;流速为1.0 mL/min.血药浓度数据采用3P97药动学软件进行分析.结果大黄酸血药浓度在1.0～15 μg/mL范围内线性关系良好.大鼠给予大黄及小承气汤后,大黄酸血药浓度-时间曲线均符合二房室模型,其主要药动学参数AUC、Cmax和CL均存在显著性差异(P＜0.05).结论 大黄与厚朴、枳实配伍后,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度降低.     

HPLC法测定牛黄解毒片中5种成分的含量

目的:建立一种同时测定牛黄解毒片中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚的含量测定方法.方法:以XltimateTM XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,柱温35℃,流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min-1;检测渡长:430 nm;进样量10μl.结果:芦...     

HPLC法同时测定利胆排毒口服液中大黄酸、大黄素、大黄酚的含量

目的:建立HPLC法同时测定利胆排毒口服液中大黄酸、大黄素、大黄酚含量的方法.方法:采用Atlantis T3柱(150 mm×4.6 mm,3 μm),甲醇-0.05%磷酸溶液(85:15)为流动相,流速:0.8 ml·min-1,检测波长:254 nm,柱温:30℃.结果:大黄酸、大黄素、大黄酚分离度好,可排除其他物质的干扰.大黄酸在16.71～334.20 μg·ml-1的范围内有良好的线性关系,平均回收率为98.85%,RSD为0.47%;大黄素在2.06～41.28 μg·ml-1范围内有良好线性关系,平均回收率为96.95%,RSD为1.03%;大黄酚在4.46～111.60 μg·ml-1范围内有良好线性关系,平均回收率为97.97%,RSD为0.67%.结论:本方法可同时测定大黄酸、大黄素、大黄酚的含量,准确度高,重复性好,可为利胆排毒口服液质量控制提供依据.     

高效液相色谱法测定新肾炎胶囊中蒽醌类化合物的含量*

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定新肾炎胶囊中蒽醌类化合物大黄酸、大黄素、大黄酚的含量。方法采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-1%醋酸(70:30)为流动相,检测波长254 nm,柱温25 ℃;流速 1 mL·min-1。结果大黄酸、大黄素、大黄酚检测浓度分别在4.96～24.80 μg·mL-1 (r＝0.999 6)、6.58～32.91 μg·mL-1(r＝0.999 9)、15.11～75.55 μg·mL-1(r＝0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.78%,98.13%,99.29%。结论制剂制备工艺稳定,建立的含量测定方法简便、可靠,可用于制定主要治疗成分大黄素、大黄酚的含量下限以及非主要治疗成分大黄酸的含量上限,进一步保障制剂安全。     

大黄酸对高糖所致肾小球系膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响探讨

目的 观察高糖对人肾小球系膜细胞(HMC) Wnt/β-catenin信号通路的影响及大黄酸的干预作用.方法 体外培养人肾小球系膜细胞,同步化后采用加有高浓度葡萄糖(30 mmol/l)联合不同浓度大黄酸的无血清培养基培养.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测量高糖(HG组)及大黄酸高浓度组(高糖十大黄酸10-4 mol/L,HG+R1组)、大黄酸中浓度组(高糖+大黄酸10-5 mol/L,HG+R2组)、大黄酸低浓度组(高糖十大黄酸10-6 mol/L,HG+R3组)干预后肾小球系膜细胞增殖活力.应用RT-PCR法检测正常培养及高糖作用后人肾小球系膜细胞Wnt/β-catenin基因的表达及大黄酸对其表达的影响.结果 ①对系膜细胞的抑制作用:与正常对照组(NG)组24h、48 h、72 h (OD值分别为0.169±0.051、0.228±0.074、0.285±0.075)比较,HG组(OD值分别为0.307±0.074、0.507±0.038、0.711±0.075)、HG+R1组(OD值分别为0.241±0.027、0334±0.015、0.499±0.063)、HG+R2组(OD值分别为0.244±0.081、0.386±0.033、0.531±0.011)、HG+R3组(OD值分别为0.277±0.036、0.407±0.057、0.594±0.042)细胞增殖均明显上升,差异均有统计学意义(P＜0.05、P＜0.01);与HG组各时点相比,HG+R1组、HG+R2组、HG+R3组在24 h呈下降趋势,48 h、72 h下降趋势显著,表现为时间、浓度依赖性(P＜0.05、P＜0.01).②在基础状态下,系膜细胞表达一定量的Wnt/β-catenin经高糖刺激后,Wnt/β-catenin基因表达上调(P＜0.05),HG+R1组、HG+R2组、HG+R3组均可明显下调高糖刺激引起的系膜细胞Wnt/β-catenin基因表达(P＜0.05).结论 大黄酸可能通过下调Wnt/β-catenin基因的表达抑制高糖引起的HMC增殖.     

大黄酸对内毒素血症小鼠保护作用的实验研究

目的:探讨大黄酸对内毒素血症小鼠的保护作用。方法:将45只雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组和大黄酸组,每组15只。空白组腹腔消毒注射生理盐水(10mg/kg),其余各组腹腔消毒注射LPS(10mg/kg)。治疗组于攻毒前0.5h、攻毒后1h和取血前0.5h给予大黄酸1.4mg.10g-1.d-1灌胃,空白组和模型同时按比例给予等量生理盐水。8 h后在无菌条件下采集心室血0.5mL进行血浆ET检测,取部分肝脏进行免疫组化和生化检测,取肝进行组织学观察。结果:大黄酸组对小鼠内毒素、TNF-α、IL-1β、IL-10、MDA、SOD和肝组织病理炎症等改善优于其他组。结论:大黄酸对小鼠内毒素血症有显著的保护作用,其途径可能通过改善微循环,改善肝脏的能量代谢,减轻肝脏的脂质过氧化反应,降低机体的内毒素水平,从而减少炎性因子的产生,阻断内毒素血症的生物学效应。     

HPLC法同时测定利胆排石片中4种蒽醌类成分的含量

目的建立以高效液相色谱法同时测定利胆瓣石片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量测定的方法。方法色谱柱为依利特Sino Chrom ODS-BP柱（4．6mm×200nm,5Vm）,流动相为甲醇．0．1％磷酸溶液（80：20,v／v）,流速为1．0mL·min^-1。检测波长为254nm,柱温为室温。结果大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的浓度分别在0．2828-4．242ug·mL^-1、1．212～18．18ug·mL^-1、0．4880～6．720ug·mL^-1和0．3252--4．878ug·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别0．9999、0．9998、0．9997、0．9996;平均回收率分剐为99．8％、100．4％、100．0％和100．196。RSD分别为0．6％、0．4％、0．8％和0．7％。结论本方法简便、快捷,结果准确,重复性好,可作为利胆排石片的质量控制方法之一。