大黄酸对果糖诱导的高尿酸大鼠的肾脏保护作用研究

目的：研究大黄酸对果糖诱导的痛风大鼠的肾脏保护作用。方法通过果糖喂养的方法制备痛风大鼠模型，连续灌胃大黄酸6周，测定血清肌酐、尿素氮、尿酸和黄嘌呤氧化酶含量等指标。结果大黄酸降低大鼠血清肌酐、尿素氮、尿酸和黄嘌呤氧化酶含量，改善了果糖诱导的大鼠肾脏结构的变化。结论大黄酸对果糖诱导的痛风大鼠具有肾脏保护作用。     

高效液相色谱法测定通便灵胶囊中大黄酸的含量

目的 :建立 HPL C法测定通便灵胶囊中大黄酸含量的方法。方法 :采用 Shim- pack VP- ODS(15 0 mm× 4 .6mm,5 μm)色谱柱 ;流动相为甲醇 -水 (70∶ 30 ,磷酸调至 p H=3) ;柱温 :2 4 o C;流速 :1.0 ml/ min;检测波长 :4 37nm。结果 :大黄酸线性范围为 0 .132～ 2 .6 4 μg,r=0 .9991,平均回收率 =10 0 .34% ,RSD=1.2 9%。结论 :此方法可做为通便灵胶囊中大黄酸含量测定的方法 ,为制定该制剂的质量控制标准提供了依据。     

Potential role of ATP-binding cassette transporters in the intestinal transport of rhein

Rhein, a lipophilic anthraquinone, exhibits anti-inflammatory and anti-tumor activities; however, it is hepatotoxic. ATP-binding cassette transporters, including P-glycoprotein (P-gp), breast cancer resistance protein (BCRP) and multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2), can pump toxicants from gut epithelial cells back into the intestinal lumen to prevent poisoning. We investigated their roles in rhein transport using a rat intestinal perfusion model and Caco-2, MDCKII-MDR1 (high expression of P-gp), MDCKII-BCRP (high expression of BCRP) and MDCKII-MRP2 (high expression of MRP2) cell models. The permeability of rhein in the duodenum significantly increased with increasing perfused concentration of rhein in the rat model, suggesting that efflux transporters were involved in rhein transport. In the Caco-2 cells, the permeability of rhein from the basolateral (B) to the apical (A) was significantly higher than that from A to B. In the presence of BCRP or MRP2 inhibitor, the permeability of rhein significantly decreased from B to A direction. In the MDCKII-BCRP cells, rhein was more permeable in B to A side than that in the opposite side. However, no significant differences of rhein permeability were observed in two directions in both MDCKII-MDR1 and MDCKII-MRP2 cells. Taken together, these results suggested that only BCRP was involved in rhein transport.     

Selective phytochemicals targeting pancreatic stellate cells as new anti-fibrotic agents for chronic pancreatitis and pancreatic cancer

Activated pancreatic stellate cells (PSCs) have been widely accepted as a key precursor of excessive pancreatic fibrosis, which is a crucial hallmark of chronic pancreatitis (CP) and its formidable associated disease, pancreatic cancer (PC). Hence, anti-fibrotic therapy has been identified as a novel therapeutic strategy for treating CP and PC by targeting PSCs. Most of the anti-fibrotic agents have been limited to phase I/II clinical trials involving vitamin analogs, which are abundant in medicinal plants and have proved to be promising for clinical application. The use of phytomedicines, as new anti-fibrotic agents, has been applied to a variety of complementary and alternative approaches. The aim of this review was to present a focused update on the selective new potential anti-fibrotic agents, including curcumin, resveratrol, rhein, emodin, green tea catechin derivatives, metformin, eruberin A, and ellagic acid, in combating PSC in CP and PC models. It aimed to describe the mechanism(s) of the phytochemicals used, either alone or in combination, and the associated molecular targets. Most of them were tested in PC models with similar mechanism of actions, and curcumin was tested intensively. Future research may explore the issues of bioavailability, drug design, and nano-formulation, in order to achieve successful clinical outcomes with promising activity and tolerability.     

大黄酸对2型糖尿病模型大鼠的保护作用

目的:研究大黄酸对2型糖尿病模型大鼠的保护作用。方法:腹腔注射链脲佐菌素联合高脂饲养以复制大鼠2型糖尿病模型。实验分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、吡格列酮(10 mg/kg)组、大黄酸(100 mg/kg)组。灌胃给药,每天1次,连续8周。测定大鼠尿量(UV)、体质量(BW)、肾质量(KW)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(Fins)、肌酐(Cr)含量,尿蛋白(UPRO)、尿白蛋白(UALB)量,计算肾脏肥大指数(KW/BW)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、尿蛋白/肌酐比值(PCR)、尿白蛋白/肌酐比值(ACR)、内生肌酐清除率(Ccr)。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠UV、BW、KW、TG、TC、FPG、FINS、Cr、UPRO、UALB量增加,KW/BW、HOMA-IR、PCR、ACR、Ccr升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,大黄酸组大鼠KW、TG、TC、FPG、Fins、UPRO、UALB、Cr量减少,KW/BW、Ccr升高,HOMA-IR、PCR、ACR降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:大黄酸具有降低2型糖尿病模型大鼠尿蛋白排泄的作用,其机制可能与改善胰岛素抵抗有关。     

大黄酸对大鼠肝纤维化形成的影响

目的观察大黄酸对肝纤维化形成的影响。方法采用体积分数60％的CCl4及5％的乙醇制备肝纤维化动物模型,分别用小剂量、大剂量大黄酸干预,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学方法观察抗转化生长因子β1(TGFβ1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,并观察肝组织胶原面积及病理变化。 结果(1)血清ALT(U/L)、HA(μg/L)、PCⅢ(μg/L)水平及肝组织中MDA(nmol/mg)含量,大黄酸大剂量组分别为78±18、217±75、16±6和1.88±0.34,模型对照组分别为150±16、321±97、31±14和3.67±0.68,两组比较t值分别为7.831、2.977、3.249和6.751,差异有非常显著性(P<0.01)。肝组织中SOD活性(NU/mg蛋白)大黄酸大剂量组为91.26±14.04,模型对照组为62.45±8.74(t=4.453,P<0.01)。(2)肝组织中TGFβ1、α-SMA的表达显著减少(P<0.05或P<0.01)。(3)肝组织胶原面积明显减少,纤维化程度明显改善(P<0.05或P<0.01)。结论大黄酸具有保肝作用和抗肝纤维化作用,其作用机制可能与其抗炎、抗氧化作用及抑制TGFβ1的活性、抑制肝星状细胞活化有关。     

常润茶服用方法对蒽醌类物质溶出的影响及其通便作用的相关性研究

目的：以常润茶为例研究蒽醌类物质的加水量及浸泡次数等服用方法对有效成分溶出及通便作用的影响。方法：利用紫外分光光度法建立总蒽醌的含量测定方法,利用高效液相色谱法建立番泻苷A、番泻苷B、大黄酸的含量测定方法,考察不同浸泡次数、加水量下常润茶水浸液中有效物质的含量变化。利用洛哌丁胺复制便秘模型进行通便作用的验证并探究常润茶对肠动力及黏液分泌的影响,观察不同浸泡次数、加水量对小鼠小肠推进率、首粒排黑便时间、5 h黑便粒数、粪便含水量以及结肠胃动素(MTL)、促胃液素(GAS)、生长抑素(SS)、P物质(SP)的影响。结果：加水量与蒽醌类物质的溶出正相关,加水60～100倍蒽醌类物质溶出差异不大;浸泡1次可将大部分蒽醌类物质溶出,从第2次浸泡开始,总蒽醌、番泻苷A、番泻苷B、大黄酸的含量均明显减小。动物实验结果显示加水倍数为40倍、60倍、100倍时,常润茶均可有通便作用,未出现腹泻等不良反应,60倍、100倍水量通便作用显著。加水100倍,反复冲泡多次通便作用不优于浸泡1次。结论：本实验为产品的精准应用提供实验依据,对于规范蒽醌类产品具有积极意义。     

黄芪多糖、黄芪甲苷对大黄酸肠吸收的影响

目的研究不同浓度大黄酸在大鼠不同肠段的吸收特性以及黄芪多糖、黄芪甲苷分别对大黄酸肠吸收的影响。方法建立检测大鼠肠道灌流液中大黄酸含量的高效液相色谱(HPLC)法,采用在体单向肠灌流模型,通过测定肠灌流液中大黄酸的浓度,计算大黄酸的吸收速率常数(Ka)和有效渗透率(Peff),以研究其低、中、高(27.2,47.6,68.0μg·mL-1)3个浓度在大鼠不同肠段的吸收特性,并观察黄芪多糖、黄芪甲苷对大黄酸肠吸收的影响。结果大黄酸的测定方法专属性、线性关系良好,精密度、准确度、稳定性、基质效应、绝对回收率均符合相关规定。大黄酸在27.2~68.0μg·mL-1质量浓度范围内,空肠、回肠中Ka、Peff值显著高于十二指肠和结肠。与黄芪多糖配伍后,大黄酸在空肠中Ka值减小(P<0.05);与黄芪甲苷配伍后,大黄酸在十二指肠中的Ka、Peff值增大(P<0.05),在回肠中的Peff值增大(P<0.05)。结论大黄酸在空肠和回肠中的吸收效果优于十二指肠和结肠,黄芪多糖可抑制大黄酸在空肠中的吸收,黄芪甲苷可显著促进大黄酸在十二指肠、回肠中的吸收。     

大黄酸通过抑制STAT3基因的表达调控骨肉瘤细胞的增殖和凋亡

目的:探讨大黄酸对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及潜在的作用机制。方法:以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,利用CCK-8实验检测大黄酸对MG-63细胞增殖的影响,并计算大黄酸作用48 h的半数抑制浓度（IC50）,采用该浓度进行后续的实验。转染STAT3 siRNA至MG-63细胞,qRT-PCR和Western blot检测分别在mRNA和蛋白水平上检测转染效果,采用CCK-8实验、克隆形成实验、流式细胞术验证大黄酸和STAT3 siRNA及其联合作用对MG-63细胞存活率、克隆形成、凋亡能力的影响,Western blot检测各组MG-63细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3的表达情况。结果:大黄酸能够呈浓度依赖性的抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,干预48 h的IC50为46.05 μmol/L。大黄酸或STAT3 siRNA均能降低MG-63细胞中STAT3的表达,抑制MG-63细胞存活率,阻碍细胞克隆形成能力,促进细胞凋亡,上调细胞中Bax和Cleaved Caspase-3的表达,下调Bcl-2的表达;且二者联合效果更显著。结论:大黄酸通过抑制STAT3基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖并促进细胞凋亡。     

大黄酸防治大鼠急性重型肝损伤的实验研究

目的探讨大黄酸（RH）对大鼠急性肝损伤的影响。方法连续2d灌胃硫代乙酰胺（TAA）制造急性肝损伤动物模型。26只Wistar大鼠随机分为正常对照组（N组）、TAA组和TAA＋RH组。T从＋RH组用RH30mg／kg灌胃,4d后制模,检测血浆丙氨酸（ALT）、一氧化碳（NO）内毒素水平的变化判定肝功能;检测全血黏度、血小板聚集率判定血液流变学变化;HE、Weigert染色及免疫组化法分别观察肝脏病理改变、肝脏微循环改变及肝脏一氧化氮合酶（eNOS和iNOS）的表达。结果TAA组血浆ALT、内毒素、NO、全血黏度、血小板聚集率明显高于N组（P〈0．05）;TAA＋RH组与TAA组相比,ALT、内毒素、NO、全血黏度、血小板聚集率显著降低（P〈0．05）;T从＋RH组与TAA组相比,肝脏eNOS表达上调而iNOS表达下调（P〈0．05）。结论RH通过降低内毒素水平,调节肝脏eNOS与iNOS表达,从而改善肝脏微循环,防治TAA所致的急性肝损伤。