胡桃科植物化学及生物活性研究概况

胡桃科含有黄酮类、萜类、萘醌及其苷、多酚、有机酸等多种成分,具有抑制醛糖还原酶、抗肿瘤、镇痛消炎、抑菌及生物毒性等多种生物活性,值得进一步研究和开发。     

颗粒溶素的表达纯化及生物学活性分析

目的:采用原核表达系统对颗粒溶素(granulysin,GNLY)进行体外表达,纯化及活性鉴定.方法:以体外培养的人外周血单个核细胞(PBMC)为模板,RT-PCR扩增编码GNLY的cDNA片段,插入pMD-18-T 载体,测序正确后再亚克隆到质粒pET28a( ) 中,构建重组表达质粒pET28a( )-GNLY,转化大肠杆菌BL21(DE3) plysS,IPTG诱导表达融合蛋白,包涵体经变复性后用Ni亲和层析纯化,CFU法测定蛋白活性.结果:成功地将GNLY cDNA片段插入载体pET28a( )中,构建了表达质粒pET28a( )-GNLY.经诱导在原核表达系统中以包涵体形式高效表达了相对分子质量为9 000的融合蛋白,变复性纯化后的GNLY蛋白经CFU法检测,发现其具有细胞毒活性且细胞毒作用具有剂量依赖性.结论:本实验利用原核表达系统成功地表达了具有生物学活性的GNLY,为研究其功能、作用机制及临床应用奠定了基础.     

人参皂苷Rd的研究进展

人参皂苷Rd是二醇型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物之一,具有广泛的生物活性.对心脑血管、神经系统、免疫系统等作用独特;在镇痛、神经保护作用方面,人参皂苷Rd相对于其他单体皂苷也较强.人参皂苷Rd的结构复杂,化学合成至今尚未成功,需从植物药中提取以满足医疗和科研的需要,但因植物中人参皂苷Rd的量较低,从植物中提取的方法 难以满足需要.因此,国内外在有效获取人参皂苷Rd方面也进行了大量研究.对人参皂苷Rd的生物活性、制备方法 等研究进行了详细综述.     

长毛香科科化学成分及生物活性研究

目的:研究长毛香科科化学成分及生物活性.方法:采用各种色谱法分离,运用多种波谱技术和X-衍射鉴定结构;利用体外DPPH微量抗氧化模型、α-葡萄糖苷酶抑制模型和纸片扩散法进行抑菌活性筛选.结果:从长毛香科科醋酸乙酯部位分离鉴定了8个化合物:三(十八酸)甘油酯(1),2,5-二氧环戊酮(2),羊齿烯醇(3),△~(5,22)-豆甾烯醇(4),24-去亚甲胆甾-5,22(E)-二烯-3β-醇(5),α-菠菜甾醇(6),3,4-二羟基苯丙烯酸乙二醇单酯(7),3,4-二羟基苯丙烯酸(8).结论:化合物1～8为首次从该属中分离得到.生物活性测试结果表明化合物3[IC_(50)=(37.63±3.45)mg·L~(-1)],6[IC_(50)=(178.92±4.99)mg·L~(-1)]和8[IC_(50)=(44.32±7.02)mg·L~(-1)]体外抑制α-糖苷酶抑制活性远高于对照acarbose[IC_(50)=(1 081.27±12.3)mg·L~(-1)];化合物7[IC_(50)=(4.81±0.96)mg·L~(-1)]和8[IC_(50)=(4.16±0.11)mg·L~(-1)]抗氧化活性高于对照BHT[IC_(50)=(35.64±0.36)mg·L~(-1)]和BHA[IC_(50)=(8.74±0.39)mg·L~(-1)];化合物5～8均对小麦赤霉病有明显的抑制活性;化合物5和8对番茄灰霉病菌有明显抑制效果.     

基于关键细胞信号转导效应靶标建立抗肝纤维化中药的生物活性评价与质量控制新方法＊

中药质量是制约中医药发展的重要瓶颈，指纹图谱等基于成分分析的中药质控方法存在效应成分不明及与活性作用不符等局限，亟需发展基于生物活性评价的新方法。立足于扶正化瘀方抗肝纤维化的长期临床与药理研究积累，以及国际临床试验的重要需求，本文提出以下假说：扶正化瘀存在抗肝纤维化的主要药理靶标群，药物对该靶标群基因转录活性的影响，可良好反映其抗肝纤维化药效。首先，本研究选择肝星状细胞、肝内皮细胞、肝细胞与巨噬细胞等4种细胞系，考察溶媒、作用浓度与时间等因素对扶正化瘀细胞效应的影响，建立扶正化瘀体外标准给药方法；其次，基于细胞信号通路，蛋白芯片与网络药理相结合发现扶正化瘀抗肝纤维化的关键药理靶标；最后，构建表征中药靶标基因转录活性的报告基因质粒与稳转细胞株，比较不同批次扶正化瘀对靶标的基因转录活性、细胞生物活性与模型动物肝纤维化的影响，并指纹图谱分析其成分。以建立抗肝纤维化中药的生物活性评价与质量控制新方法，促进中药产品质量提高与创新药物研发。     

Evidence for proctolin-like substances in the central nervous system of the leech Hirudo medicinalis

The distribution of proctolin-like immunoreactive (PLI) cells was mapped in the central nervous system of the leech Hirudo medicinalis. In segmental ganglia, PLI cells can be divided into two groups: cells that stain repeatedly in every successive ganglion, and cells that stain only in specific segmental ganglia. The number of PLI cells, therefore, ranged from eight to 20 cells per ganglion. One bilateral pair of PLI cells (cells PLI-1) was further characterized morphologically by Lucifer yellow and horseradish peroxidase cell injections. Cell PLI-1 conforms in soma position, morphology, and physiological properties with cell 101, which has been previously classified as an inhibitory motoneuron to the flattener muscles. A locust bioassay (O'Shea and Adams, Science 213:567-569, 1981) was used to detect the presence of proctolin-like bioactivity. Extracts of leech ganglia when applied to the extensor tibialis muscle of the locust leg induced a proctolin-like response similar to the responses induced by proctolin standards. This work extends the finding of proctolin-like substances to the annelid phylum.     

Microscopic appearance and apical seal of root canals filled with gutta‐percha and ProRoot Endo Sealer after immersion in a phosphate‐containing fluid

Aim To investigate the sealing quality of ProRoot Endo Sealer, a calcium silicate‐based sealer and its morphologic characteristics after immersion in a phosphate‐containing fluid (PCF). Methodology Single‐rooted canals were filled with gutta‐percha and either ProRoot Endo Sealer or two commercially available zinc oxide eugenol (ZOE)‐based and epoxy resin‐based sealers. The sealers were allowed to set for 6 days and the filled teeth were immersed in PCF for 24 h before fluid leakage evaluation. After initial leakage evaluation at the 7th day, each filled root was restored and reimmersed in PCF for 28 days before the second phase of leakage evaluation at 35 days. Cryofractured specimens of additional teeth filled with the three sealers were examined using scanning electron microscopy after immersion in PCF for the two periods. Results One‐way repeated measures anova and Tukey test revealed significant differences between the ZOE‐based sealer at 35 days and the calcium silicate‐based sealer at 35 days (P < 0.001), and between the ZOE‐based sealer at 7 days and the calcium silicate‐based sealer at 35 days (P = 0.001). No difference was found between the epoxy resin‐based sealer and the calcium silicate‐based sealer after both storage periods. Cryofractured calcium silicate‐based sealer specimens demonstrated apatite‐like crystalline deposits along the apical and middle thirds of the canal walls via transformation from amorphous calcium phosphate‐like precursors. Conclusions ProRoot Endo Sealer is comparable in sealing quality to the epoxy resin‐based sealer and seals better than the ZOE‐based sealer after immersion in PCF. The calcium silicate‐based sealer also demonstrates ex vivo bioactivity when it comes into contact with phosphate ions.     

铁钉菜化学成分的研究(3)

目的 :对铁钉菜进行化学成分研究。方法 :采用稻瘟霉模型生物活性追踪方法 ,应用多种色谱技术进行分离 ,根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。结果 :分离并鉴定了7个化合物 :(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-(11Z-十八碳烯酰基 )-3-O-β-D-吡喃半乳糖基甘油 (I) ,(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-十四碳酰基-3-O-(6 '-硫代-α-D-脱氧吡喃葡萄糖基 )甘油 (Ⅱ) ,(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-十六碳酰基-3-O-(6 '-硫代 -α-D-脱氧吡喃葡萄糖基 )甘油 (Ⅲ) ,(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-(11Z-十八碳烯酰基 )-3-O-(6 '-硫代-α-D-脱氧吡喃葡萄糖基 )甘油 (Ⅳ ) ,硬脂酸 (V) ,肉豆蔻酸甲酯 (Ⅵ)和棕榈酸 (Ⅶ)。结论 :I～Ⅵ系首次从铁钉菜中得到 ;I,Ⅱ ,Ⅳ为新天然产物 ,I～Ⅳ具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性和较弱的肿瘤细胞毒活性。     

芭蕉花活性成分提取及其体外生物活性研究

目的 研究芭蕉花的活性成分及其体外生物活性.方法 通过硅胶柱色谱、大孔树脂、TLC分离等对芭蕉花提取物进行分离,并用高效液相色谱,结合质谱分析等方法,进行成分鉴定;采用体外MTT法进行芭蕉花活性组分对抑制肝癌BEL-7402细胞增殖作用的筛选,对抑制AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖作用进行活性筛选.结果 通过液-质分析,从芭蕉花乙酸乙酯提取物和石油醚提取物中发现其中有一种化合物可能为豆甾醇.MTT筛选发现芭蕉花石油醚提取物的4种萃取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用(P<0.01),且呈一定的剂量和时间依赖性;芭蕉花的3种提取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),且其抑制作用呈一定的剂量和时间依赖性.结论 芭蕉花石油醚提取物的石油醚萃取部位和乙酸乙酯萃取部位对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用,72 h的IC50分别为67.4μg/mL和34.5μg/mL,且石油醚提取物和乙酸乙酯提取物对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖有抑制作用,72 h的IC50为55.5μg/mL.从芭蕉花提取物中分离出单体豆甾醇,为芭蕉花活性成分的深入研究提供了参考.     

药食两用念珠藻生物活性成分的研究进展

地木耳、葛仙米、发菜等念珠藻食用和药用历史悠久,具有除疲劳、利肠胃、降脂明目等功效,外用也可以治疗烫伤等症.近年来的研究表明,念珠藻含有多种营养和活性成分,其中多糖类、蛋白类、脂类、色素类等成分具有抗氧化、抗感染、免疫调节、抗肿瘤等生物学和药理学活性.本文以药食两用念珠藻为主,综述念珠藻生物活性成分的研究进展,以期为念珠藻在生物医药领域的开发和应用提供参考.