Aldosterone receptor sites on plasma membrane of human vascular endothelium detected by a mechanical nanosensor

The mineralocorticoid hormone aldosterone acts on target cells of kidney, colon, and the cardiovascular system through genomic and nongenomic pathways. Although the classical intracellular mineralocorticoid receptor plays a key role in mediating both pathways, it is unclear whether there are specific aldosterone receptors located on the cell surface. To search for such sites in vascular endothelium, we used an atomic force microscope (AFM) which measures unbinding forces based on single molecular recognition between an aldosterone-loaded AFM tip and the cell membrane. Aldosterone was tethered covalently via linker molecules to an AFM tip. Human endothelial cells (EA.hy926) were grown in culture and studied in buffer at 37°C. Using the aldosterone-functionalized AFM tip as a mechanical nanoscale indenter, unbinding forces could be measured at randomly chosen sites of the plasma membrane. Sites with strong interactions between AFM tip and cell surface could be identified exhibiting unbinding forces of about 65 pN. The binding probability between the aldosterone-loaded tip and the cell surface at selected membrane sites was 53 ± 7.2%. Addition of an excess supply of aldosterone to the bath solution blocked the binding of the aldosterone-loaded tip to the cell surface. The binding probability was reduced to 8.0 ± 1.8% when an excess supply of aldosterone was added to the bath. However, it was not influenced by the addition of spironolactone or dexamethasone. We conclude that aldosterone receptor sites exist on the cell surface of vascular endothelial cells distinct from the classical mineralocorticoid receptors and insensitive to glucocorticoids. Binding of aldosterone to these receptors initiates an intracellular signaling cascade that precedes the classical genomic response and most likely participates in the control of vascular resistance.     

螺内酯和美托洛尔对老年慢性心力衰竭左室重构的影响

目的探讨螺内酯和关托洛尔联合应用对老年慢性心力衰竭患者左室重构的影响。方法老年慢性心力衰竭患者60例，心功能（NYHA）分级Ⅲ～Ⅳ级者；左心室射血分数（LVEF）≤0．45，分为3组。A组20例常规治疗（利尿、扩血管及强心等药物）加用螺内酯与关托洛尔，B组20例在常规治疗加美托洛尔，C组20例常规治疗加用螺内酯。3个月后超声心动图测量左室收缩末容积（LVESV），左室舒张末容积（LVEDV），射血分数（LVEF），评价左室容积和左心功能。结果A组LVESV、LVEDV明显降低，LVEF增加，与B、c组相比有显著差异（P〈0．05）。A组、B组、C组治疗后与治疗前比较，LVESV、LVEDV降低，LVEF增加（P〈0．05）。治疗后B组与C组相比无显著差异（P〉0．05）。结论老年慢性心力衰竭患者Ⅲ-Ⅳ级在常规治疗基础上联合应用螺内酯和美托洛尔，可更好地抑制左室重构，防止左室扩张，抑制心衰的发生。     

氢氯噻嗪与螺内酯或卡托普利长期联用对高血压患者血清高敏C-反应蛋白水平的影响

目的 研究氢氯噻嗪(HCTZ)与螺内酯或卡托普利长期联用对高血压患者血清高敏C-反应蛋白(hsCRP)水平的影响.方法 采用多中心、随机、平行对照研究,选择轻中度高血压患者,经安慰剂洗脱2周和HCTZ12.5 mg口服1 A./d导入6周后随机分为HCTZ(12.5 mg口服1次/d)组、螺内酯组(HCTZ 12.5mg口服1次/d+螺内酯20 mg口服1 K/d)和卡托普利组(HCTZ 12.5 mg口服1冼/d+卡托普利25 mg口服2次/d).随访1年末,因已公认联合治疗效果优于单药治疗,故将HCTZ组患者随机分入螺内酯组和卡托普利组.治疗期间每月随访1次,监测血压,每年行血清hsCRP水平检测.共随访4年.4年末进行分析,将坚持服用试验药物的患者视为治疗组,未坚持服用者视为对照组,比较两组治疗前后血清hsCRP水平的变化.结果 4年末,治疗组患者的血压及血清hsCRP水平较基线显著下降,且与对照组比较下降幅度差异有统计学意义(P<0.05或0.01).多因素分析结果 表明,治疗前收缩压和血清hsCRP水平、治疗后收缩压下降值及年龄是影响血清hsCRP水平下降的主要因素(均P<0.05).结论 HCTZ与螺内酯或卡托普利长期联用在有效降低患者血压的同时,能显著降低其血清hsCRP水平,收缩压下降值是影响血清hsCRP水平的主要因素.     

依普利酮对糖尿病肾病患者微血管病变及尿蛋白含量的影响

[目的]探讨依普利酮治疗糖尿病肾病患者的疗效及对微血管病变及尿蛋白含量影响.[方法]选择本院2013年1月至2014年10月期间收治83例糖尿病肾病患者作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组(n=42)与对照组(n=41).对照组应用螺内酯治疗,观察组用依普利酮治疗,比较两组治疗前后24 h尿蛋白、尿微量白蛋白(uAlb)、尿免疫球蛋白G(uIgG)、血浆层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平变化.[结果]两组治疗前24 h尿蛋白,uAlb与uIgG及LN、PCⅢ与CⅣ水平相比较差异均无显著性(P>0.05),治疗后各项指标均降低,组内前后相比较差异有显著性(P<0.05).同时观察组各项指标治疗后比对照组改善幅度更大,且两组间相比较差异有显著性(P<0.05).[结论]依普利酮为新型选择性醛固酮拮抗剂,在糖尿病肾病患者中应用可显著降低患者尿蛋白量并改善微血管病变,同时抑制并逆转肾脏纤维化,其效果理想,值得借鉴推广.     

不同剂量利尿剂联合应用对心衰患者血钾的影响

目的:探讨不同剂量排钾与保钾利尿剂联合应用对血钾含量的影响。方法:选取我院住院心衰患者642例,随机均分为A、B、C三组,均在常规心衰治疗基础上给予排钾利尿剂呋塞米,和保钾利尿剂螺内酯联合治疗,A、B、C三组呋塞米与螺内酯口服剂量比例分别为1:1,1:2,1:3,并排除饮食,肾功,基础血钾对血钾的干扰,监测血钾含量及肾功。结果:A、B、C三组低血钾发生率分别为75.2%,1.4%,0%(P0.005,x2=416.78),高血钾发生率分别为0%,0%,21.0%(P0.005,x2=96.78),以B组(呋塞米与螺内酯比例1∶2)对血钾影响最小。结论:在正常饮食、肾功,基础血钾情况下,呋塞米与螺内酯1∶2联合应用对血钾含量影响最小。     

醛固酮-WNK4途径参与盐负荷对上皮钠通道的调节

目的 通过建立生理条件下的盐负荷饮食大鼠模型,观察醛固酮和WNK4在水盐代谢调节中的作用。 方法 将SD大鼠分为5组：高盐组（H,4% NaCl）、正常盐组（N,0.4% NaCl）、低盐组（L,0.07% NaCl）、高盐加醛固酮组（H+A,4% NaCl+1 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1醛固酮）、低盐加螺内酯（L+S,0.07% NaCl+0.1 g&#8226;kg-1&#8226;d-1螺内酯）,所有大鼠自由饮水,喂养2周。用放射免疫法检测血浆醛固酮的变化。应用实时定量PCR和Western印迹法检测大鼠肾脏上皮钠通道γ亚基（γENaC）、WNK4的mRNA和蛋白的变化。 结果 H组大鼠血浆醛固酮水平低于N组（P < 0.05）,H+A组高于H组（P < 0.05）;L组大鼠血浆醛固酮水平高于N组（P < 0.05）,显示SD大鼠造模成功。L组大鼠肾脏γENaC蛋白表达高于N组,但是L+S低于L组;同时H组低于N组,H+A组高于H组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA变化趋势和蛋白变化趋势一致。H组肾脏WNK4的蛋白表达高于N组,但是H+A组低于H组;同时L组低于N组,L+S组高于L组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。mRNA的变化趋势和蛋白的变化趋势一致。 结论 饮食中的盐可以调节γENaC在肾脏的蛋白表达,醛固酮和WNK4都参与了机体对盐的调节,WNK4受到醛固酮的负调节作用。     

培哚普利联合醛固醇受体拮抗剂对心房纤颤犬心房结构重构的影响

目的:观察培哚普利和螺内酯及二者联用对长期心房快速起搏诱发心房纤颤(房颤,AF)犬心房结构和功能重构的影响。方法:实验犬24只,随机分为4组,即对照组、培哚普利组(P组)、螺内酯组(S组)和二者联用组(P+S组)。各组心房快速起搏8周,建立AF犬模型。分别于起搏前、起搏4周及8周测定血浆血管紧张素II(AngII)和醛固酮(Ald)水平;起搏前及起搏后8周,测定左心房结构和功能变化;起搏8周后停止起搏,观察各组犬AF维持的例数及AF自行持续时间;Masson染色检测各组犬心房肌胶原容积分数(CVF)改变。结果:与对照组相比,P组、S组和P+S组犬起搏4周和8周后血浆AngII及Ald水平明显降低,起搏8周后左心房左右径、上下径、收缩末期容积和舒张末期容积明显减小,左心房射血分数显著增大,停止起搏后AF维持率明显减少,AF平均持续时间明显缩短,CVF值明显降低。而3个用药组相比差异无统计学意义。结论:培哚普利和醛固酮受体拮抗剂(螺内酯)能够阻止长期心房快速起搏AF犬心房结构功能的改变及心房纤维化,减少AF发生率及持续时间,但二者联用效果并不优于单药。     

螺内酯联合依那普利对老年慢性心力衰竭患者血流动力学影响研究

目的：探讨螺内酯联合依那普利对老年慢性心力衰竭患者血流动力学的影响。方法：将210例老年慢性充血性心力衰竭患者按1∶1随机分为治疗组和观察组。对照组给予常规抗心力衰竭治疗,观察组在对照组的基础上加用螺内酯和依那普利治疗。结果：观察组的总有效率高于对照组（P=0.0005）,并且观察组患者的左心射血分数（LVEF）、左心室舒张早期充盈速度（VE）、舒张晚期充盈速度（VA）、VE/VA比值等指标均明显高于对照组（P值均〈0.05）。结论：螺内酯联合依那普利能改善老年慢性充血性心力衰竭患者的心脏功能,且无明显不良反应。