小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究

目的 在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体（ScFv)，并获得具有生物学活性的ScFv。方法 利用PCR方法将2F7单抗重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）通过一人工设计的柔性连接肽（Linker)连接，再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中，构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv。将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达，并对表达产物进行纯化和稀释复性。结果 获得了2F7单链抗体的高效表达，表达蛋白大小约27.4kD，以包涵体形式存在。包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后，获得了有功能的单链抗体。结论 成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗F27的单链抗体，并对其进行了纯化和复性，将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用。     

抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达

为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。     

贝伐单抗治疗转移性结直肠癌研究进展

贝伐单抗(bevacizumab)是一种重组人源化抗血管内皮生长因子的单克隆抗体,可与肿瘤细胞上的血管内皮生长因子(VEGF)特异性结合,通过抑制血管生成而抑制肿瘤生长.贝伐单抗已于2004年2月获FDA批准,与5-氟尿嘧啶为基础的化疗方案联合一线治疗转移性结直肠癌.推荐剂量为5 mg/kg,每14天给药1次,静脉滴注.贝伐单抗的耐受性良好,较常见的不良反应有高血压、出血和血栓形成.     

免疫调节药托西莫单抗(131I-tositumomab)

本品由单克隆抗体托西莫单抗和131Ⅰ放射性标记的托西莫单抗组成。具有抗肿瘤和放射免疫治疗功能。CD20抗原通常于正常或恶性B淋巴细胞表面表达。而托西莫单抗为抗CD20的鼠IgG2ay单克隆抗体。托西莫单抗由两条各含451个氨基酸的鼠Y2a重链和含220个氨基酸的Y轻链组成。其分子量约为150kD.13Ⅰ-托西莫单抗是托西莫单抗通过共价健与131Ⅰ结合的放射碘化衍生物。     

贝伐单抗治疗新生血管性青光眼的研究进展

贝伐单抗(bevacizumab)是一种新型的抗血管内皮生长因子人源化单克隆抗体,能有效地减少新生血管的活动性,降低新生血管的渗透性,促进虹膜和房角新生血管消退,有效地控制眼压.玻璃体腔注射贝伐单抗可单独或联合手术治疗新生血管性青光眼,为治疗新生血管性青光眼开辟了新的道路.本文就贝伐单抗治疗新生血管性青光眼的进展进行综述.     

亚急性乐果染毒对自发性高血压大鼠心血管系统的影响

[目的]观察14d乐果染毒对自发性高血压大鼠(SHR)心血管系统的影响,探讨钙离子稳态在该影响中的作用。[方法]雄性SHR,灌胃染毒,染毒剂量分别为0、12.5、25和50mg/kg,每天1次,连续14d。尾袖法测定大鼠血压,第15天处死动物,无机磷酸根法和RT-PCR检测酶活力和基因表达。[结果]25mg/kg以下乐果染毒大鼠血压升高,当剂量达到50mg/kg,大鼠血压没有显著升高的变化。染毒结束后,25mg/kg染毒组大鼠心肌Ca2 -ATPase活力显著升高,达到(2.32±0.33)μmolPi/(mg蛋白·h);50mg/kg组大鼠心肌Ca2 ATPase活力和Na -K -ATPase均显著升高,分别为(2.36±0.62)和(2.74±0.52)μmolPi/(mg蛋白·h)。Ca2 -ATPase基因表达随染毒剂量的增加而逐渐上调,剂量>25mg/kg时,表达值为(1.24±0.11),差异有显著性(P<0.05);50mg/kg乐果可诱导兰尼碱受体(RyR)的mRNA表达显著高于对照组(P<0.05),表达值分别为(1.49±0.27)和(0.96±0.16)。[结论]乐果引起自发性高血压大鼠血压的变化规律与接触剂量有关,一定剂量范围的可以升高。钙离子的代谢紊乱可能是乐果引起的心血管毒作用的机制之一。     

血清胃蛋白酶原Ⅰ、糖蛋白抗原72-4、单抗MG7相关抗原对胃癌诊断的临床研究

目的探讨联合检测血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、糖蛋白抗原72-4(CA72-4)、单抗MG7相关抗原(MG7Ag)对胃癌诊断的临床价值。方法利用免疫放射分析法(IRMA)检测PGⅠ、CA72-4,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测MG7Ag在胃癌患者血清中含量并与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡患者及正常人做对比,分析三种指标对胃癌诊断的临床价值及与胃癌临床生物学行为的关系。结果胃癌患者血清PGⅠ含量为(35.79±11.16)ng/m l明显低于各对照组,CA72-4含量为(5.91±2.54)U/m l、MG7Ag含量为(7.09±4.56)U/m l均明显高于各对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌患者血清PGⅠ、CA72-4、MG7Ag的阳性表达率分别为33.33%,39.39%,51.52%;联合检测阳性率PGⅠ+CA72-4为57.58%,PGⅠ+MG7Ag为69.70%,CA72-4+MG7Ag为72.73%,PGⅠ+CA72-4+MG7Ag为78.79%。结论血清PGⅠ、CA72-4、MG7Ag与胃癌诊断及其临床生物学行为密切相关,有助于判断胃癌的转移及预后;联合检测可提高对胃癌诊断的准确率。     

那他珠单抗治疗多发性硬化研究进展

α4β1整合素在多发性硬化发病机制的最早环节中起关键作用,阻断α4整合素可防止自身免疫细胞通过与中枢神经的微血管粘附而进入中枢神经系统,从而减轻炎症性脱髓鞘反应。那他珠单抗是针对整合素的α4亚单位的单克隆抗体,临床试验表明主要通过抑制粘附过程而防止出现新病灶,对已有病灶也有减轻炎症反应的作用,从而减少复发。     

086 新药研究与开发

雷尼珠单抗照亮了湿性老年黄斑变性病人的未来 遗传技术公司／诺华公司研发的雷尼珠单抗（ranibizumab）为期一年的MARINAⅢ期临床试验全部资料显示，雷尼珠单抗是第一个使湿性老年黄斑变性病人视力改善的血管内皮生长因子（VEGF）抑制剂。Ⅲ期临床试验中，人选716名病人，随机分为雷尼珠单抗0．3mg和0．5mg组或安慰剂组，每月给药眼内注射1次，共2年。主终点为ETDR视力表上看不清的字数应不大于15个。     

血管内皮生长因子抑制剂--贝伐单抗

贝伐单抗(bevacizumab)是一种基因工程的单克隆抗体药物,通过抑制能够刺激新血管形成的血管内皮生长因子(VEGF),使肿瘤组织无法获得所需的血液、氧和其他营养而最终"饿死",达到抗癌的目的.