常润茶服用方法对蒽醌类物质溶出的影响及其通便作用的相关性研究

目的：以常润茶为例研究蒽醌类物质的加水量及浸泡次数等服用方法对有效成分溶出及通便作用的影响。方法：利用紫外分光光度法建立总蒽醌的含量测定方法,利用高效液相色谱法建立番泻苷A、番泻苷B、大黄酸的含量测定方法,考察不同浸泡次数、加水量下常润茶水浸液中有效物质的含量变化。利用洛哌丁胺复制便秘模型进行通便作用的验证并探究常润茶对肠动力及黏液分泌的影响,观察不同浸泡次数、加水量对小鼠小肠推进率、首粒排黑便时间、5 h黑便粒数、粪便含水量以及结肠胃动素(MTL)、促胃液素(GAS)、生长抑素(SS)、P物质(SP)的影响。结果：加水量与蒽醌类物质的溶出正相关,加水60～100倍蒽醌类物质溶出差异不大;浸泡1次可将大部分蒽醌类物质溶出,从第2次浸泡开始,总蒽醌、番泻苷A、番泻苷B、大黄酸的含量均明显减小。动物实验结果显示加水倍数为40倍、60倍、100倍时,常润茶均可有通便作用,未出现腹泻等不良反应,60倍、100倍水量通便作用显著。加水100倍,反复冲泡多次通便作用不优于浸泡1次。结论：本实验为产品的精准应用提供实验依据,对于规范蒽醌类产品具有积极意义。     

大黄酸防治大鼠急性重型肝损伤的实验研究

目的探讨大黄酸（RH）对大鼠急性肝损伤的影响。方法连续2d灌胃硫代乙酰胺（TAA）制造急性肝损伤动物模型。26只Wistar大鼠随机分为正常对照组（N组）、TAA组和TAA＋RH组。T从＋RH组用RH30mg／kg灌胃,4d后制模,检测血浆丙氨酸（ALT）、一氧化碳（NO）内毒素水平的变化判定肝功能;检测全血黏度、血小板聚集率判定血液流变学变化;HE、Weigert染色及免疫组化法分别观察肝脏病理改变、肝脏微循环改变及肝脏一氧化氮合酶（eNOS和iNOS）的表达。结果TAA组血浆ALT、内毒素、NO、全血黏度、血小板聚集率明显高于N组（P〈0．05）;TAA＋RH组与TAA组相比,ALT、内毒素、NO、全血黏度、血小板聚集率显著降低（P〈0．05）;T从＋RH组与TAA组相比,肝脏eNOS表达上调而iNOS表达下调（P〈0．05）。结论RH通过降低内毒素水平,调节肝脏eNOS与iNOS表达,从而改善肝脏微循环,防治TAA所致的急性肝损伤。     

赖氨大黄酸对KK/HlJ糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制

目的：探讨赖氨大黄酸（RHL）对链脲佐菌素（STZ）诱导的KK/HlJ糖尿病（DM）小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并阐明其作用机制。方法：腹腔注射STZ （50 mg·kg^-1）并给予DM专属饲料制备KK/HlJ小鼠DM模型。将48只小鼠分为正常对照组、模型组、低剂量RHL治疗组（25 mg·kg^-1）和高剂量RHL治疗组（50 mg·kg^-1）,每组12只,共治疗16周。采用葡萄糖氧化酶法检测各组小鼠空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平,HE染色观察小鼠胰腺组织形态表现,免疫组织化学法检测小鼠胰岛组织中胰岛素水平,酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清胰岛素、C反应蛋白（CRP）和肝脏组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）及白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测小鼠肝脏组织中糖原合成相关基因（PI3K、AKT和GSK-3β）的磷酸化表达水平。结果：与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠FBG、TG和TC水平降低（P<0.05）,胰岛素水平无明显变化（P>0.05）。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠血清CRP水平和肝脏组织中TNF-α和IL-6水平降低（P<0.01）。HE染色,与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠胰岛形态有一定恢复,偶见炎症浸润;免疫组织化学染色,与模型组比较,低剂量RHL治疗组小鼠棕色颗粒状物质明显减少,而高剂量RHL治疗组小鼠胰岛中未见棕色颗粒状物质。与模型组比较,低和高剂量RHL治疗组小鼠糖原合成相关基因PI3K、AKT和GST-3β磷酸化表达水平升高（P<0.01）。结论：RHL对STZ所致KK/HlJ DM小鼠胰岛素抵抗有改善作用,其机制可能与RHL促进糖原合成有关。     

赖氨大黄酸抑制HER2信号通路对肺癌H460细胞的凋亡诱导作用

目的: 研究赖氨大黄酸（RHL）对肺癌H460细胞增殖、凋亡的影响及人类表皮生长因子受体2（HER2）信号通路在其中的作用,为RHL抗肺癌的临床实验研究提供依据。方法: 选取HER2高表达并处于对数生长期的H460细胞,随机分为空白对照组和25、50、75、100、125、150 μmol•L^-1 RHL组,采用MTT法检测各组细胞增殖活性。H460细胞随机分为空白对照组及50、100、150 μmol•L^-1 RHL组,流式细胞术检测各组细胞48 h凋亡情况,Western blotting法检测各组细胞48 h后凋亡相关蛋白和HER2信号通路蛋白的表达。结果: 细胞培养48 h后,不同浓度RHL组H460细胞存活率显著低于空白对照组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于空白对照组(P<0.05),RHL的增殖抑制作用和凋亡诱导作用呈剂量依赖性。不同浓度RHL组H460细胞Caspase-3、Caspase-7和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶 (PARP)的切割片段蛋白表达明显高于空白对照组 (P<0.05), HER2、AKT蛋白磷酸化水平和NF-κB蛋白的表达水平明显低于空白对照组(P<0.05)。结论: RHL可能通过抑制HER2/AKT/NF-κB信号通路诱导H460细胞凋亡。     

HPLC波长切换法同时测定茵栀祛黄胶囊中7种成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC波长切换法同时测定茵栀祛黄胶囊中栀子苷、甘草苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。方法: 采用Waters Sunfire C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;流动相：甲醇（A） 0.05%磷酸溶液（B）（梯度洗脱）,流速为1.0 ml·min^-1 ,柱温为25℃,检测波长(0~15 min：在238 nm波长下检测栀子苷和甘草苷;15~50 min：在254 nm波长下检测芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚),进样量为10 μl。结果: 栀子苷、甘草苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的线性范围分别为0.13～3.18 μg·ml^-1（r=0.999 8）、0.19～4.84 μg·ml^-1（r=0.999 7）、0.28～7.02 μg·ml^-1（r=0.999 9）、0.13～3.16 μg·ml^-1（r=0.999 9）、0.61～15.27 μg·ml^-1（r=0.999 9）、0.32～8.03 μg·ml^-1（r=0.999 9）、0.39～9.81 μg·ml^-1（r=0.999 9）;平均加样回收率分别为98.84%（RSD=0.74%）、99.34%（RSD=0.86%）、99.54%（RSD=0.30%）、99.56%（RSD=0.80%）、99.85%（RSD=0.41%）、99.57%（RSD=0.70%）、99.64%（RSD=0.30%）（n=9）。结论: 本文建立的HPLC含量测定方法,具有操作简便、专属性高、重复性良好、结果准确可靠的特点,可用于茵栀祛黄胶囊的质量控制。     

大黄酸在大鼠和比格犬体内的吸收动力学研究

目的：研究中药大黄的活性蒽醌单体大黄酸（rhein）在SD大鼠和Beagle犬体内的吸收动力学特征,为临床的进一步研究提供基础参数和依据。方法：采用HPLC-荧光检测法分别测定SD大鼠和Beagle犬在灌胃及静脉注射两种给药途径下单次给予不同剂量的大黄酸药物后,两种动物血浆样品中的大黄酸经时曲线过程并计算相应的药代动力学参数及绝对生物利用度。结果：SD大鼠灌胃及静脉注射高、中、低剂量大黄酸后,AUC与剂量间呈一定的线性关系（r〉0.99）,灌胃及静脉注射3个剂量下的半衰期结果相似。在上述研究范围内大黄酸在大鼠体内的药代动力学行为近似是线性的。用面积法,算得高、中、低3个剂量下大黄酸在大鼠体内的绝对生物利用度分别为16.4%、23.8%、19.4%。对6只Beagle犬进行随机交叉试验,静脉注射大黄酸真溶液（0.4mg/kg）和灌胃大黄酸混悬液（20mg/kg）,算得静注及灌胃后药物的消除半衰期分别为（1.77±0.93）、（3.25±0.80）h,Beagle犬体内的绝对生物利用度为（49.7±7.4）%。对Beagle犬组（6只）和SD大鼠灌胃3剂量组（18只）各只动物生物利用度进行方差分析,结果显示差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：大黄酸在不同动物间吸收存在一定的种属差异,吸收程度在Bea-gle犬体内略高于在大鼠体内。     

决明子中大黄素的提取、分离和纯化方法的研究

目的寻求获得高纯度大黄素的可行性。方法先用稀硫酸溶液将蒽醌苷水解成苷元，再用热氯仿将苷元提取出来，然后用PH8．0缓冲液将大黄酸从氯仿液中除去，再用0．2％NaOH反复萃取将大黄素从氯仿液中提取出来，用层析柱法将大黄素分离纯化，经用丙酮反复多次重结晶可得纯度较高的大黄素。结果本方法提纯得到的大黄素的纯度达到98．1％以上。结论该方法操作简单、实用性强、成本低、可以推广应用。     

HPLC法测定通腑胶囊中大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚及芦荟大黄素的含量

目的建立高效液相色谱法测定通腑胶囊中大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚及芦荟大黄素含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:Waters C18(250×4.6mm,5μm),以0.1%磷酸:甲醇(15∶85)为流动相,流速1.0μL/min,检测波长:254nm,柱温:35℃。结果大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚及芦荟大黄素进样量分别在0.0162~0.323μg、0.016~0.318μg、0.0164~0.328μg、0.008~0.16μg、0.020~0.406μg范围内进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系,相关系数均为0.9999,平均回收率分别为:99.0%、99.0%、99.2%、98.3%、99.4%(n=6)。结论该方法专属性强,重现性好,可用于通腑胶囊中蒽醌类成分的含量测定。     

白僵菌转化的一个新蒽醌苷类化合物

目的：研究白僵菌对大黄酸葡萄糖甲基化的转化作用。方法：在白僵菌培养液中加入大黄酸底物，利用生长细胞对其进行生物转化。发酵液离心后用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取部位通过各种色谱方法分离得到一个新化合物。运用氢谱碳谱以及二维核磁共振光谱鉴定结构。结果：转化产物为大黄酸糖基化衍生物，结构鉴定为7-O-（4’-甲氧基-β—D-葡萄糖）。结论：芦荟大黄素（1）是一个新化合物。     

大黄酸-N-β-羟乙基替加氟酯的合成及其骨亲和性

【目的】研究大黄酸衍生物的合成方法,探讨其骨亲和性。【方法】将大黄酸与替加氟衍生物耦联合成骨靶向的新型大黄酸衍生物,结构经质谱及核磁共振谱证实。用羟基磷灰石吸附试验评价它的体外骨亲和性。【结果】合成了大黄酸-N-β-羟乙基替加氟酯。实验显示该化合物的骨亲和性与四环素接近。【结论】大黄酸-N-β-羟乙基替加氟酯具有良好的骨亲和性。